本文關鍵詞：創(chuàng)面負壓治療對糖尿病足創(chuàng)面肉芽組織TGF-β1的影響

  更多相關文章： 創(chuàng)面負壓治療 糖尿病足 創(chuàng)面愈合 肉芽組織 轉化生長因子-β1

【摘要】：目的:通過分析創(chuàng)面負壓治療前后和傳統(tǒng)紗布換藥治療前后糖尿病足創(chuàng)面肉芽組織中轉化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表達差異,探討創(chuàng)面負壓治療對糖尿病足肉芽組織TGF-β1的影響,為創(chuàng)面負壓治療促進糖尿病足創(chuàng)面愈合提供理論依據。方法:1選取2013年11月至2015年3月間于解放軍白求恩國際和平醫(yī)院內分泌科住院并符合入組標準、排除標準的糖尿病足患者40例。通過計算機進行完全隨機化分組將患者隨機分為創(chuàng)面負壓治療組(NPWT組)和傳統(tǒng)紗布換藥治療組(對照組),每組20例。2 NPWT組予以創(chuàng)面負壓治療,對照組予以傳統(tǒng)紗布換藥治療。兩組受試者分別于治療前(0天)及治療第7天(7天)取創(chuàng)面肉芽組織,每份創(chuàng)面肉芽組織均分為三組,并分別標記為A組、B組和C組。3 A組取材后于4%多聚甲醛溶液中固定,4℃保存,標本收齊后集中行蠟塊包埋保存。4取部分石蠟包埋的A組組織,切片并行HE染色,于光學顯微鏡(400×)下觀察肉芽組織生長情況。5取部分石蠟包埋的A組組織,切片并行免疫組織化學染色,于光學顯微鏡(400×)下定性觀察TGF-β1表達情況,鏡下觀察棕黃色或棕褐色顆粒表示染色陽性。每個切片隨機選取5個視野拍照;用數字醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)(MoticMedical 6.0)對每個切片的5個隨機視野行光密度分析,平均光密度值(optical density,OD)表示每個切片TGF-β1含量,對TGF-β1行定量分析。6 B組于-80℃冰箱中保存,標本收齊后行Western blot分析,β-actin為內參照蛋白,Image J軟件分析條帶灰度。用TGF-β1與β-actin條帶灰度比值表示每個條帶TGF-β1含量,對TGF-β1蛋白表達行定量分析;7 C組取材后活組織立即放入液氮中送實驗室于-80℃冰箱中保存,并立即行real-timepcr。所有實驗過程在無rna酶環(huán)境下行擴增并對pcr行熒光定量檢測。上游和下游引物對被設計為5′cccacaacgaaatctatgaca3′和5′agagcaacacgggttcag3′。gapdh為內參照基因,設置對照組的第1號樣品為標準1,得到各樣本各目的基因的ct值。按照公式rq=2-ΔΔct計算各目的基因表達的相對定量值(rq值),用rq代表tgf-β1mrna表達量并進行統(tǒng)計分析。結果:1肉眼觀察npwt組和對照組治療前創(chuàng)面,見肉芽組織色澤晦暗,觸之發(fā)硬;鏡下觀察兩組治療前創(chuàng)面he染色切片,見新鮮肉芽組織少,成纖維細胞少,新生血管少,炎性細胞多。肉眼觀察治療npwt組和對照組治療第7天創(chuàng)面,見新鮮肉芽組織形成,其中npwt組較對照組新鮮肉芽組織形成明顯,表現為鮮紅色、顆粒狀,觸柔軟濕潤;鏡下觀察兩組治療第7天he染色切片,可見新生肉芽組織,npwt組較對照組明顯,表現為大量新生血管和大量成纖維細胞形成;2鏡下觀察經免疫組織化學染色的切片,見npwt組和對照組治療前創(chuàng)面肉芽組織中代表tgf-β1陽性的棕黃色或棕褐色顆粒少,兩組治療后第7天創(chuàng)面肉芽組織中其中代表tgf-β1陽性的棕黃色或棕褐色顆粒增多,其中npwt組較對照組更明顯。用平均光密度代表tgf-β1含量,對tgf-β1行定量分析:較治療前,治療第7天的npwt組和對照組均存在創(chuàng)面肉芽組織tgf-β1表達上調(npwt組t=8.250,p0.01,α=0.05;對照組t=3.204,p0.01,α=0.05),其中npwt組tgf-β1上調較對照組明顯(t=5.96,p0.01,α=0.05),有統(tǒng)計學意義;3western印跡分析顯示:較治療前,治療第7天的npwt組和對照組均存在創(chuàng)面肉芽組織tgf-β1表達上調(npwt組t=5.648,p0.01,α=0.05;對照組t=10.734,p0.01,α=0.05),其中npwt組tgf-β1上調較對照組明顯(t=9.62,p0.01,α=0.05),有統(tǒng)計學意義;4rt-pcr分析tgf-β1基因表達水平顯示,治療第7天的npwt組和對照組肉芽組織均存在tgf-β1基因表達上調(npwt組t=11.321,p0.01,α=0.05;對照組t=9.671,p0.01,α=0.05),其中npwt組tgf-β1基因表達上調較對照組明顯(t=8.02,p0.01,α=0.05),有統(tǒng)計學意義。結論:創(chuàng)面負壓治療和傳統(tǒng)紗布換藥治療可在一定程度上促進糖尿病創(chuàng)面肉芽組織tgf-β1蛋白表達上調及基因表達上調,增加創(chuàng)面肉芽組織形成,促進創(chuàng)面愈合。和傳統(tǒng)紗布換藥治療相比,創(chuàng)面負壓治療更能明顯促進糖尿病足創(chuàng)面肉芽組織TGF-β1蛋白表達上調及基因表達上調,增加創(chuàng)面肉芽組織形成,從而加速創(chuàng)面的愈合。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2

【相似文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

1 陳大志;董松林;祁兆建;范廣峰;王富貴;顧榮勝;;負壓封閉引流技術加中藥治療對創(chuàng)面肉芽組織生長的影響[J];中國中醫(yī)骨傷科雜志;2011年12期

2 梁小玲;羅鑒蘭;;重組人堿性成纖維細胞生長因子配合美皮康治療Ⅲ度壓瘡10例效果觀察[J];齊魯護理雜志;2013年05期

3 姜珠倩;殷子斐;蘇永華;;中醫(yī)藥促進創(chuàng)面肉芽組織生長的研究進展[J];上海中醫(yī)藥大學學報;2013年05期

4 張銳喬;;VSD技術治療Ⅳ期壓瘡的療效觀察[J];中國醫(yī)藥指南;2013年16期

5 ，

本文編號：1250299