本文選題：高糖 + Klotho蛋白��； 參考：《中國(guó)病理生理雜志》2017年01期

【摘要】：目的:研究抗衰老Klotho蛋白對(duì)高糖作用下血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),設(shè)置PBS對(duì)照組、5.5 mmol/L葡萄糖組、33.3 mmol/L葡萄糖組、0.1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖組、1μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖組和10μmol/L Klotho+33.3 mmol/L葡萄糖組。使用MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞活力;同時(shí)檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中丙二醛(MDA)的含量以及乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和還原型谷胱甘肽(GSH)的活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞中活性氧(ROS)含量變化;ELISA檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)液中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素1(ET-1)和細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)的濃度變化;Western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞中核因子κB(NF-κB)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與PBS對(duì)照組相比,33.3 mmol/L葡萄糖能夠顯著降低HUVECs的細(xì)胞活力,增加細(xì)胞中ROS的含量,增加細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH活性和MDA含量,降低SOD和GSH的活性,同時(shí)降低NO分泌,誘導(dǎo)ET-1、ICAM-1分泌及細(xì)胞中NF-κB蛋白的表達(dá)(P0.05)。不同濃度Klotho蛋白和33.3 mmol/L高糖同時(shí)作用HUVECs時(shí),細(xì)胞活力逐漸上升,ROS和MDA含量以及LDH活性逐漸下降,SOD和GSH活性則逐漸上升,同時(shí)NO分泌增加,ET-1、ICAM-1分泌及NF-κB蛋白表達(dá)顯著下降(P0.05)。結(jié)論:抗衰老Klotho蛋白能夠提升高糖作用下HUVECs的細(xì)胞活力,減少高糖誘導(dǎo)的ROS生成及氧化損傷,恢復(fù)HUVECs的正常分泌功能,并通過(guò)減少NF-κB蛋白表達(dá)發(fā)揮抗損傷作用。
[Abstract]:Aim: to study the protective effect of anti-aging Klotho protein on vascular endothelial cells under high glucose and its mechanism. Methods: human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were cultured in vitro. The PBS control group was divided into 5. 5 mmol/L glucose group and 10 渭 mol/L Klotho 33.3 mmol/L group. The mmol/L glucose group was 33.3 渭 mol/L Klotho 33.3 mmol/L glucose group, 1 渭 mol/L Klotho 33.3 mmol/L glucose group and 10 渭 mol/L Klotho 33.3 mmol/L glucose group. The activities of malondialdehyde (MDA), lactate dehydrogenase (LDH), superoxide dismutase (SOD) and reduced glutathione (GSH) were detected by MTT assay. The concentration of nitric oxide (no), endothelin 1 (et 1) and intercellular adhesion molecule 1 (ICAM 1) in culture medium of each group were detected by flow cytometry. The expression of nuclear factor- 魏 B (NF- 魏 B) NF- 魏 B protein was detected by Western blot. Results: compared with PBS control group, 33.3 mmol/L glucose could significantly decrease the cell viability of HUVECs, increase the content of ROS, increase the activity of LDH and MDA in the supernatant of cell culture, decrease the activities of SOD and GSH, and decrease the secretion of no. The secretion of ICAM-1 and the expression of NF- 魏 B protein in ET-1 cells were induced by P0.05. At different concentrations of Klotho protein and 33.3 mmol/L with high glucose, the activity of Ros and MDA and the activity of LDH decreased gradually, while the secretion of no increased the secretion of ICAM-1 and the expression of NF- 魏 B protein decreased significantly (P0. 05). Conclusion: Anti-aging Klotho protein can enhance the cell viability of HUVECs induced by high glucose, reduce the ROS production and oxidative damage induced by high glucose, restore the normal secretory function of HUVECs, and play an anti-injury role by reducing the expression of NF- 魏 B protein.
【作者單位】： 三峽大學(xué)仁和醫(yī)院ICU科;三峽大學(xué)仁和醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【基金】：湖北省教育廳自然科學(xué)研究計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(No.D20091308)
【分類(lèi)號(hào)】：R587.2;R54

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1780249