本文選題：沙棘蛋白　切入點：2型糖尿病　出處：《合肥工業(yè)大學》2017年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)植物沙棘為胡頹子科(Elaeagnaceae)沙棘屬(Hippophae),是一種落葉性灌木,為我國西部地區(qū)最具代表性的經(jīng)濟作物之一。其生物資源蘊藏量豐富,多樣性廣泛。沙棘為藥食同源植物,它的葉、莖、根和果,特別是沙棘的果實含有豐富的生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)物質(zhì)。其中,從沙棘的籽中提取所得的蛋白,含量豐富,氨基酸種類齊全,含有人體所需的全部必需氨基酸,是一種優(yōu)良的植物蛋白資源。本文以沙棘籽為原料,采用酸沉堿提的方法來制備沙棘籽蛋白。利用高脂飲食結(jié)合鏈脲佐菌素(STZ)來誘導,獲得2型糖尿病動物實驗模型。使用沙棘蛋白進行灌胃處理小鼠4周,探究其對小鼠體重(BW)、空腹血糖水平(FBG)、血脂水平和肝臟損傷的影響,用于研究沙棘蛋白對糖尿病小鼠的降血脂作用;檢測各個時期小鼠糞便的pH值和腸道優(yōu)勢菌群的數(shù)量變化,考察沙棘籽蛋白對糖尿病小鼠腸道環(huán)境和腸道菌群的影響;同時用半定量PCR方法(RT-PCR)研究對脂肪酸代謝mRNA表達水平的影響,初步探究沙棘籽蛋白改善糖尿病脂質(zhì)轉(zhuǎn)運機理。利用16srDNA測序技術(shù)對小鼠糞便全基因組進行分離分類,考察沙棘蛋白對糖尿病小鼠腸道微生物菌群的動態(tài)調(diào)節(jié)。實驗結(jié)果顯示,采用堿提酸沉的工藝制備沙棘籽蛋白,其含量為78.6%,總提取率為37.4%。動物實驗的結(jié)果顯示:沙棘蛋白處理組較模型組小鼠的體重、空腹血糖、總甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)與糖尿病組相比有顯著降低(p0.05);高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)較糖尿病組則明顯升高。此外,RT-PCR結(jié)果顯示,沙棘籽蛋白使小鼠肝臟組織基因CCATT增強子結(jié)合蛋白(CEBPα)、脂肪酶合酶(FAS)、乙酰輔酶A羧化酶(ACC1),肉堿�；D(zhuǎn)移酶(CPT1)的表達量增加,降低胰島素抵抗,改善糖尿病小鼠癥狀。培養(yǎng)得到的腸道微生物中,沙棘蛋白處理組的雙歧桿菌(Bifidobacterium)、乳酸桿菌(Lactobacillus)、擬桿菌(Bacteroides)較模型組均有顯著的增加;球形梭菌(Clostridium coccoides)則明顯減少;聚類分析結(jié)果提示沙棘蛋白處理組腸道菌群與正常組之間的相似性較高,達77%左右。本研究表明:沙棘籽蛋白能改善2型糖尿病高血糖、高血脂;對腸道微生物同樣有顯著的調(diào)節(jié)作用。實驗證明沙棘籽蛋白能夠提高脂肪酸的代謝。PCRDGGE的分析結(jié)果表明沙棘籽蛋白能夠顯著改善糖尿病小鼠腸道菌群環(huán)境,調(diào)節(jié)動態(tài)平衡,進而改善2型糖尿病癥狀。
[Abstract]:Hippophae rhamnoides Linn.) Hippophae is a deciduous shrub of the genus Elaeagnaceae.Hippophae is one of the most representative cash crops in western China. Its leaves, stems, roots and fruits, especially the fruits of Hippophae rhamnoides, are rich in bioactive substances and nutrients. Hippophae rhamnoides seed was prepared by acid precipitation and alkali extraction, and was induced by high fat diet combined with streptozotocin (STZ). The experimental animal model of type 2 diabetes mellitus was established. The effects of sea buckthorn protein on body weight, fasting blood glucose level, lipid level and liver injury were investigated in mice treated with sea buckthorn protein for 4 weeks. To study the hypolipidemic effect of seabuckthorn protein on diabetic mice, to detect the pH value of feces and the number of dominant microflora of intestinal tract in each period of mice, and to investigate the effect of seabuckthorn seed protein on the intestinal environment and intestinal flora of diabetic mice. At the same time, the effect of RT-PCR on fatty acid metabolism mRNA expression was studied by semi-quantitative PCR method, and the mechanism of seabuckthorn seed protein (Hippophae rhamnoides) improving lipid transport in diabetes mellitus was preliminarily explored. The whole genome of mouse feces was separated and classified by 16s rDNA sequencing technique. The dynamic regulation of seabuckthorn protein on intestinal microflora of diabetic mice was investigated. The results showed that the process of alkali extraction and acid precipitation was used to prepare seabuckthorn seed protein (Hippophae rhamnoides L.). Its content was 78.6 and the total extraction rate was 37.4. The results of animal experiments showed that the body weight and fasting blood glucose of mice treated with Hippophae rhamnoides protein were higher than those of model group. Total triglyceride (TGG), total cholesterol (TC) and low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) were significantly lower than those in diabetic group (P 0.05), and HDL-C (high density lipoprotein cholesterol) was significantly higher than that in diabetes mellitus (DM). Hippophae rhamnoides seed protein (Hippophae rhamnoides) increased the expression of CCATT enhancer binding protein (CEBP 偽), lipase synthase (FASA), acetyl coA carboxylase (ACC1), carnitine transferase (carnitine transferase), and decreased insulin resistance. To improve the symptoms of diabetic mice. In the intestinal microbes cultured with Hippophae rhamnoides, Bifidobacterium teriumus, Lactobacillus lactis, Bacteroidesin treated with seabuckthorn protein were significantly increased compared with the model group, while Clostridium coccoidesin was significantly decreased. Cluster analysis showed that the similarity between the intestinal flora of seabuckthorn protein treated group and normal group was about 77%. The results showed that Hippophae rhamnoides seed protein could improve hyperglycemia and hyperlipidemia in type 2 diabetes mellitus. The results of PCRDGGE analysis showed that seabuckthorn seed protein could significantly improve the intestinal microflora environment and regulate the dynamic balance of diabetic mice. And then improve the symptoms of type 2 diabetes.
【學位授予單位】：合肥工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R587.1

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本文編號：1624416