本文選題：胰島α細(xì)胞 + 胰島β細(xì)胞��； 參考：《吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期

【摘要】：目的:探討大鼠胰島α細(xì)胞和胰高血糖素樣肽1(GLP-1)對(duì)β細(xì)胞(INS-1細(xì)胞,即胰島素瘤細(xì)胞)功能的影響,闡明α細(xì)胞與INS-1細(xì)胞混合移植對(duì)降糖效果影響的可能機(jī)制。方法:采用MTT法分析10%、20%和30%胰島α細(xì)胞條件培養(yǎng)基和0.03、0.30、3.00和30.0mg·L~(-1) GLP-1作用下INS-1細(xì)胞的增殖能力;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)10%、20%和30%胰島α細(xì)胞、胰島α細(xì)胞條件培養(yǎng)基和不同濃度GLP-1作用下INS-1細(xì)胞胰島素釋放水平;采用激光共聚焦顯微鏡分析高糖和GLP-1作用下INS-1細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度;采用Western blotting法分析不同濃度的胰島α細(xì)胞條件培養(yǎng)基和不同濃度GLP-1作用下胰島素蛋白表達(dá)水平;將INS-1細(xì)胞、INS-1細(xì)胞與α細(xì)胞的混合物移植至糖尿病裸鼠左腎包膜下,監(jiān)測(cè)血糖,觀察腎臟形態(tài),采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)移植部位細(xì)胞中胰島素和胰高血糖素水平。結(jié)果:與對(duì)照組比較,胰島α細(xì)胞條件培養(yǎng)基和GLP-1均可促進(jìn)INS-1細(xì)胞增殖和胰島素釋放(P0.05)。激光共聚焦顯微鏡分析,GLP-1可刺激INS-1細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高(P0.05)。Western blotting法檢測(cè),與對(duì)照組比較,胰島α細(xì)胞條件培養(yǎng)基和GLP-1作用下INS-1細(xì)胞中胰島素蛋白表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與移植前比較,糖尿病裸鼠腎包膜下移植INS-1細(xì)胞35d時(shí)血糖明顯下降(P0.05),甚至出現(xiàn)低血糖,移植部位明顯腫脹;移植INS-1和α細(xì)胞混合物的糖尿病裸鼠血糖無(wú)明顯變化(P0.05),移植部位未見(jiàn)明顯腫脹。免疫組織化學(xué)染色,移植INS-1細(xì)胞部位的組織既表達(dá)胰島素又表達(dá)胰高血糖素。結(jié)論:胰島α細(xì)胞及其分泌物可促進(jìn)INS-1細(xì)胞增殖和胰島素釋放,但α細(xì)胞與INS-1細(xì)胞混合移植給糖尿病裸鼠可降低INS-1細(xì)胞移植的降糖效果,其機(jī)制可能與INS-1細(xì)胞既表達(dá)胰島素基因又表達(dá)胰高血糖素基因有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of rat islet 偽 cells and glucagon like peptide 1 (GLP-1) on the function of 尾 cell line INS-1 cells (insulinoma cells), and to elucidate the possible mechanism of the effect of mixed transplantation of 偽 cells and INS-1 cells on the hypoglycemic effect. Methods: MTT assay was used to analyze the proliferative ability of INS-1 cells in conditioned medium of 20% and 30% islet 偽 cells and 0.03 0.300.303.00 and 30.0mg Ln (-1) GLP-1, and 10% and 30% islet 偽 cells were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa), and 10% and 30% of islet 偽 cells were detected by enzyme linked immunosorbent assay (Elisa). The insulin release level of INS-1 cells was determined by laser confocal microscopy under different concentrations of GLP-1 and conditioned medium of islet 偽 cells, and the concentration of Ca2 in INS-1 cells with high glucose and GLP-1 was analyzed by confocal laser microscopy. The expression of insulin protein in different concentrations of islet 偽 cell conditioned medium and different concentration of GLP-1 was analyzed by Western blotting method, and the mixture of INS-1 cells, INS-1 cells and 偽 cells was transplanted under the left renal capsule of diabetic nude mice to monitor blood glucose. The renal morphology was observed and the levels of insulin and glucagon in the transplanted cells were detected by immunohistochemical method. Results: compared with the control group, islet 偽 cell conditioned medium and GLP-1 could promote the proliferation and insulin release of INS-1 cells. Laser confocal microscopy analysis showed that GLP-1 could stimulate the increase of Ca2 concentration in INS-1 cells. Compared with the control group, there was no significant difference in the expression of insulin protein in INS-1 cells induced by islet 偽 cell conditioned medium and GLP-1. Compared with those before transplantation, the blood glucose of INS-1 cells in nude mice decreased significantly at 35 days after transplantation, even hypoglycemia appeared, and the transplanted site was obviously swollen. There was no significant change in blood glucose in diabetic nude mice transplanted with the mixture of INS-1 and 偽 cells, and there was no obvious swelling in the transplanted site. Immunohistochemical staining showed that INS-1 cells expressed both insulin and glucagon. Conclusion: islet 偽 cells and their secretions can promote the proliferation and insulin release of INS-1 cells, but mixed transplantation of 偽 cells and INS-1 cells to diabetic nude mice can reduce the hypoglycemic effect of INS-1 cells transplantation. The mechanism may be related to the expression of both insulin gene and glucagon gene in INS-1 cells.
【作者單位】： 華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理系;河北省涿州市醫(yī)院病理科;中日友好醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助課題(81370918,81370477)
【分類號(hào)】：R587.1

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本文編號(hào)：1875044