本文關(guān)鍵詞：大鼠NKx6.1啟動子克隆及特異性表達分析

  更多相關(guān)文章： 同源盒基因NKx. 甲狀腺激素 雙熒光素酶報告檢測 啟動子活性

【摘要】：旨在構(gòu)建大鼠NKx6.1啟動子的報告載體,驗證轉(zhuǎn)錄因子T3R對NKx6.1啟動子的調(diào)控活性。用PCR擴增大鼠腦組織NKx6.1的5'上游啟動子片段2.4 kb,應(yīng)用生物信息學(xué)方法預(yù)測該片段上潛在的轉(zhuǎn)錄因子T3R結(jié)合位點,根據(jù)不同的結(jié)合位點作系列截短,獲得3段長度不等的啟動子缺失片段,分別克隆到熒光素酶報告基因表達質(zhì)粒(p GL3-Basic)上,構(gòu)建相應(yīng)的報告載體。將報告載體和T3R共轉(zhuǎn)染大鼠星形膠質(zhì)細胞(rat astrocytes,RA),并檢測報告基因熒光素酶的活性。結(jié)果顯示,成功構(gòu)建大鼠NKx6.1啟動子報告載體,雙熒光素酶報告基因活性檢測表明T3R對NKx6.1啟動子有明顯調(diào)控作用,其中-1 887 bp-1 507 bp活性最高,即存在關(guān)鍵順式調(diào)控元件�？寺〔⒑Y選出啟動子核心區(qū)域,揭示了甲狀腺激素對大鼠NKx6.1的表達調(diào)控機制。
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院內(nèi)分泌研究所衛(wèi)生部激素與發(fā)育重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 同源盒基因NKx. 甲狀腺激素 雙熒光素酶報告檢測 啟動子活性
【分類號】：R591.1;Q78
【正文快照】： 碘缺乏病(iodine deficiency disorders,IDD)的最大危害是導(dǎo)致不同程度的腦發(fā)育障礙,其具體的分子作用機制仍是當前的主要研究方向。同源盒基因Nkx6.1作為一種反式作用因子,與神經(jīng)系統(tǒng)的分化與發(fā)育關(guān)系極為密切,對于甲狀腺特異基因的表達有重要的作用[1]。Nkx6.1在胚胎期可影

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 況守龍;胡廷章;;啟動子的克隆和研究方法[J];重慶工學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版);2007年01期

2 李志新;曹雙河;張相岐;張懷剛;;偽鵝觀草高分子量麥谷蛋白基因啟動子的克隆[J];長江大學(xué)學(xué)報(自科版)農(nóng)學(xué)卷;2007年02期

3 高剛;魯艷芹;韓金祥;趙麗;;雙啟動子對增強型綠色熒光蛋白表達的影響[J];中國生物制品學(xué)雜志;2009年10期

4 郝迪，

本文編號：1083360