本文選題：明膠水解物 + 大豆蛋白水解物��； 參考：《東北農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：骨質(zhì)疏松癥是一種多因素所致的慢性疾病,其病因與年齡、雌激素下降、營(yíng)養(yǎng)失調(diào)、免疫以及遺傳等多方面因素有關(guān),其癥狀主要表現(xiàn)是骨密度降低、骨組織微觀結(jié)構(gòu)的破壞。傳統(tǒng)的骨質(zhì)疏松類(lèi)藥物如鍶制劑、護(hù)骨素等有一定的療效;但是臨床治療中藥物的使用劑量、合理配伍及藥物的副作用仍然困擾著人們。因此研究和開(kāi)發(fā)無(wú)副作用、促骨骼健康的食品原料尤為重要。蛋白質(zhì)和氨基酸是骨內(nèi)有機(jī)質(zhì)合成的必不可少的原料,蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期缺乏可導(dǎo)致骨基質(zhì)合成的降低,最終引發(fā)骨質(zhì)疏松癥。另一方面,高蛋白的攝入同樣不利于骨健康,會(huì)導(dǎo)致過(guò)多的鈣流失和骨吸收,最終抑制骨的礦化。因此食品蛋白質(zhì)與骨健康之間的關(guān)系需要充分研究和評(píng)估。本研究采用鮭魚(yú)皮明膠、大豆蛋白和酪蛋白,經(jīng)木瓜蛋白酶水解后,得到三種不同水解程度的明膠水解物、大豆蛋白水解物和酪蛋白水解物,并評(píng)估九種水解物對(duì)人成骨細(xì)胞h FOB1.19的細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期循環(huán)和凋亡的影響。CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,明膠水解物、大豆蛋白水解物和酪蛋白水解物對(duì)成骨細(xì)胞均具有明確的增殖促進(jìn)作用,細(xì)胞活性分別增加到103% 134%、104% 123%和100% 114%,水解物的水解度高,增殖促進(jìn)作用大。流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果分析表明,明膠水解物、大豆蛋白水解物和酪蛋白水解物均可不同程度的加速細(xì)胞周期循環(huán),S期細(xì)胞比例分別由50.5%提高到67.4%、60.5%和56.5%,這一結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了三種蛋白水解物對(duì)成骨細(xì)胞的增殖促進(jìn)作用。明膠水解物、大豆蛋白水解物和酪蛋白水解物對(duì)依托泊苷和氟化鈉誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞凋亡也有拮抗作用。凋亡預(yù)防試驗(yàn)中,凋亡細(xì)胞比例由31.6%分別下降到13.6%、15.6%和22.6%(依托泊苷組),或者由19.5%分別下降到11.3%、12.4%和17.7%(氟化鈉組)。凋亡逆轉(zhuǎn)試驗(yàn)中,明膠水解物和大豆蛋白水解物使成骨細(xì)胞凋亡比例由13.3%比例分別下降至11.8%和11.7%(依托泊苷組),或者由14.5%下降到12.4%和11.0%(氟化鈉組)。酪蛋白水解物對(duì)依托泊苷和氟化鈉誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞凋亡未檢測(cè)出逆轉(zhuǎn)作用�？傮w上看,明膠水解物對(duì)成骨細(xì)胞的增殖促進(jìn)和抗凋亡作用好于大豆蛋白水解物和酪蛋白水解物。采用基因芯片技術(shù)和RT-PCR方法檢測(cè)和驗(yàn)證明膠水解物對(duì)成骨細(xì)胞中基因的表達(dá)改變。分析結(jié)果表明,h FOB1.19細(xì)胞經(jīng)明膠水解物作用后,與細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期循環(huán)和細(xì)胞凋亡相關(guān)的基因發(fā)生變化,其中,MPHOSPH1和PAK1LP1的表達(dá)倍數(shù)被上調(diào),RPS6KA2、JNK1、JNK3和JNKK這四種基因的表達(dá)倍數(shù)均被下調(diào)。免疫蛋白印記法檢測(cè)JNK家族的蛋白變化,結(jié)果表明,明膠水解物是通過(guò)調(diào)控JNK信號(hào)通路,從而拮抗成骨細(xì)胞的凋亡。綜上所述,三種蛋白質(zhì)水解物尤其是明膠水解物對(duì)成骨細(xì)胞具有增殖促進(jìn)作用并且抑制其凋亡,并且,明膠水解物是通過(guò)調(diào)控JNK信號(hào)通路拮抗成骨細(xì)胞凋亡,從而可能產(chǎn)生抗骨質(zhì)疏松的作用。本結(jié)果為活性肽預(yù)防療骨質(zhì)疏松癥提供新的理論依據(jù)。
[Abstract]:楠ㄨ川鐤忔澗鐥囨槸涓，

本文編號(hào)：1734287