本文選題：解偶聯(lián)蛋白1　切入點(diǎn)：成脂誘導(dǎo)　出處：《新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：背景哺乳動(dòng)物體內(nèi)存在兩種脂肪組織:白色脂肪組織(white adipose tissue,WAT)和棕色脂肪組織(brown adipose tissue,BAT),前者是儲(chǔ)能器官,后者是耗能器官。兩種脂肪組織均含有間充質(zhì)干細(xì)胞,目前尚不知兩種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞在向脂肪分化過程中是否存在差異,是本文研究的重點(diǎn)。目的比較大鼠腹股溝區(qū)WAT和肩胛間區(qū)BAT的結(jié)構(gòu)及組成的差異,探討白色脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(white adipose-derived mesenchymal stem cells,WADMSCs)和棕色脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(brown adipose-derived mesenchymal stem cells,BADMSCs)的形態(tài)學(xué)差異及成脂分化特性的差異。方法1.體外分離腹股溝區(qū)WAT和肩胛間區(qū)BAT,大體形態(tài)觀察兩種脂肪組織之間的差別,石蠟切片,HE染色觀察兩者的組織學(xué)差異,透射電鏡觀察兩者的超微結(jié)構(gòu)差異。2.石蠟包埋切片,利用解偶聯(lián)蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)免疫組織化學(xué)染色比較兩種脂肪組織差異。3.酶消化法體外分離培養(yǎng)腹股溝WADMSCs和肩胛間區(qū)BADMSCs,比較兩種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)學(xué)差異,并利用UCP1免疫熒光技術(shù)對(duì)兩種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行鑒定。4.對(duì)所得的第3代間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成脂誘導(dǎo),利用油紅O染色檢測(cè)兩種間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂誘導(dǎo)率并行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,利用免疫熒光技術(shù)檢測(cè)成脂誘導(dǎo)、分化后的細(xì)胞是棕色脂肪還是白色脂肪細(xì)胞。5.DAPI標(biāo)記兩種脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞后移植至大鼠腹股溝區(qū),分別在1w、2w、3w取移植區(qū)域的脂肪組織,OCT包埋后切片,利用UCP1免疫熒光技術(shù)檢測(cè)植入細(xì)胞的分化趨向。結(jié)果1.大體觀腹股溝區(qū)WAT呈亮白色,肩胛間區(qū)BAT呈棕褐色。HE染色顯示腹股溝區(qū)WAT內(nèi)的細(xì)胞多為空泡型且體積較大;肩胛間區(qū)BAT內(nèi)的細(xì)胞多為小而分散的脂滴,細(xì)胞較小,其間也分布少量單房脂肪細(xì)胞。透射電鏡顯示W(wǎng)AT細(xì)胞器較少,BAT含有豐富的線粒體。2.免疫組化顯示W(wǎng)AT不表達(dá)UCP1,BAT大量表達(dá)UCP1。3.BADMSCs胞體明顯比WADMSCs透亮,且細(xì)胞突起更加細(xì)長。兩種3代細(xì)胞均表達(dá)CD73、CD90、CD105等間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記物。4.WADMSCs的成脂誘導(dǎo)率為0.205±0.069,BADMSCs的成脂誘導(dǎo)率為0.165±0.053,兩種間充質(zhì)干細(xì)胞的成脂誘導(dǎo)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。成脂誘導(dǎo)后的細(xì)胞均表達(dá)棕色脂肪的特異性標(biāo)記物UCP1。5.兩種間充質(zhì)干細(xì)胞分別植入大鼠腹股溝區(qū)后,在1w、2w、3w發(fā)現(xiàn),兩種間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)微環(huán)境的誘導(dǎo)下均表達(dá)棕色脂肪特異性蛋白UCP1。結(jié)論WAT和BAT組織結(jié)構(gòu)有差異;BADMSCs和WADMSCs在形態(tài)學(xué)特征和成脂誘導(dǎo)率無明顯差異,在體外及體內(nèi)誘導(dǎo)成脂后均分化為棕色脂肪細(xì)胞。
[Abstract]:Background there are two kinds of adipose tissue in mammals: White adipose tissue (white adipose tissue) and brown adipose tissue (BATA). The former is an energy storage organ, the latter is an energy consuming organ, and both adipose tissues contain mesenchymal stem cells. It is not known whether there is a difference between the two kinds of adipose mesenchymal stem cells in adipose differentiation, which is the focus of this study. Objective to compare the structure and composition of WAT and BAT in rat inguinal region and interscapular region. To investigate the morphological differences and adipogenic differentiation of white adipose-derived mesenchymal stem cells (WADMSCs) and brown adipose-derived mesenchymal stem cells (BAD MSCs). Methods 1. Isolation of WAT and BATs from the inguinal and interscapular regions in vitro. Morphological observation of the difference between the two kinds of adipose tissue, The histological difference was observed by HE staining in paraffin sections, and the ultrastructural difference was observed by transmission electron microscope. 2. Paraffin embedded sections, The difference of adipose tissue between the two adipose tissues was compared by immunohistochemical staining with uncoupling protein 1 (UCP1). 3. The morphological differences of adipose mesenchymal stem cells (MSCs) were compared between groin WADMSCs and scapular BAD MSCs by enzyme digestion in vitro. UCP1 immunofluorescence technique was used to identify two kinds of adipose mesenchymal stem cells. 4. The third generation of mesenchymal stem cells were induced by adipogenesis, and the lipid induction rates of two kinds of mesenchymal stem cells were detected by oil red O staining and statistical analysis. Immunofluorescence technique was used to detect whether the differentiated cells were brown fat or white adipocytes. 5. DAPI labeled two kinds of adipose mesenchymal stem cells were transplanted into the groin region of rats. The grafted adipose tissue of the grafted area was grafted with Oct at 1 and 2 wand for 3 weeks, and the differentiation tendency of the implanted cells was detected by UCP1 immunofluorescence technique. Results 1.The WAT in the inguinal area was bright white in general. The BAT of interscapular area was brown. He staining showed that the cells in WAT of inguinal area were mostly vacuolar and large, and the cells in BAT of interscapular area were mostly small and dispersed lipid droplets, and the cells were small. A small number of monocytic adipocytes were also distributed. Transmission electron microscopy showed that WAT organelles were less abundant in mitochondria than bat. Immunohistochemical staining showed that WAT did not express UCP1BAT in a large number of UCP1.3.BADMSCs cells and the body was significantly brighter than that of WADMSCs. The cell processes were more slender. Both of them expressed CD73, CD90, CD105 and other mesenchymal stem cell markers. 4. The adipogenic induction rate of WADMSCs was 0.205 鹵0.069 BADMSCs (0.165 鹵0.053), while the adipogenic induction rate of the two mesenchymal stem cells was not significant (P0.05). UCP 1.5. two kinds of mesenchymal stem cells were implanted into the groin region of rats. It was found that the two mesenchymal stem cells expressed brown fat specific protein UCP1.Conclusion there is no significant difference between WAT and BAT in the morphological characteristics and fat-forming induction rate of BADMSCs and WADMSCs. In vitro and in vivo, adipose cells were evenly divided into brown adipocytes.
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.2

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 本刊編輯部;;我國首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫在天津落成[J];中國藥業(yè);2006年07期

2 張?chǎng)?趙桂秋;;間充質(zhì)干細(xì)胞在眼科領(lǐng)域的研究與應(yīng)用[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2009年06期

3 史春夢(mèng);;間充質(zhì)干細(xì)胞表述中需要注意的幾個(gè)問題[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年14期

4 瞿海龍;邊劍飛;張冰;王穎;周英蓮;;間充質(zhì)干細(xì)胞臨床應(yīng)用的前景與困惑[J];醫(yī)學(xué)研究與教育;2011年05期

5 郭子寬;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用中的幾個(gè)問題[J];中國組織工程研究;2012年01期

6 李炳堯;武曉云;吳巖;;間充質(zhì)干細(xì)胞的分離與培養(yǎng):從實(shí)驗(yàn)室到臨床[J];中國組織工程研究;2013年14期

7 吳實(shí);鄧列華;;皮膚間充質(zhì)干細(xì)胞在促進(jìn)皮膚愈合中的作用[J];實(shí)用皮膚病學(xué)雜志;2013年03期

8 吳清法,王立生,吳祖澤;間充質(zhì)干細(xì)胞的來源及臨床應(yīng)用[J];軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊;2002年03期

9 黃定強(qiáng);間充質(zhì)干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(耳鼻咽喉科學(xué)分冊(cè));2003年03期

10 付文玉,路艷蒙,喬?hào)|訪,樸英杰;運(yùn)用組織工程學(xué)原理構(gòu)建間充質(zhì)干細(xì)胞的三維培養(yǎng)體系[J];濰坊醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 陳可;王丁;韓之波;朱德林;韓忠朝;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外發(fā)揮免疫活性的研究[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 金明順;張毅;賈秀芬;周燕華;閆妍;劉慧雯;;小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)以及多潛能分化的研究[A];中國解剖學(xué)會(huì)第十一屆全國組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

3 李爭(zhēng)艷;劉楊;翟麗麗;楊迷玲;王立峰;;間充質(zhì)干細(xì)胞在腫瘤發(fā)展過程中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

4 張彥;李尚珠;;間充質(zhì)干細(xì)胞在血管工程中的機(jī)制及應(yīng)用[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合周圍血管疾病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2009年

5 石玉;戴\戎;;周期性拉應(yīng)力對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化影響的研究[A];第九屆全國生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

6 黎嬌;朱爭(zhēng)艷;杜智;駱瑩;王鵬;高英堂;;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分泌物對(duì)肝細(xì)胞增殖和凋亡的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第30次學(xué)術(shù)年會(huì)暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

7 譚遠(yuǎn)超;Kevin;姜紅江;黃相杰;周紀(jì)平;;間充質(zhì)干細(xì)胞在骨傷疾病治療中的應(yīng)用[A];首屆全國中西醫(yī)結(jié)合骨科微創(chuàng)學(xué)術(shù)交流會(huì)暨專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2011年

8 唐佩弦;;間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用前景[A];第三屆全國血液免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2003年

9 戴育成;;間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性和應(yīng)用[A];2005年華東六省一市血液病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省血液病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2005年

10 胡琳莉;王昕榮;錢坤;李舟;楊薇;朱桂金;;小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞向子宮內(nèi)膜分化的實(shí)驗(yàn)研究[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會(huì)生殖醫(yī)學(xué)分會(huì)、中國動(dòng)物學(xué)會(huì)生殖生物學(xué)分會(huì)聯(lián)合年會(huì)論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 滿學(xué)杰;天津?yàn)I海新區(qū)建最大間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];新華每日電訊;2008年

2 滿學(xué)杰;津昂賽打造間充質(zhì)干細(xì)胞生產(chǎn)基地[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

3 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科 李忠俊 整理 吳劉佳;間充質(zhì)干細(xì)胞研究又見新方法[N];健康報(bào);2013年

4 上海生科院 上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所 曹楷;間充質(zhì)干細(xì)胞：干細(xì)胞中的孫悟空[N];上�？萍紙�(bào);2014年

5 記者　陳建強(qiáng);首家間充質(zhì)干細(xì)胞庫在津建成[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

6 記者　馮國梧;細(xì)胞產(chǎn)品國家工程中心建設(shè)方案獲準(zhǔn)[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

7 實(shí)習(xí)生 劉霞;間充質(zhì)干細(xì)胞有望用于面部整形[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

8 本報(bào)記者 王新佳;我國“原始間充質(zhì)干細(xì)胞”注射液進(jìn)入臨床研究[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2005年

9 馮國梧;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫規(guī)�；\(yùn)營[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

10 劉瑩清;全球首個(gè)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞庫泰達(dá)規(guī)模運(yùn)營[N];北方經(jīng)濟(jì)時(shí)報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王皓;五指山小型豬OCT-4、SOX-2基因在骨髓間充質(zhì)與臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的過表達(dá)研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

2 孔德曉;間充質(zhì)干細(xì)胞及胰島素分泌細(xì)胞治療糖尿病的臨床及應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D];山東大學(xué);2015年

3 董苑;SDF-1復(fù)合PDPBB的構(gòu)建及對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞趨化影響的研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

4 王磊;誘導(dǎo)胎盤來源間充質(zhì)干細(xì)胞向成牙骨質(zhì)細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

5 房賀;連接黏附分子A在促進(jìn)MSC修復(fù)CC14肝損傷中的作用及其機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

6 陳潔;間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體對(duì)急性肺損傷小鼠的影響及相關(guān)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

7 許婷;轉(zhuǎn)化生長因子β1在蟑螂過敏原誘導(dǎo)的哮喘中對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞募集遷移的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 周雅麗;攜氧間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)胃癌化療效果的影響及其機(jī)制研究[D];蘭州大學(xué);2015年

9 沈舒寧;CKIP-1負(fù)調(diào)控間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 姚惟琦;脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性腎損傷[D];武漢大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李超;小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中AC基因亞型的表達(dá)及AC3對(duì)其纖毛長度的影響[D];河北大學(xué);2015年

2 林濤;殼聚糖水凝膠復(fù)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

3 彭龍英;心肌營養(yǎng)素1促進(jìn)人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞神經(jīng)分化存活及PI3K/Akt信號(hào)通路機(jī)制研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2015年

4 喬曉慧;酸性環(huán)境對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

5 張紅霞;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、鑒定及其對(duì)人肺癌細(xì)胞惡性表型的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

6 顧立超;BTK抑制劑對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞miR-21的調(diào)節(jié)作用[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

7 王文杰;鴨胚間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性及其移植修復(fù)肝損傷研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

8 張猛;血管內(nèi)皮前體細(xì)胞對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化潛能的影響[D];石河子大學(xué);2015年

9 馬麗媛;利用MyoD基因誘導(dǎo)綿羊臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

10 宋維文;MicroRNA-133誘導(dǎo)綿羊間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成肌細(xì)胞的研究[D];東北林業(yè)大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1637906