本文關鍵詞：脂肪源性干細胞對多發(fā)性硬化患者Th17的免疫調控作用

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【摘要】：目的:探討人脂肪源性干細胞(h ASCs)對多發(fā)性硬化(MS)患者外周血輔助性T細胞17(Th17)的免疫調控作用機制。方法:分離、純化脂肪組織中的h ASCs。采用密度梯度離心法分離MS患者外周血單個核細胞(PBMCs),磁珠分選CD4+T細胞,體外刺激細胞向Th17極化,并加入不同比例的h ASCs(h ASCs∶CD4+T為1∶4和1∶10)共培養(yǎng)4 d,設立添加anti-LIF抗體組;流式細胞術檢測共培養(yǎng)后Th17細胞占CD4+T細胞的比例,real-time PCR檢測白細胞介素6受體(IL-6R)、白細胞介素23受體(IL-23R)、白血病抑制因子受體(LIFR)、維甲酸相關孤兒受體γt(RORγt)及白血病抑制因子(LIF)的mRNA水平變化;ELISA法檢測共培養(yǎng)體系上清液中LIF的水平。結果:分離的h ASCs經流式細胞術鑒定可基本判定為h ASCs;PBMCs經磁珠法分選后獲得90%以上純度的CD4+T細胞。共培養(yǎng)后,1∶4組和1∶10組中Th17細胞所占比例下降,且存在高濃度抑制效應;共培養(yǎng)后RORγt、IL-6R和IL-23R的mRNA表達水平下降,LIFR和LIF的mRNA表達水平均升高;加入anti-LIF抗體后,Th17細胞比例回升至對照組水平;RORγt和IL-6R的mRNA表達水平回升;ELISA檢測各組LIF的水平,共培養(yǎng)組LIF分泌均較對照組明顯增多,加入anti-LIF抗體后明顯減少。結論:h ASCs可抑制MS患者Th17細胞的分化,其作用可能與其分泌LIF、通過IL-6/LIF軸競爭性抑制有關。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院超聲影像科;溫州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經內科;武警浙江省總隊杭州醫(yī)院康復科;
【基金】：浙江省自然科學基金資助項目(No.LY14H130002,No.LY13H090010) 溫州市科技計劃(No.Y20140278)
【分類號】：R744.51
【正文快照】： 多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)是一種中樞神經系統(tǒng)(central nervous system,CNS)慢性脫髓鞘性的自身免疫性疾病。參與此自身免疫應答過程的眾多效應細胞中,輔助性T細胞17(T helper 17 cells,Th17)細胞起著最關鍵的決定性作用[1]。近年來,間充質干細胞(mesenchymal stem c

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