本文選題：抵抗素 + 血管內皮細胞　； 參考：《華中農業(yè)大學》2015年碩士論文

【摘要】：血液中的葡萄糖和胰島素透過血管壁進入組織器官是維持人體葡萄糖穩(wěn)態(tài)的重要步驟,若葡萄糖和胰島素滯留在血管內無法到達組織發(fā)揮功能,則將導致機體的高血糖、胰島素抵抗以及二型糖尿病。血管壁由單層或多層血管內皮細胞構成,血管內皮細胞對葡萄糖和胰島素的轉運能力是葡萄糖和胰島素能否到達組織器官的關鍵。抵抗素自發(fā)現(xiàn)以來一直被認為與胰島素抵抗、二型糖尿病相關。前期研究發(fā)現(xiàn),抵抗素處理后的血管內皮細胞中葡萄糖和胰島素的通透性下降,預示著抵抗素通過一條新的通路導致機體胰島素抵抗,而這一作用的分子機制還未知。為了探究抵抗素降低血管內皮細胞對葡萄糖和胰島素的通透性的作用機制,本研究以人臍靜脈瘤融合細胞(EA.hy 926)為體外血管壁模型,檢測了血管內皮細胞轉運葡萄糖和胰島素必須的兩種因子GLUT1和INSR的表達水平,并構建了GLUT1啟動子載體,利用海腎雙熒光報告系統(tǒng)檢測了GLUT1啟動子的轉錄活性,探討了抵抗素調控GLUT1表達的分子機制。獲得結果如下:1.用抵抗素刺激EA.hy 926細胞,RT-PCR和western blot的檢測發(fā)現(xiàn),抵抗素可下調GLUT1和INSR的m RNA水平以及蛋白水平。2.免疫熒光試驗顯示,抵抗素刺激使EA.hy 926細胞GLUT1蛋白的熒光強度減少;而超表達GLUT1可回復抵抗素引起的葡萄糖通透性下調。3.為了探索抵抗素下調GLUT1的機制,構建了GLUT1啟動子載體,雙熒光報告系統(tǒng)檢測發(fā)現(xiàn),PPARγ可特異的與GLUT1啟動子結合,上調啟動子轉錄活性,表明抵抗素是通過PPARγ調控GLUT1的表達。研究證明,抵抗素通過PPARγ—GLUT1—葡萄糖轉運信號通路調控葡萄糖在血管內皮細胞中的轉運,從而影響葡萄糖進入血管內皮細胞,減少組織對葡萄糖的氧化利用。
[Abstract]:Glucose and insulin in the blood flow through the wall of the blood vessels are important steps to maintain the body's glucose homeostasis. If glucose and insulin are retained in the blood vessels that can not reach the tissue and function, it will lead to hyperglycemia, insulin resistance, and type two diabetes. The vascular walls are composed of single or multilayer vascular endothelial cells. The transport capacity of vascular endothelial cells to glucose and insulin is the key to the ability of glucose and insulin to reach the organs of the tissue. Resistin has been found to be associated with insulin resistance, type two diabetes since its discovery. Previous studies have found that the permeability of glucose and insulin in vascular endothelial cells after resistin treatment has been found. In order to explore the mechanism of the effect of resistin on the permeability of glucose and insulin in vascular endothelial cells, this study uses the fusion cell of human umbilical vein aneurysm (EA.hy 926) as an in vitro vascular wall model to detect blood. The expression level of two factors GLUT1 and INSR must be transported by endothelial cells, and the GLUT1 promoter was constructed. The transcriptional activity of GLUT1 promoter was detected by the double fluorescence report system of the sea kidney, and the molecular mechanism of resistin to regulate the expression of GLUT1 was discussed. The results were as follows: 1. the EA.hy 926 finer was stimulated with resistin. The test of cell, RT-PCR and Western blot found that resistin could downregulate the m RNA level of GLUT1 and INSR and protein level.2. immunofluorescence test that resistin stimulation reduced the fluorescence intensity of GLUT1 protein in EA.hy 926 cells, while the overexpression of the GLUT1 could restore the downregulation of glucose induced by resistin in order to explore the downregulation of resistin. 1 mechanism, the GLUT1 promoter was constructed, and the double fluorescence report system detected that PPAR gamma could be specifically associated with GLUT1 promoter, up regulation of promoter transcriptional activity, indicating that resistin was regulated by PPAR gamma regulation of GLUT1 expression. The study showed that resistin was regulated by PPAR gamma GLUT1 glucose transport signaling pathway to regulate glucose in vascular endothelium Transport in cells affects glucose entry into vascular endothelial cells and reduces the use of glucose in tissues.

【學位授予單位】：華中農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R587.1

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