本文關(guān)鍵詞：高遷移率族蛋白1對小鼠脂肪細胞自噬的影響　出處：《新鄉(xiāng)醫(yī)學院》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關(guān)文章： 自噬 3T3-L1 HMGB1 脂肪細胞 高脂飲食

【摘要】：背景近年來,隨著全球肥胖人數(shù)的逐年上升,肥胖及其相關(guān)的代謝性疾病已成為影響人類健康的主要疾病之一。有研究表明,肥胖可導致脂肪組織或全身的慢性低度炎癥已達成共識,但其發(fā)生機制還未闡明。高遷移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)是一個重要的炎癥介質(zhì),與慢性炎癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。自噬作為一種廣泛存在于真核細胞中的生命現(xiàn)象,它可以發(fā)揮細胞的保護機制,來對抗慢性炎癥對脂肪細胞的損傷;但目前關(guān)于HMGB1、脂肪細胞和自噬的研究還未見報道,機制仍不清楚。目的探討HMGB1對3T3-L1脂肪細胞自噬的影響,為進一步闡明其作用機制奠定基礎。方法1.HE(haematoxylin-eosin,HE)染色:檢測正常飲食小鼠與高脂飲食小鼠附睪脂肪組織,對比其脂肪細胞的變化;2.細胞轉(zhuǎn)染:在3T3-L1前脂肪細胞中轉(zhuǎn)染HMGB1si RNA,檢測HMGB1的表達;3.Western blot:提取小鼠附睪脂肪組織和3T3-L1細胞的蛋白,檢測HMGB1以及自噬相關(guān)蛋白LC3的表達;4.油紅O染色:不同分化時期的3T3-L1脂肪細胞,觀察其脂滴的表達量。結(jié)果1.HE染色結(jié)果顯示,正常飲食小鼠的附睪脂肪組織與高脂飲食的相比,發(fā)現(xiàn)高脂飲食小鼠的脂肪細胞體積變大;2.Western結(jié)果顯示,正常飲食小鼠的附睪脂肪組織與高脂飲食的相比,發(fā)現(xiàn)高脂飲食小鼠體內(nèi)炎癥因子HMGB1表達升高(均P0.05),與此同時,在高脂飲食小的脂肪組織中自噬蛋白,LC3-II/I表達量增多(均P0.00);3.與對照組相比,當使用不同濃度重組人HMGB1蛋白刺激3T3-L1前脂肪細胞后,自噬蛋白LC3-II/I比值增加(均P0.01);4.si HMGB1沉默3T3-L1前脂肪細胞中的HMGB1后,LC3-II/I比值則顯著減少(P0.01);5.對不同分化時期的脂肪細胞加入0.2μg/m L的重組人HMGB1之后,結(jié)果顯示在第0、2和4 day時LC3-II/I蛋白表達增加(P0.05),而第8和10 day LC3-II/I蛋白表達減少(P0.05)。結(jié)論1.HMGB1與3T3-L1前脂肪細胞的自噬呈正相關(guān);2.對分化不同時期的脂肪細胞,加入重組人HMGB1刺激之后,分化前期自噬增加,而后期自噬出現(xiàn)減少。
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R589.2

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