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microRNA-125a和A20在AS患者PBMCs中的表達(dá)水平及其臨床意義

發(fā)布時(shí)間:2017-11-09 13:37

  本文關(guān)鍵詞:microRNA-125a和A20在AS患者PBMCs中的表達(dá)水平及其臨床意義


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【摘要】:目的:比較強(qiáng)直性脊柱炎(AS)患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中mi R-125a、A20的表達(dá)水平與健康對(duì)照之間的差異,分析mi R-125a、A20的表達(dá)水平與AS臨床特征及相關(guān)細(xì)胞因子之間的關(guān)系,探討mi R-125和A20在AS發(fā)病機(jī)制中的作用,為AS的診斷、治療及預(yù)后提供基礎(chǔ)資料。方法:采用病例對(duì)照設(shè)計(jì)的方法,2014年4月-2015年9月期間,收集AS病例和健康對(duì)照各40例。AS病例來自安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門診,年齡和性別頻數(shù)匹配的40例健康對(duì)照來自合肥市淮河路步行街血站獻(xiàn)血的健康人群。強(qiáng)直性脊柱炎疾病活動(dòng)度評(píng)分(BASDAI)評(píng)分≥4的AS患者分在AS穩(wěn)定組,BASDAI評(píng)分4的AS患者分在AS活動(dòng)組。病例和對(duì)照分別采集5ml靜脈血,分離PBMCs,提取RNA,逆轉(zhuǎn)錄為c DNA。使用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-q PCR)方法檢測(cè)AS病例組與對(duì)照組PBMCs中mi R-125a、A20m RNA、IL-12m RNA、IL-17m RNA的相對(duì)表達(dá)水平,每個(gè)樣本做3個(gè)復(fù)孔,比較AS病例組與對(duì)照組以及AS穩(wěn)定組與AS活動(dòng)組之間相關(guān)分子的相對(duì)表達(dá)水平,并分析mi R-125a與A20m RNA之間的相關(guān)性;使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)檢測(cè)病例和對(duì)照外周血中相關(guān)細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-β和TNF-a的表達(dá)水平,分析mi R-125a、A20m RNA等與這些相關(guān)細(xì)胞因子之間的相關(guān)性。組間比較統(tǒng)計(jì)處理使用的是非參數(shù)檢驗(yàn)和t檢驗(yàn),相關(guān)性分析的統(tǒng)計(jì)處理使用的是Spearman等級(jí)相關(guān)。結(jié)果:病例組男性29人、女性11人,平均年齡28.10±7.86歲;對(duì)照組男性28人、女性12人,平均年齡27.32±7.48歲,兩組年齡和性別比較差異無顯著性。mi R-125a在病例組與對(duì)照組之間的比較發(fā)現(xiàn):mi R-125a的相對(duì)表達(dá)水平在病例組與對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=0.509,P=0.527);mi R-125a在AS穩(wěn)定組與AS活動(dòng)組之間的比較發(fā)現(xiàn):mi R-125a在兩組之間的表達(dá)沒有差異性(Z=-1.529,P=0.126);mi R-125a相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn);mi R-125a與A20 m RNA無相關(guān)性(rs=0.030,P=0.804),但mi R-125a與IL-6呈正相關(guān)(rs=0.518,P=0.001)、與IL-10呈正相關(guān)(rs=0.363,P=0.035)、與TNF-α呈正相關(guān)(rs=0.365,P=0.034);A20表達(dá)在病例組與對(duì)照組之間的比較發(fā)現(xiàn):與對(duì)照組相比AS病例組A20 m RNA的相對(duì)表達(dá)水平增加(Z=-3.908,P0.001),提示A20在AS患者PBMCs中有異常表達(dá);A20在AS穩(wěn)定組與活動(dòng)組之間的比較發(fā)現(xiàn):A20在兩組之間的表達(dá)差異也沒有達(dá)到統(tǒng)計(jì)顯著性(Z=0.498,P=0.505);但A20相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn):A20m RNA水平與CRP呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.508,P=0.009)、與BASDAI呈負(fù)相關(guān)(rs=-0.352,P=0.045),其余各因子之間的相關(guān)性分析均未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)的關(guān)聯(lián)(P均0.05);相關(guān)細(xì)胞因子在AS病例組與對(duì)照組之間的比較發(fā)現(xiàn):IL-12表達(dá)病例組顯著高于對(duì)照組(Z=-5.04,P0.001),IL-17表達(dá)病例組顯著高于對(duì)照組(Z=-2.05,P=0.040),相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn):IL-12與IL-17呈顯著正相關(guān)(rs=0.571,P0.001)。結(jié)論:未觀察到mi R-125a在AS患者PBMCs有異常表達(dá),A20的表達(dá)異?赡茉贏S的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R593.23

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本文編號(hào):1162136

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