本文選題：胰高血糖素樣肽- + 過氧化氫��； 參考：《暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版)》2017年01期

【摘要】：目的:探討胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)對過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護作用及機制.方法:取人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),分為正常對照組、H2O2組、GLP-1組、H2O2+濃度10 nmol/L GLP-1組、H2O2+濃度100 nmol/L GLP-1組、H2O2+濃度1 000 nmol/L GLP-1組.采用熒光顯微鏡檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基(ROS)水平、觀察細(xì)胞骨架F-actin變化;采用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡比率;Western Blotting檢測磷酸化的雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)蛋白水平;實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(QPCR)檢測抗氧化酶:過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和谷胱甘肽過氧化物酶1(GPX1)基因的表達變化.結(jié)果:H2O2組細(xì)胞骨架破壞明顯,細(xì)胞內(nèi)ROS含量增加,細(xì)胞凋亡率增加;加入GLP-1后,細(xì)胞骨架破壞受到顯著抑制,ROS含量減少,凋亡率降低.Western Blotting結(jié)果顯示,H2O2組p-m TOR表達降低,GLP-1可以提高p-m TOR表達,使蛋白水平趨于正常;加入GLP-1受體拮抗劑艾塞納肽(9~36)后,GLP-1不能上調(diào)p-m TOR表達.H2O2作用后,CAT、SOD2和GPX1基因表達降低,而GLP-1可以逆轉(zhuǎn)這些基因表達的降低.結(jié)論:GLP-1通過上調(diào)抗氧化應(yīng)激酶對抗H2O2誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞損傷,且可能是通過活化m TOR通路起保護作用.
[Abstract]:Aim: to investigate the protective effect and mechanism of glucagon like peptide-1 (GLP-1) on oxidative injury of endothelial cells induced by hydrogen peroxide (H 2O 2). Methods: human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were divided into normal control group (H 2O 2 group), GLP-1 group (n = 10 nmol/L), H _ 2O _ 2 concentration (n = 10 nmol/L), H _ 2O _ 2 concentration (n = 100 nmol/L GLP-1), H _ 2O _ 2 concentration (n = 1 000 nmol/L GLP-1). The intracellular reactive oxygen free radical (Ros) level was detected by fluorescence microscopy, the cytoskeleton F-actin was observed by flow cytometry, and the phosphorylated rapamycin target protein was detected by flow cytometry (FCM) and phosphorylated rapamycin target protein (rapamycin). Real-time quantitative polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the expression of antioxidant enzymes: catalase (catalase), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (Glutathione peroxidase 1 Glutathione). Results the cytoskeleton destruction was obvious, the ROS content was increased, the apoptosis rate was increased, and the cytoskeleton destruction was significantly inhibited by adding GLP-1. The results showed that the expression of p-m TOR in H _ 2O _ 2 group could increase the expression of p-m TOR and make the protein level normal, and the expression of p-m TOR and GPX1 could not be upregulated by adding GLP-1 receptor antagonist Eisenopeptide 936), and the expression of CATH-SOD2 and GPX1 was decreased after treatment with H _ 2O _ 2, the expression of p-m TOR could not be upregulated by the addition of GLP-1 receptor antagonist Eisenopeptide 936). GLP-1 can reverse the decrease in the expression of these genes. Conclusion 1: GLP-1 antagonizes endothelial cell injury induced by H2O2 by up-regulation of antioxidant responsive kinase, and may play a protective role by activating m TOR pathway.
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)檢驗與生物技術(shù)學(xué)院生物治療所;
【基金】：國家重大科學(xué)973研究計劃項目(2011CB504006)
【分類號】：R587.1

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