本文選題：細(xì)胞凋亡 + 游離脂肪酸　； 參考：《山東大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：研究背景和研究目的代謝綜合征(metabolic Syndrome, MetS, MS)是一種代謝異常疾病,往往伴有肥胖、胰島素抵抗、Ⅱ型糖尿病、血脂異常等現(xiàn)象,患有MS的病人較普通人具有較高的心血管患病率,研究發(fā)現(xiàn)游離脂肪酸(Free fatt acids,FFAs)與MS有著密切聯(lián)系,機(jī)體內(nèi)過(guò)量的FFA往往和肥胖、胰島素抵抗、Ⅱ型糖尿病、血脂異常等MS病征互為因果關(guān)系,其中FFA中的飽和脂肪酸(saturated fatty acids, SFA),被認(rèn)為是致病的主要因素。研究表明SFA中的棕櫚酸(Palmitic acid, PA)能夠誘導(dǎo)多種細(xì)胞發(fā)生凋亡,其中包括心肌細(xì)胞,然而PA誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的具體分子機(jī)制目前還并不十分清楚。β-Arrestin2蛋白作為arrestins家族的一員,除能夠參與7跨膜蛋白受體(seven transmembrane receptors,7TMRs)的脫敏、內(nèi)吞、泛素化降解外,還可作為多功能的支架和接頭蛋白,廣泛的參與多種信號(hào)通路,其中包括多種細(xì)胞存活和凋亡相關(guān)信號(hào)通路,然而β-arrestin 2對(duì)凋亡具體是促進(jìn)還是抑制,需要根據(jù)β-arrestin 2所激活的下游蛋白、以及細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)方式來(lái)確定。到目前為止,β-arrestin 2是否參與PA誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡過(guò)程仍未有研究。Akt/GSK-3p信號(hào)途徑,對(duì)細(xì)胞的增值和凋亡具有廣泛的調(diào)節(jié)作用,已有研究表明β-arrestin 2能夠招募c-Src和Akt,促進(jìn)Akt的磷酸化激活,進(jìn)而磷酸化GSK-3p的第九位絲氨酸位點(diǎn),使GSK-3β活性下調(diào),進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制凋亡。然而在PA誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中并不清楚是否存在此種調(diào)節(jié)關(guān)系。因此,為探討以上問(wèn)題,我們以H9c2心肌細(xì)胞系作為細(xì)胞模型,用體外高濃度PA來(lái)模擬體內(nèi)高FFA環(huán)境,初步探究FFA誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制,旨在探討β-arrestin 2以及Akt/GSK-3p信號(hào)通路在FFA誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡中的作用及分子機(jī)制,為MS所引起的心臟疾病提供新的分子機(jī)理解釋及潛在的理論治療靶點(diǎn)。研究結(jié)果1、棕櫚酸(PA)能夠以濃度梯度和時(shí)間梯度依賴的方式誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞發(fā)生凋亡。為驗(yàn)證PA對(duì)H9c2細(xì)胞的作用,我們首先通過(guò)SRB實(shí)驗(yàn),確定了PA對(duì)H9c2細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用,然后通過(guò)Hoechst33258對(duì)濃度梯度PA處理的H9c2細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核染色,初步確定PA能夠誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞發(fā)生凋亡,最后通過(guò)流式細(xì)胞技術(shù)和Western Blot確定了PA能夠以濃度梯度和時(shí)間梯度依賴的方式誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞發(fā)生凋亡。2、在PA誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞凋亡中,β-arrestin 2可能起著抑制細(xì)胞凋亡的作用,確定的結(jié)論仍需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。為研究β-arrestin 2在PA誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞凋亡中的作用,我們通過(guò)Vestern Blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),PA同樣能以濃度梯度和時(shí)間梯度依賴的方式下調(diào)β-arrestin 2的含量,并且p-arrestin 2含量與凋亡指標(biāo)呈負(fù)相關(guān),初步猜測(cè)β-arrestin 2在PA誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞凋亡過(guò)程中起著抑制細(xì)胞凋亡的作用,而過(guò)表達(dá)外源β-arrestin 2反而促進(jìn)了PA誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,免疫熒光顯示外源性β-arrestin 2在細(xì)胞中的分布與內(nèi)源β-arrestin 2并不一致,因此過(guò)表達(dá)外源β-arrestin 2引起的促進(jìn)凋亡的結(jié)果可能并不可信。3、抑制GSK-3P能夠顯著的抑制PA誘導(dǎo)的H9c2的細(xì)胞凋亡。在PA誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞凋亡中,、Vestern Blot結(jié)果顯示,β-Akt(Ser473)水平顯著下調(diào),而β-GSK-3β(ser9)并無(wú)明顯變化。GSK-3p的抑制劑LiCl實(shí)驗(yàn)顯著的抑制了PA誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞凋亡。說(shuō)明GSK-3β在PA誘導(dǎo)H9c2中的促凋亡作用,進(jìn)一步的GSK-3β干擾實(shí)驗(yàn)同樣顯著的抑制了PA誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞的凋亡,再次確定了GSK-3β在PA誘導(dǎo)H9c2凋亡中的促進(jìn)作用。結(jié)論1、PA能夠以濃度梯度和時(shí)間梯度依賴的方式誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞凋亡以及β-arrestin2蛋白的下調(diào)。在這一過(guò)程中,β-arrestin 2的mRNA水平并沒(méi)有發(fā)生顯著變化。2、GSK-3p的抑制劑LiCl和GSK-3βsiRNA能夠顯著抑制PA誘導(dǎo)的H9c2細(xì)胞凋亡。說(shuō)明GSK-3p在PA誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞凋亡過(guò)程中具有促進(jìn)凋亡的作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R589

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王東生,袁肇凱,郭志華;細(xì)胞凋亡與中醫(yī)藥[J];中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志;2000年12期

2 萬(wàn)曉艷,于蘇國(guó),郭玉芹,何慶;細(xì)胞凋亡與自身免疫性甲狀腺疾病的研究進(jìn)展[J];中國(guó)地方病防治雜志;2002年06期

3 祝偉民,林建棣,馬曉東,段小平;運(yùn)動(dòng)與細(xì)胞凋亡[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年27期

4 王會(huì)玲,景文莉,張小紅,高維娟;細(xì)胞凋亡與心肌缺血-再灌注損傷[J];承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年04期

5 梁薇;細(xì)胞凋亡的中藥調(diào)節(jié)機(jī)制[J];四川中醫(yī);2005年11期

6 張松彪;細(xì)胞凋亡與細(xì)胞養(yǎng)生[J];中國(guó)科技產(chǎn)業(yè);2005年01期

7 楊竹林,伍漢文;細(xì)胞凋亡調(diào)控因素有關(guān)基因的研究[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));1997年02期

8 劉恩梅,楊錫強(qiáng);細(xì)胞凋亡及其影響因素[J];重慶醫(yī)學(xué);1998年01期

9 ;美開發(fā)調(diào)控細(xì)胞凋亡藥物[J];中國(guó)腫瘤;1999年07期

10 管孝鞠,廖明陽(yáng);細(xì)胞凋亡在致畸中的作用[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;2000年02期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳穎麗;李前忠;;不同亞細(xì)胞位置的細(xì)胞凋亡蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特性分析[A];第十一次中國(guó)生物物理學(xué)術(shù)大會(huì)暨第九屆全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)摘要集[C];2009年

2 孫英麗;趙允;朱山;翟中和;;植物細(xì)胞凋亡及其機(jī)理的研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第七次會(huì)議論文摘要匯編[C];1999年

3 劉二龍;袁慧;;鋅與細(xì)胞凋亡[A];2003全國(guó)家畜內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文專輯[C];2003年

4 邱潔;高海青;;鋅在細(xì)胞凋亡中的作用研究進(jìn)展[A];山東省微量元素科學(xué)研究會(huì)第三屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2006年

5 俞雅萍;;細(xì)胞凋亡的機(jī)制及途徑和影響因素[A];華東六省一市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2006年

6 于青;袁偉杰;姚建;;晚期糖基化終末產(chǎn)物引起足細(xì)胞凋亡的機(jī)制[A];2007年浙滬兩地腎臟病學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

7 季宇彬;尹立;汲晨鋒;;調(diào)控細(xì)胞凋亡的線粒體因素[A];腫瘤病因?qū)W研究與中西醫(yī)結(jié)合腫瘤綜合診療交流研討會(huì)論文集[C];2009年

8 吳經(jīng)緯;湯長(zhǎng)發(fā);;運(yùn)動(dòng)中細(xì)胞凋亡的線粒體變化特征[A];湖南省生理科學(xué)會(huì)2006年度學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要匯編[C];2007年

9 蒲小平;李長(zhǎng)齡;屠鵬飛;宋志宏;;中藥肉叢蓉成分抗神經(jīng)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[A];第七屆全國(guó)生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2000年

10 江鍵;宋誠(chéng)榮;崔黎麗;方影;王小平;;靜電場(chǎng)對(duì)細(xì)胞凋亡作用的初步探討[A];中國(guó)物理學(xué)會(huì)第九屆靜電學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2000年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 商?hào)|;“細(xì)胞凋亡”與臨床醫(yī)學(xué)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

2 張志軍;細(xì)胞凋亡與中醫(yī)藥[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

3 ;“細(xì)胞凋亡療法”正逐步成為治療癌癥的新途徑[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2002年

4 記者張建松;治療癌癥新途徑：細(xì)胞凋亡療法[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

5 李明輝;“細(xì)胞凋亡”治癌癥[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2002年

6 洪敏;細(xì)胞凋亡研究引人關(guān)注[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

7 陶春祥;細(xì)胞凋亡對(duì)心臟疾病的影響[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

8 本報(bào)實(shí)習(xí)記者 梁媛媛;薛定：發(fā)現(xiàn)癌癥“開關(guān)”[N];北京科技報(bào);2010年

9 高書明;誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

10 勇匯;中藥誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡研究進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2002年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 楊利;系列多氮類化合物的抗腫瘤活性研究[D];武漢大學(xué);2012年

2 張浩;從分子、細(xì)胞和動(dòng)物水平研究鉛誘發(fā)氧化損傷及細(xì)胞凋亡的效應(yīng)與機(jī)理[D];山東大學(xué);2015年

3 何欣怡;家蠶微孢子蟲（Nosema bombycis）抑制家蠶BmN細(xì)胞凋亡的功能研究[D];浙江大學(xué);2015年

4 馮全服;從線粒體途徑研究川芎嗪誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡效應(yīng)機(jī)制[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 張曉倩;高糖誘導(dǎo)Bim蛋白高表達(dá)而促腎近曲小管上皮細(xì)胞凋亡的機(jī)制探討[D];山東大學(xué);2015年

6 孫健瑋;PTEN基因負(fù)調(diào)控Raf1磷酸化的作用及其對(duì)PC3細(xì)胞凋亡的影響[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

7 徐林艷;腫瘤細(xì)胞凋亡過(guò)程中TNFRSF10B和CFLAR調(diào)控機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

8 柳惠斌;普通針毛蕨DEDC誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2011年

9 姚展;細(xì)胞凋亡的多級(jí)分子調(diào)控機(jī)制[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2008年

10 季明杰;中藥姜黃組分芳姜黃酮誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的研究[D];山東大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 曹璐璐;2,2’,4,4’-四溴聯(lián)苯醚(BDE-47)對(duì)人胚腎細(xì)胞(HEK293)的毒理效應(yīng)及作用機(jī)制研究[D];中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所;2015年

2 張薇;蒜頭果蛋白誘導(dǎo)HepG-2細(xì)胞凋亡的研究[D];云南民族大學(xué);2015年

3 唐建國(guó);視黃醇X受體出核抑制對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 安璐;3-氯-1,2-丙二醇細(xì)胞毒性及其誘導(dǎo)HEK293細(xì)胞凋亡途徑探究[D];江南大學(xué);2015年

5 楊翔;Procaspase-8的異常表達(dá)抑制TRAIL誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[D];昆明理工大學(xué);2015年

6 張昌明;I3C通過(guò)調(diào)控p53泛素化對(duì)喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡的影響[D];延邊大學(xué);2015年

7 彭涵;共軛亞油酸對(duì)仔豬脂肪細(xì)胞凋亡的影響[D];西南大學(xué);2015年

8 李立輝;ΔFosB通過(guò)MMP-9調(diào)控山羊乳腺上皮細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

9 楊鑫鋮;Hedgehog信號(hào)通路在大鼠急性胰腺炎腺泡細(xì)胞凋亡中的作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 賈瓊瓊;MicroRNA-214對(duì)H_2O_2損傷L6骨骼肌成肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1767613