本文關(guān)鍵詞：高遷移率族蛋白1對(duì)小鼠脂肪細(xì)胞自噬的影響　出處：《新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 自噬 3T3-L1 HMGB1 脂肪細(xì)胞 高脂飲食

【摘要】：背景近年來,隨著全球肥胖人數(shù)的逐年上升,肥胖及其相關(guān)的代謝性疾病已成為影響人類健康的主要疾病之一。有研究表明,肥胖可導(dǎo)致脂肪組織或全身的慢性低度炎癥已達(dá)成共識(shí),但其發(fā)生機(jī)制還未闡明。高遷移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)是一個(gè)重要的炎癥介質(zhì),與慢性炎癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。自噬作為一種廣泛存在于真核細(xì)胞中的生命現(xiàn)象,它可以發(fā)揮細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制,來對(duì)抗慢性炎癥對(duì)脂肪細(xì)胞的損傷;但目前關(guān)于HMGB1、脂肪細(xì)胞和自噬的研究還未見報(bào)道,機(jī)制仍不清楚。目的探討HMGB1對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞自噬的影響,為進(jìn)一步闡明其作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法1.HE(haematoxylin-eosin,HE)染色:檢測(cè)正常飲食小鼠與高脂飲食小鼠附睪脂肪組織,對(duì)比其脂肪細(xì)胞的變化;2.細(xì)胞轉(zhuǎn)染:在3T3-L1前脂肪細(xì)胞中轉(zhuǎn)染HMGB1si RNA,檢測(cè)HMGB1的表達(dá);3.Western blot:提取小鼠附睪脂肪組織和3T3-L1細(xì)胞的蛋白,檢測(cè)HMGB1以及自噬相關(guān)蛋白LC3的表達(dá);4.油紅O染色:不同分化時(shí)期的3T3-L1脂肪細(xì)胞,觀察其脂滴的表達(dá)量。結(jié)果1.HE染色結(jié)果顯示,正常飲食小鼠的附睪脂肪組織與高脂飲食的相比,發(fā)現(xiàn)高脂飲食小鼠的脂肪細(xì)胞體積變大;2.Western結(jié)果顯示,正常飲食小鼠的附睪脂肪組織與高脂飲食的相比,發(fā)現(xiàn)高脂飲食小鼠體內(nèi)炎癥因子HMGB1表達(dá)升高(均P0.05),與此同時(shí),在高脂飲食小的脂肪組織中自噬蛋白,LC3-II/I表達(dá)量增多(均P0.00);3.與對(duì)照組相比,當(dāng)使用不同濃度重組人HMGB1蛋白刺激3T3-L1前脂肪細(xì)胞后,自噬蛋白LC3-II/I比值增加(均P0.01);4.si HMGB1沉默3T3-L1前脂肪細(xì)胞中的HMGB1后,LC3-II/I比值則顯著減少(P0.01);5.對(duì)不同分化時(shí)期的脂肪細(xì)胞加入0.2μg/m L的重組人HMGB1之后,結(jié)果顯示在第0、2和4 day時(shí)LC3-II/I蛋白表達(dá)增加(P0.05),而第8和10 day LC3-II/I蛋白表達(dá)減少(P0.05)。結(jié)論1.HMGB1與3T3-L1前脂肪細(xì)胞的自噬呈正相關(guān);2.對(duì)分化不同時(shí)期的脂肪細(xì)胞,加入重組人HMGB1刺激之后,分化前期自噬增加,而后期自噬出現(xiàn)減少。
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.2

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