本文關(guān)鍵詞：調(diào)控Nampt在糖尿病腎病炎癥—纖維化中對波形蛋白表達的影響

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【摘要】：目的:探討內(nèi)源性煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(endogenous Nampt)在糖尿病模型小鼠腎小球纖維化(glomerular fibrosis,GF)中對波形蛋白(Vimentin,VIM)表達的影響。方法:應(yīng)用糖尿病動物模型,制備腎臟組織切片,應(yīng)用免疫共聚焦和免疫熒光進行蛋白表達的定位分析,分別評價腎臟腎小球細胞中Nampt和VIM的表達情況;根據(jù)高濃度葡萄糖(200 mmol/L)對腎小球系膜HBZY-1細胞氧化應(yīng)激的嚴重程度進行分組(1組(200 mmol/L高糖組)、2組(200 mmol/L高糖組+FK866組)、3組(200 mmol/L高糖組+NMN組)、4組(200 mmol/L高糖組+FK866+NMN組);對照組分別為:5組(0.56mmol/L葡萄糖)及6組(0.56 mmol/L葡萄糖+FK866)和7組(0.56 mmol/L葡萄糖+NMN)),通過免疫熒光方法檢測腎小球系膜細胞中Nampt和NF-κB、Sirt1表達,分析它們的相互關(guān)系,并通過免疫印跡方法對各相關(guān)蛋白的表達進一步再確認,研究內(nèi)源性Nampt與腎小球前纖維化因子VIM表達的作用機制。結(jié)果:糖尿病組腎小球呈明顯萎縮,嚴重糖尿病組小鼠的腎小球細胞內(nèi)隨著Nampt表達的增加,VIM表達也明顯增加;隨著時間的延長(0-5d)細胞內(nèi)Nampt表達增加,同時NF-κB的表達也隨之升高,而細胞內(nèi)的Sirt1表達卻明顯減少(p㩳0.01)。隨著Nampt表達的減少,VIM呈現(xiàn)表達明顯減少趨勢,NMN的干預也起到了相同的作用。結(jié)論:在腎臟纖維化過程中,Nampt通過NF-κB和Sirt1的相互作用可以調(diào)控VIM的表達,從而影響腎臟的炎癥纖維化進程。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病腎病 炎癥 纖維化 Nampt VIM
【學位授予單位】：桂林醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英漢縮略詞對照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-21
• 1.1 實驗動物模型、細胞株及分組12-13
• 1.1.1 胰島素基因突變型糖尿病模型小鼠12
• 1.1.2 細胞株及細胞株分組處理12-13
• 1.2 實驗試劑13-14
• 1.3 常用儀器設(shè)備14-15
• 1.4 實驗相關(guān)溶液配制15-17
• 1.5 實驗方法17-21
• 1.5.1 腎臟組織免疫組織化學方法檢測Nampt蛋白17
• 1.5.2 免疫共聚焦方法檢測腎臟組織蛋白的表達17-18
• 1.5.3 蛋白免疫印跡法檢測蛋白的表達18-19
• 1.5.4 統(tǒng)計學分析19-21
• 2 結(jié)果21-28
• 2.1 共聚焦檢測糖尿病小鼠腎臟組織中蛋白的表達21-22
• 2.2 共聚焦檢測高糖條件下腎小球系膜細胞內(nèi)蛋白的表達22-26
• 2.3 蛋白免疫印跡法檢測蛋白的表達26-28
• 3 討論28-32
• 4 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-35
• 綜述35-43
• 參考文獻40-43
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術(shù)論文目錄43-44
• 致謝44

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本文編號：1032313