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梓醇對AGEs刺激腎系膜細(xì)胞介導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-03-20 18:52

  本文選題:梓醇 切入點(diǎn):晚期糖基化產(chǎn)物 出處:《中國藥理學(xué)通報(bào)》2017年10期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討梓醇對晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)刺激腎系膜細(xì)胞介導(dǎo)巨噬細(xì)胞極化的影響。方法將巨噬細(xì)胞(RAW264.7)置于Transwell上層小室,腎系膜細(xì)胞(MMCs)于下層孔板進(jìn)行體外共培養(yǎng),設(shè)置模型組、0-BSA對照組、梓醇組(0.1、1.0、10.0μmol·L~(-1)),另設(shè)氨基胍組(1.0μmol·L~(-1))作為陽性對照。加入各藥物預(yù)孵下層系膜細(xì)胞1 h后,用AGEs(100 mg·L~(-1))刺激,繼續(xù)孵育23 h,采用ELISA法檢測系膜細(xì)胞上清液中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)的分泌水平;Western blot法檢測巨噬細(xì)胞M1型標(biāo)記蛋白i NOS、CD16/32、TNF-α、COX-2和M2型標(biāo)記蛋白CD206、Arg-1的表達(dá)水平;流式細(xì)胞儀檢測巨噬細(xì)胞i NOS與CD206蛋白表達(dá)百分率。結(jié)果 AGEs可提高系膜細(xì)胞MCP-1的分泌水平(P0.01),上調(diào)巨噬細(xì)胞i NOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表達(dá)(P0.05,P0.01),下調(diào)CD206和Arg-1蛋白表達(dá);而梓醇(0.1、1.0、10.0μmol·L~(-1))預(yù)孵能降低系膜細(xì)胞MCP-1的分泌水平(P0.01),下調(diào)i NOS、TNF-α、CD16/32、COX-2蛋白表達(dá)(P0.05,P0.01),上調(diào)CD206和Arg-1蛋白表達(dá)(P0.05),并呈濃度依賴性。結(jié)論梓醇可通過調(diào)控AGEs刺激系膜細(xì)胞分泌MCP-1的水平,抑制巨噬細(xì)胞的M1型極化,并促進(jìn)其向M2型極化,減輕炎癥反應(yīng),緩解糖尿病腎損傷。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of catalpol on the late glycation end product (ages) -stimulated renal Mesangial cell mediated macrophage polarization. Methods macrophages (RAW264.7) were placed in the upper chamber of Transwell, and Mesangial cells (MMC) were co-cultured in the lower pore plate in vitro. The model group was divided into 0 BSA control group, catalpol group (0.1 渭 mol 路L ~ (-1)) and aminoguanidine group (1.0 渭 mol 路L ~ (-1)) as a positive control. The cells were preincubated with each drug for 1 h and stimulated with AGEs(100 mg 路L ~ (-1). After 23 h incubation, the secretion level of monocyte chemoattractant protein (MCP-1) in the supernatant of Mesangial cells was detected by ELISA assay. The expression of macrophage M1 labeled protein I NOSU CD16 / 32 TNF- 偽 COX-2 and M2 labeled protein CD206 (Arg-1) was detected by Western blot. Results the percentage of I NOS and CD206 protein expression in macrophages was detected by flow cytometry. Results AGEs could increase the level of MCP-1 secretion in Mesangial cells and up-regulate the expression of iNOSNF- 偽 CD16 / 32 COX-2 protein, and down-regulate the expression of CD206 and Arg-1. The preincubation of catalpol (0.1 渭 mol 路L ~ (-1)) could decrease the level of MCP-1 secretion and down-regulate the expression of P0.05 / 32COX-2 protein in Mesangial cells, and up-regulate the expression of CD206 and Arg-1 proteins in a dose-dependent manner. Conclusion Catalpol can regulate the level of MCP-1 secreted by AGEs stimulated Mesangial cells. The M 1 polarization of macrophages was inhibited, and the M 2 polarization was promoted, the inflammatory reaction was alleviated, and the kidney injury of diabetes mellitus was alleviated.
【作者單位】: 南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;江蘇省中藥藥效與安全性評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No 81374029,81073111) 江蘇省中藥學(xué)優(yōu)勢學(xué)科開放課題(No JKLPSE201604)
【分類號(hào)】:R587.2;R692.9

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本文編號(hào):1640361

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