本文選題：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 + 流式細(xì)胞技術(shù)　； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的:類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是以全身關(guān)節(jié)部位的慢性炎癥和骨質(zhì)破壞為主要病理特征的自身免疫性疾病,RA發(fā)病機制復(fù)雜,多種免疫細(xì)胞參了RA的發(fā)病過程。目前認(rèn)為:Th1/Th2細(xì)胞功能失衡,Th1和Th17細(xì)胞因子大量分泌導(dǎo)致的過度炎癥可能是RA發(fā)病的中心環(huán)節(jié)。RA病率達(dá)0.4-1%,致殘率超過腦血管疾病,目前尚缺乏特效的RA藥物和治療手段。近年發(fā)現(xiàn)恒定自然殺傷T細(xì)胞(invariant nature killer T,i NKT)在自身免疫性疾病中有重要作用,并且與RA發(fā)病密切相關(guān)。通過觀察RA患者外周血中i NKT細(xì)胞頻率及功能的動態(tài)變化、分析i NKT頻率與IFN-γ/IL-4比值的相關(guān)性,揭示i NKT在RA中的特殊功效和作用環(huán)節(jié),進(jìn)一步明確i NKT細(xì)胞在RA發(fā)病中的意義,是確定RA治療新靶標(biāo)的重要基礎(chǔ)。方法:收集70例RA患者(并對其中30例患者在緩解期連續(xù)跟蹤)和40例健康人外周靜脈抗凝血并分離單個核細(xì)胞(peripheral blood mono-nuclear,PBMC),采用流式細(xì)胞技術(shù)(Fluorescence-activated cell sorting,FACS)分析樣本中i NKT細(xì)胞頻率;再對PBMC體外培養(yǎng),FACS動態(tài)檢測i NKT細(xì)胞增殖頻率;MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine kit檢測相應(yīng)血清及PBMC培養(yǎng)上清中IFN-γ/IL-4的水平;RT-PCR檢測i NKT細(xì)胞中IFN-γm RNA與IL-4 m RNA表達(dá)水平。結(jié)果:與健康對照組相比,RA患者外周血i NKT細(xì)胞頻率顯著降低(P0.05),治療后緩解期患者i NKT細(xì)胞頻率有所恢復(fù),與活動期RA患者比較差異顯著(P0.05),與健康對照組比較無顯著性差異(P0.05);與健康對照組相比,活動期RA患者血清及PBMC培養(yǎng)上清中IFN-γ/IL-4比值升高,差異顯著(P0.05)。緩解期RA患者血清中IFN-γ/IL-4比值下降,與活動期比較差異顯著(P0.05),與健康對照組比較無顯著性差異(P0.05);與健康對照組相比,RA患者i NKT細(xì)胞增殖頻率顯著降低(P0.05),增殖延遲,緩解期患者i NKT細(xì)胞增殖頻率有所恢復(fù),與活動期RA患者比較差異顯著(P0.05),與健康對照組比較無顯著性差異(P0.05);與健康對照組比較,活動期RA患者i NKT細(xì)胞中IFN-γm RNA表達(dá)升高,IL-4 m RNA表達(dá)降低(P0.05)。緩解期RA患者與健康對照組間IFN-γm RNA、IL-4 m RNA表達(dá)水平的差異不明顯(P0.05);RA患者外周血中i NKT細(xì)胞頻率與IFN-γ/IL-4比值呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:RA患者存在i NKT細(xì)胞頻率低下與功能缺陷。i NKT細(xì)胞參與RA發(fā)病過程,且與病情活動性密切相關(guān)。
[Abstract]:Objective : To investigate the relationship between the frequency of i NKT cells and the levels of IFN - 緯 / IL - 4 in peripheral blood mononuclear cells ( PBMC ) of patients with rheumatoid arthritis ( RA ) . Compared with healthy control group , the frequency of IFN - 緯 mRNA and IL - 4 mRNA in patients with RA were significantly lower than those in healthy control group ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R593.22

【參考文獻(xiàn)】

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1 孟明;王澤瑞;李春曉;韓華;史建紅;陳華;李小六;陳冬志;;新型合成的免疫調(diào)節(jié)劑CH1a促進(jìn)人iNKT細(xì)胞功能的研究[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2013年06期

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本文編號：1880007