本文關(guān)鍵詞：α-胞襯蛋白siRNA對人涎腺導(dǎo)管細(xì)胞的影響

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【摘要】：目的觀察α-胞襯(α-Fodrin)蛋白小干擾RNA(siRNA)對人涎腺導(dǎo)管(HSG)細(xì)胞的影響,探討α-Fodrin siRNA治療干燥綜合征(SS)的作用。方法實驗分對照組、空載體組、α-Fodrin siRNA1組及α-Fodrin siRNA2組,將成功構(gòu)建的10μgα-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表達(dá)載體分別采用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染HSG細(xì)胞,空載體組HSG細(xì)胞轉(zhuǎn)染等劑量的pGFP-V-RS空載體。轉(zhuǎn)染后24、48、72和96h觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率,實時熒光定量(RT)-PCR法檢測4組HSG細(xì)胞中α-Fodrin mRNA的表達(dá)水平;細(xì)胞熒光免疫法檢測4組細(xì)胞中α-Fodrin蛋白的表達(dá)水平;ELISA法檢測4組細(xì)胞上清液中IFN-γ、IL-10的表達(dá)水平。結(jié)果轉(zhuǎn)染后48hHSG細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率最高;轉(zhuǎn)染后48hα-Fodrin siRNA1組和α-Fodrin siRNA2組HSG細(xì)胞中α-Fodrin mRNA和蛋白的表達(dá)水平明顯低于對照組和空載體組(P0.05),且α-Fodrin siRNA2組中α-Fodrin mRNA的表達(dá)水平低于α-Fodrin siRNA1組的表達(dá)水平(P0.05);α-Fodrin siRNA1組和α-Fodrin siRNA2組細(xì)胞上清液中IL-10的水平明顯升高,較對照組和空載體組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),α-Fodrin siRNA1組和α-Fodrin siRNA2組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);α-Fodrin siRNA1組和α-Fodrin siRNA2組細(xì)胞上清中IFN-γ的水平低于對照組和空載體組,但4組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 HSG細(xì)胞轉(zhuǎn)染α-Fodrin siRNA載體后,α-Fodrin mRNA和蛋白的表達(dá)水平下降,同時細(xì)胞上清中IL-10的水平升高、IFN-γ水平下降,提示α-Fodrin siRNA可以減輕炎性反應(yīng),為SS的治療提供實驗依據(jù)。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古科技大學(xué)包頭醫(yī)學(xué)院風(fēng)濕免疫研究所/包頭醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科;
【基金】：包頭市醫(yī)藥衛(wèi)生基金項目(2009S1001-34) 內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計劃項目(20120403)
【分類號】：R593.2
【正文快照】： α-胞襯(α-Fodrin)蛋白是從干燥綜合征(sj錸gren’s syn-drome,SS)小鼠唇腺中提取的涎腺特異性自身抗原,在SS的發(fā)病過程中起非常重要的作用,對SS的診斷和指導(dǎo)治療都起到了很好的作用,有較好的特異度和靈敏度[1-2]。人涎腺導(dǎo)管(human salivary gland cells,HSG)細(xì)胞來源于人下

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號：1235486