本文關(guān)鍵詞：miR-23b-3p對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響

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【摘要】：microRNAs(miRNAs)是一類(lèi)長(zhǎng)約21~25 nt的非編碼小分子RNA,已有大量研究表明miRNAs參與調(diào)控脂肪形成。但miR-23b-3p在脂肪形成中的作用未見(jiàn)報(bào)道。本研究選用3T3-L1前脂肪細(xì)胞作為研究對(duì)象,探討miR-23b-3p對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和成脂分化的影響。通過(guò)化學(xué)合成的mi R-23b-3p模擬物mimic和抑制物inhibitor成功轉(zhuǎn)入3T3-L1前脂肪細(xì)胞后,利用CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)miR-23b-3p對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響;并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)細(xì)胞周期基因CyclinD1和CDK4以及成脂標(biāo)志基因PPARγ和FABP4的表達(dá)情況;油紅O染色測(cè)定甘油三酯積累情況。得到如下結(jié)果:1.過(guò)表達(dá)miR-23b-3p抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖,導(dǎo)致細(xì)胞G1期阻滯,CyclinD1和CDK4在mRNA和蛋白水平極顯著下調(diào);抑制miR-23b-3p的表達(dá)能夠促進(jìn)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖,G1期細(xì)胞比例減少,CyclinD1和CDK4在m RNA和蛋白水平顯著或極顯著上調(diào)。2.在3T3-L1前脂肪細(xì)胞成脂分化過(guò)程中,miR-23b-3p的表達(dá)水平上調(diào)。3.過(guò)表達(dá)miR-23b-3p,甘油三酯積累增加,PPARγ和FABP4在m RNA和蛋白水平顯著或極顯著上調(diào);抑制miR-23b-3p表達(dá),甘油三酯積累減少,PPARγ和FABP4在mRNA和蛋白水平極顯著下調(diào)。結(jié)論:miR-23b-3p能夠抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖并促進(jìn)其分化為成熟脂肪細(xì)胞。
【關(guān)鍵詞】：miR-23b-3p 3T3-L1前脂肪細(xì)胞 細(xì)胞增殖 細(xì)胞分化
【學(xué)位授予單位】：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R589.2
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-9
• 1 前言9-18
• 1.1 microRNAs9-11
• 1.1.1 microRNAs的發(fā)現(xiàn)9
• 1.1.2 microRNAs的特征9
• 1.1.3 microRNAs的生物合成過(guò)程及作用機(jī)制9-11
• 1.2 細(xì)胞周期11-12
• 1.2.1 細(xì)胞增殖11
• 1.2.2 細(xì)胞周期的調(diào)控11-12
• 1.3 脂肪形成概述12-14
• 1.3.1 脂肪組織的形成和功能12-13
• 1.3.2 脂肪細(xì)胞分化過(guò)程13
• 1.3.3 脂肪細(xì)胞分化的分子調(diào)控13-14
• 1.4 microRNAs與脂肪形成14-17
• 1.4.1 microRNAs參與調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞增殖14-15
• 1.4.2 microRNAs促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化15-16
• 1.4.3 microRNAs抑制脂肪細(xì)胞分化16-17
• 1.5 研究目的與意義17-18
• 2 材料與方法18-28
• 2.1 材料18-21
• 2.1.1 細(xì)胞系18
• 2.1.2 主要試劑18-19
• 2.1.3 主要儀器19
• 2.1.4 主要試劑配方19-21
• 2.2 方法21-28
• 2.2.1 成脂誘導(dǎo)分化21-22
• 2.2.2 miR-23b-3p寡核苷酸轉(zhuǎn)染22
• 2.2.3 細(xì)胞總RNA的提取及qPCR22-25
• 2.2.4 細(xì)胞活力測(cè)定25
• 2.2.5 細(xì)胞周期檢測(cè)25-26
• 2.2.6 細(xì)胞總蛋白的提取及濃度測(cè)定26-27
• 2.2.7 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，，轉(zhuǎn)膜及顯影27-28
• 2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28
• 3 結(jié)果與分析28-36
• 3.1 miR-23b-3p對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響28-33
• 3.1.1 過(guò)表達(dá)miR-23b-3p對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響28-29
• 3.1.2 miR-23b-3p過(guò)表達(dá)導(dǎo)致 3T3-L1前脂肪細(xì)胞G1期阻滯29-31
• 3.1.3 抑制miR-23b-3p對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響31
• 3.1.4 抑制miR-23b-3p對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞周期的影響31-33
• 3.2 過(guò)表達(dá)miR-23b-3p對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞成脂分化的影響33-36
• 3.2.1 miR-23b-3p在 3T3-L1前脂肪細(xì)胞成脂分化過(guò)程中表達(dá)上調(diào)33
• 3.2.2 過(guò)表達(dá)miR-23b-3p促進(jìn) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化33-34
• 3.2.3 抑制miR-23b-3p對(duì) 3T3-L1前脂肪細(xì)胞成脂分化的影響34-36
• 4 討論36-39
• 5 結(jié)論39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻(xiàn)41-47

【相似文獻(xiàn)】

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1 夏蓉;脂肪細(xì)胞和前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J];同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2003年03期

2 陳波;崔瑾;謝西梅;李小玉;;動(dòng)態(tài)機(jī)械力刺激對(duì)幼鼠前脂肪細(xì)胞活力與增殖及凋亡變化的研究(英文)[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2010年19期

3 趙春霖;趙琳;萬(wàn)麟;齊社寧;;人前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)及鑒定[J];蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年03期

4 朱曉海;何清濂;林子豪;;人前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)及增殖與分化模型的建立[J];中華整形燒傷外科雜志;1999年03期

5 朱曉海,何清濂,林子豪,趙耀忠,吳建明;常用維生素對(duì)人前脂肪細(xì)胞增殖和分化的作用[J];中華醫(yī)學(xué)美學(xué)美容雜志;2003年06期

6 李衛(wèi)華;孫志成;王文;;人前脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng)[J];武警醫(yī)學(xué);2010年08期

7 樊芙蓉;劉毅;;影響前脂肪細(xì)胞增殖與分化的若干因素[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2007年01期

8 李?lèi)?ài)林,胡平,張杰,龍道疇;聚β-羥基丁酸脂用于前脂肪細(xì)胞移植的大體及組織學(xué)觀察[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2005年11期

9 王鑫;劉秀華;;前脂肪細(xì)胞的增殖、分化及其調(diào)控[J];淮海醫(yī)藥;2006年04期

10 雷翔;許雪亮;;兩種方法培養(yǎng)人眼眶前脂肪細(xì)胞的比較[J];國(guó)際眼科雜志;2007年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李?lèi)?ài)林;陜聲國(guó);陳學(xué)杰;;超聲波對(duì)豬前脂肪細(xì)胞增殖與分化影響的實(shí)驗(yàn)研究[A];第十一次湖北省整形外科學(xué)術(shù)會(huì)議第四次湖北省醫(yī)學(xué)美容學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

2 李小林;楊孝良;巫國(guó)輝;曾瑞;;瘦素對(duì)人前脂肪細(xì)胞增殖及分化的影響[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)術(shù)年會(huì)、中華醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)分會(huì)20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

3 楊靜;陰津華;;小檗堿對(duì)人前脂肪細(xì)胞增殖、分化和脂肪細(xì)胞因子表達(dá)的影響[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)第十次全國(guó)糖尿病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

4 毋巨龍;李世榮;;重組人bFGF對(duì)植入裸鼠體內(nèi)前脂肪細(xì)胞成脂作用的影響[A];第七屆中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)美容與整形醫(yī)師大會(huì)論文集[C];2010年

5 李?lèi)?ài)林;陳學(xué)杰;王松山;龍道疇;;超聲波對(duì)豬前脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)與增殖的影響[A];中國(guó)美容與整形醫(yī)師大會(huì)論文匯編[C];2005年

6 李?lèi)?ài)林;陜聲國(guó);何宜新;;組織工程化前脂肪細(xì)胞移植的實(shí)驗(yàn)研究[A];第十一次湖北省整形外科學(xué)術(shù)會(huì)議第四次湖北省醫(yī)學(xué)美容學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

7 盧婷;楊靜;;甘精、地特和人胰島素對(duì)3T3-1前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

8 劉海峰;李學(xué)偉;朱蠣;帥素容;;應(yīng)用抑制消減雜交技術(shù)篩選豬前脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化前后的差異表達(dá)基因[A];中國(guó)動(dòng)物遺傳育種研究進(jìn)展——第十五次全國(guó)動(dòng)物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2009年

9 毋巨龍;李世榮;;重組人b FGF對(duì)植入裸鼠體內(nèi)前脂肪細(xì)胞成脂作用的影響[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會(huì)議暨貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷整形分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2010年

10 史洪巖;史銘欣;王守志;王志鵬;李輝;王寧;;雞HOPX基因過(guò)表達(dá)對(duì)雞前脂肪細(xì)胞增殖的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)家禽學(xué)分會(huì)第九次代表會(huì)議暨第十六次全國(guó)家禽學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2013年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張學(xué)進(jìn);眼眶前脂肪細(xì)胞在甲狀腺相關(guān)眼病發(fā)病機(jī)理中作用的研究[D];四川大學(xué);2004年

2 毋巨龍;bFGF對(duì)前脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng)、在體移植和自體脂肪微粒注射的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

3 陶梅梅;三種核苷類(lèi)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖、分化及分泌脂肪因子的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

4 楊月;GLP-1對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖及分化的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2009年

5 金蕾;消渴丸對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖及分化的影響[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

6 丁慧華;鋅α_2糖蛋白對(duì)3T3-L1小鼠前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

7 張旭U

本文編號(hào)：1091906