本文關(guān)鍵詞：壞死性凋亡和p38 MAPK通路的相互作用介導高糖引起的H9c2心肌細胞損傷

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【摘要】：目的研究壞死性凋亡(necroptosis,Nec)和p38絲裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路的相互作用在高糖引起H9c2心肌細胞損傷中的作用。方法應用細胞計數(shù)盒檢測心肌細胞存活率;雙氯熒光素染色熒光顯微鏡照相法檢測細胞內(nèi)活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;羅丹明123染色熒光顯微鏡照相法測定線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,MMP);蛋白質(zhì)免疫印跡法測定RIP3蛋白(反映Nec的指標)和p38MAPK蛋白的表達水平。結(jié)果高糖(35 mmol·L~(-1)葡萄糖,HG)作用H9c2心肌細胞24 h可引起明顯的細胞損傷,表現(xiàn)為細胞存活率降低,ROS生成及MMP丟失增多;應用100μmol·L~(-1)necrostatin-1(Nec-1,Nec特異性抑制劑)和HG共處理心肌細胞24 h或3μmol·L~(-1)SB203580(p38MAPK抑制劑)預處理心肌細胞60 min,再予HG作用24 h可減輕高糖引起的上述損傷。此外,HG作用心肌細胞1、3、6、9、12、24、36和48 h均能明顯增加RIP3蛋白的表達水平,其中24 h時表達水平增加最明顯。應用100μmol·L~(-1)Nec-1共處理或3μmol·L~(-1)SB203580預處理心肌細胞均能明顯地抑制HG對RIP3蛋白表達的上調(diào)作用。另一方面,應用100μmol·L~(-1)Nec-1共處理心肌細胞能阻斷HG對磷酸化(p)-p38MAPK表達的上調(diào)作用。結(jié)論 Nec和p38 MAPK通路的相互作用介導高糖引起H9c2心肌細胞損傷。
【作者單位】： 廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院心血管內(nèi)科;廣州市番禺區(qū)心血管疾病研究所;中山大學附屬第一醫(yī)院黃埔院區(qū)心血管內(nèi)科CCU;中山大學附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 壞死性凋亡 p絲裂原激活蛋白激酶 相互作用 高糖 心肌細胞 損傷
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No 81270296) 廣東省財政科技項目(No 2014SC107)
【分類號】：R587.2;R542.2
【正文快照】： 細胞死亡是生命的基本過程,不僅參與生物的發(fā)育和自穩(wěn)平衡,在多種疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中也發(fā)揮重要的作用。糖尿病心肌病(diabetic cardiomy-opathy,DCM)是糖尿病的重要并發(fā)癥之一,嚴重地危害著人類的健康與生命。在DCM發(fā)生過程中,心肌細胞死亡起關(guān)鍵性的啟動作用。Cai等[1]

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本文編號：1085018