本文關(guān)鍵詞：調(diào)控Nampt在糖尿病腎病炎癥—纖維化中對(duì)波形蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:探討內(nèi)源性煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(endogenous Nampt)在糖尿病模型小鼠腎小球纖維化(glomerular fibrosis,GF)中對(duì)波形蛋白(Vimentin,VIM)表達(dá)的影響。方法:應(yīng)用糖尿病動(dòng)物模型,制備腎臟組織切片,應(yīng)用免疫共聚焦和免疫熒光進(jìn)行蛋白表達(dá)的定位分析,分別評(píng)價(jià)腎臟腎小球細(xì)胞中Nampt和VIM的表達(dá)情況;根據(jù)高濃度葡萄糖(200 mmol/L)對(duì)腎小球系膜HBZY-1細(xì)胞氧化應(yīng)激的嚴(yán)重程度進(jìn)行分組(1組(200 mmol/L高糖組)、2組(200 mmol/L高糖組+FK866組)、3組(200 mmol/L高糖組+NMN組)、4組(200 mmol/L高糖組+FK866+NMN組);對(duì)照組分別為:5組(0.56mmol/L葡萄糖)及6組(0.56 mmol/L葡萄糖+FK866)和7組(0.56 mmol/L葡萄糖+NMN)),通過免疫熒光方法檢測(cè)腎小球系膜細(xì)胞中Nampt和NF-κB、Sirt1表達(dá),分析它們的相互關(guān)系,并通過免疫印跡方法對(duì)各相關(guān)蛋白的表達(dá)進(jìn)一步再確認(rèn),研究?jī)?nèi)源性Nampt與腎小球前纖維化因子VIM表達(dá)的作用機(jī)制。結(jié)果:糖尿病組腎小球呈明顯萎縮,嚴(yán)重糖尿病組小鼠的腎小球細(xì)胞內(nèi)隨著Nampt表達(dá)的增加,VIM表達(dá)也明顯增加;隨著時(shí)間的延長(zhǎng)(0-5d)細(xì)胞內(nèi)Nampt表達(dá)增加,同時(shí)NF-κB的表達(dá)也隨之升高,而細(xì)胞內(nèi)的Sirt1表達(dá)卻明顯減少(p㩳0.01)。隨著Nampt表達(dá)的減少,VIM呈現(xiàn)表達(dá)明顯減少趨勢(shì),NMN的干預(yù)也起到了相同的作用。結(jié)論:在腎臟纖維化過程中,Nampt通過NF-κB和Sirt1的相互作用可以調(diào)控VIM的表達(dá),從而影響腎臟的炎癥纖維化進(jìn)程。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病腎病 炎癥 纖維化 Nampt VIM
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英漢縮略詞對(duì)照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型、細(xì)胞株及分組12-13
• 1.1.1 胰島素基因突變型糖尿病模型小鼠12
• 1.1.2 細(xì)胞株及細(xì)胞株分組處理12-13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑13-14
• 1.3 常用儀器設(shè)備14-15
• 1.4 實(shí)驗(yàn)相關(guān)溶液配制15-17
• 1.5 實(shí)驗(yàn)方法17-21
• 1.5.1 腎臟組織免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Nampt蛋白17
• 1.5.2 免疫共聚焦方法檢測(cè)腎臟組織蛋白的表達(dá)17-18
• 1.5.3 蛋白免疫印跡法檢測(cè)蛋白的表達(dá)18-19
• 1.5.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析19-21
• 2 結(jié)果21-28
• 2.1 共聚焦檢測(cè)糖尿病小鼠腎臟組織中蛋白的表達(dá)21-22
• 2.2 共聚焦檢測(cè)高糖條件下腎小球系膜細(xì)胞內(nèi)蛋白的表達(dá)22-26
• 2.3 蛋白免疫印跡法檢測(cè)蛋白的表達(dá)26-28
• 3 討論28-32
• 4 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-35
• 綜述35-43
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄43-44
• 致謝44

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