本文關(guān)鍵詞：3T3-L1前脂肪細(xì)胞移植對PCOS小鼠卵巢的作用及高胰島素和高睪酮對體外培養(yǎng)人脂肪干細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)

  更多相關(guān)文章： 多囊卵巢綜合征 3T3-L1前脂肪細(xì)胞 脂肪干細(xì)胞 過氧化物酶增殖物激活受體γ 脂肪酸結(jié)合蛋白

【摘要】：研究目的:本研究將綠色熒光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)標(biāo)記的3T3-L1前脂肪細(xì)胞移植入多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)小鼠模型,追蹤3T3-L1前脂肪細(xì)胞在小鼠體內(nèi)的表達(dá),并觀察小鼠卵巢的卵泡數(shù)目、大小及成熟度等推測小鼠的排卵情況,以探討3T3-L1前脂肪細(xì)胞對PCOS小鼠的治療作用。并通過提取人脂肪干細(xì)胞,體外培養(yǎng)及鑒定,檢測在高胰島素及高睪酮情況下對人脂肪干細(xì)胞的影響,為臨床上對PCOS患者的治療提供一種新的思路和方法。研究方法:1.實驗動物選用SPF級雌性C57/BL6小鼠,23日齡。購買后1周適應(yīng)光照周期,自由飲水、攝食飼養(yǎng)。實驗動物分為空白對照組(Wild-type,WT):正常未處理小鼠;多囊卵巢綜合征組(PCOS):建立PCOS模型后不作處理;尾靜脈注射組(Intravenous,IV):建立PCOS模型成功后通過尾靜脈注射3T3-L1前脂肪細(xì)胞懸液。2.通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方法獲得GFP標(biāo)記的3T3-L1前脂肪細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106/ml,將0.2ml細(xì)胞懸液通過尾靜脈注入小鼠體內(nèi),第二天重復(fù)注射1次,分別于植入后的1周及1個月取小鼠卵巢行冰凍切片,在熒光顯微鏡下觀察3T3-L1前脂肪細(xì)胞的卵巢歸巢情況。3.植入脂肪干細(xì)胞后的1周及1個月,取小鼠卵巢組織進(jìn)行固定、包埋、切片,行HE染色后進(jìn)行病理組織形態(tài)學(xué)觀察小鼠卵巢形態(tài)、結(jié)構(gòu)及卵泡數(shù)目的變化。4.取正常健康妊娠孕婦行剖宮產(chǎn)術(shù)時皮下脂肪組織,分離、培養(yǎng)及鑒定脂肪干細(xì)胞,用高濃度(10-4mol/L)、中濃度(10-5mol/L)、低濃度(10-6mol/L)的睪酮及胰島素處理脂肪干細(xì)胞,運用Western Blot檢測脂肪干細(xì)胞中PPARγ及a P2表達(dá)的變化。5.采用SPSS 17.0分析軟件對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,PPARγ、a P2的表達(dá)量及小鼠排卵前卵泡的數(shù)目用sx?表示,多組間采用方差分析組間差異(one-way ANOVA),以P㩳0.05作為差異有統(tǒng)計學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果:1.通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方法可以得到穩(wěn)定攜帶GFP(+)基因的3T3-L1前脂肪細(xì)胞,并可以用于動物體內(nèi)的細(xì)胞追蹤。2.3T3-L1前脂肪細(xì)胞移植PCOS小鼠模型可以觀察到卵巢內(nèi)3T3-L1前脂肪細(xì)胞的歸巢現(xiàn)象。3.PCOS小鼠卵巢內(nèi)成熟卵泡減少,移植3T3-L1前脂肪細(xì)胞后1周及1個月小鼠排卵前卵泡數(shù)量增加,但移植后1周排卵前卵泡數(shù)量與對照組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),移植后1個月排卵前卵泡數(shù)量與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.通過對人脂肪組織的消化培養(yǎng)我們成功建立了人脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)體系。5.高胰島素及高睪酮會對脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)體系的分泌活動產(chǎn)生影響,藥物濃度越高PPARγ和a P2表達(dá)越低,高濃度組、中濃度組、低濃度組和空白對照組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.3T3-L1前脂肪細(xì)胞可以改善PCOS小鼠卵巢的功能,對PCOS有一定的治療作用。2.高胰島素和高睪酮可以在脂肪干細(xì)胞水平影響脂肪內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：多囊卵巢綜合征 3T3-L1前脂肪細(xì)胞 脂肪干細(xì)胞 過氧化物酶增殖物激活受體γ 脂肪酸結(jié)合蛋白
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R711.75
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• 英文摘要5-9
• 前言9-12
• 第一部分 3T3-L1前脂肪細(xì)胞對多囊卵巢綜合征小鼠模型的作用12-22
• 1 研究對象12-13
• 2 實驗材料13-14
• 3 實驗方法14-17
• 4 實驗結(jié)果17-22
• 第二部分 脂肪干細(xì)胞在高胰島素及高睪酮狀態(tài)下的內(nèi)分泌變化22-33
• 1 研究對象22
• 2 實驗材料22-24
• 3 實驗方法24-30
• 4 實驗結(jié)果30-33
• 討論33-36
• 結(jié)論36
• 展望36-37
• 參考文獻(xiàn)37-42
• 英文縮略詞42-43
• 研究生在讀期間發(fā)表論文情況43-44
• 致謝44

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 彭鑫磊;王蕊;周向榮;劉秋英;王一飛;;脂肪干細(xì)胞的研究及應(yīng)用進(jìn)展[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2010年12期

2 ;本刊已出版的“脂肪干細(xì)胞研究”熱點文章題錄[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年40期

3 雷華,李青峰;脂肪干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];中華整形外科雜志;2003年06期

4 張端珍,蓋魯粵,劉宏偉,朱鮮陽;脂肪干細(xì)胞體外分化為內(nèi)皮細(xì)胞的可行性[J];中國臨床康復(fù);2005年34期

5 胡鐵霞,李祖兵;新型骨組織工程種子細(xì)胞——脂肪干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;2005年01期

6 牟洪善;李金萍;王昌留;;脂肪干細(xì)胞研究近況[J];生命科學(xué)儀器;2006年03期

7 王蘋;王心蕊;李叔強;孫磊;劉明遠(yuǎn);;脂肪干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌樣分化特性的比較[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年37期

8 江麗;朱家愷;劉小林;項鵬;余偉華;;大鼠脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性的研究[J];中華顯微外科雜志;2007年03期

9 梁慧;王慶勝;方海濱;馬卉;;脂肪干細(xì)胞體外快速擴增實驗研究[J];中國誤診學(xué)雜志;2008年21期

10 朱艷霞;劉天慶;宋克東;馬學(xué)虎;崔占峰;;心肌樣微環(huán)境誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞分化的研究[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2009年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王福科;劉流;趙德萍;代曉明;李逸松;何曉光;;脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)中一種特異細(xì)胞的鑒定分析[A];第七屆中國醫(yī)師協(xié)會美容與整形醫(yī)師大會論文集[C];2010年

2 張志光;索明環(huán);;脂肪干細(xì)胞在體外長期傳代后成軟骨能力變化的研究[A];第七次全國顳下頜關(guān)節(jié)病學(xué)及（牙合）學(xué)研討會暨《顳下頜關(guān)節(jié)紊亂病及口頜面疼痛的基礎(chǔ)與臨床進(jìn)展》國家級繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2008年

3 周遵善;;脂肪干細(xì)胞的基礎(chǔ)及臨床應(yīng)用(英文)[A];2012全國中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)學(xué)美容學(xué)術(shù)交流大會論文匯編[C];2012年

4 林云鋒;敬偉;田衛(wèi)東;;基于脂肪干細(xì)胞的美容與組織再生修復(fù)新策略[A];美麗人生 和諧世界——中華醫(yī)學(xué)會第七次全國醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)術(shù)年會、中華醫(yī)學(xué)會醫(yī)學(xué)美學(xué)與美容學(xué)分會20周年慶典暨第三屆兩岸四地美容醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2010年

5 王�？�;劉流;趙德萍;代曉明;李逸松;李宗芳;;大鼠脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)中一種特異細(xì)胞的表型和成骨誘導(dǎo)分析[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

6 金歡;歐陽靜萍;;脂肪干細(xì)胞研究近況[A];湖北省暨武漢市病理生理學(xué)會第十四屆學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

7 紀(jì)偉寧;馬依彤;楊毅寧;王寶珠;劉芬;陳邦黨;向陽;;脂肪干細(xì)胞的分離培養(yǎng)及成心肌誘導(dǎo)[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

8 陳明;謝良地;謝鎮(zhèn)國;許昌聲;李宏亮;;脂肪干細(xì)胞的歸巢研究[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

9 徐靖宏;沈輝;鄭麗君;童蕓;;以玻尿酸為載體的脂肪干細(xì)胞復(fù)合物移植提高存活率的研究[A];2011年浙江省整形美容學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2011年

10 周遵善;;脂肪干細(xì)胞在微整形醫(yī)學(xué)的應(yīng)用[A];中華醫(yī)學(xué)會整形外科學(xué)分會第十一次全國會議、中國人民解放軍整形外科學(xué)專業(yè)委員會學(xué)術(shù)交流會、中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會醫(yī)學(xué)美容專業(yè)委員會全國會議論文集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 海燕;韓美用脂肪干細(xì)胞實現(xiàn)骨骼再生[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 記者 邰舉;韓利用脂肪干細(xì)胞克隆狗獲得成功[N];科技日報;2009年

3 記者 錢錚;腹部脂肪干細(xì)胞可轉(zhuǎn)為神經(jīng)細(xì)胞[N];新華每日電訊;2009年

4 小直;脂肪干細(xì)胞可以產(chǎn)生骨骼[N];華夏時報;2001年

5 任海軍;脂肪干細(xì)胞更易轉(zhuǎn)變?yōu)閕PS細(xì)胞[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2009年

6 ;脂肪干細(xì)胞有可能再生骨髓[N];新華每日電訊;2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 顧建英;脂肪干細(xì)胞與PLCL/P123靜電紡納米材料構(gòu)建組織工程皮膚促創(chuàng)面愈合的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 盛玲玲;脂肪干細(xì)胞移植促進(jìn)擴張皮膚再生的實驗研究[D];上海交通大學(xué);2014年

3 趙勇;脂肪干細(xì)胞生物學(xué)特性及參與脊髓損傷修復(fù)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

4 申霄;脂肪干細(xì)胞微環(huán)境對衰老成纖維細(xì)胞作用及機制的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

5 吳瓊;基質(zhì)細(xì)胞衍生因子促進(jìn)脂肪干細(xì)胞向創(chuàng)傷區(qū)域定向遷移的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

6 肖波;脂肪干細(xì)胞及其來源細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)建的新型組織工程神經(jīng)在周圍神經(jīng)修復(fù)中的應(yīng)用[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

7 孫敏;脂肪干細(xì)胞治療小鼠卵巢早衰的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

8 朱艷霞;脂肪干細(xì)胞增殖特性及向心肌細(xì)胞分化的研究[D];大連理工大學(xué);2009年

9 王淼;抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B可促進(jìn)人脂肪干細(xì)胞分化[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 王清富;聚乙烯亞胺介導(dǎo)骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因轉(zhuǎn)染脂肪干細(xì)胞的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 翁劍銳;移植脂肪干細(xì)胞對血管損傷后內(nèi)膜增生的影響及機制研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 劉少鵬;經(jīng)腎動脈移植脂肪干細(xì)胞對大鼠急性缺血性腎損傷的治療作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 張凱哲;Toll樣受體3活化對小鼠脂肪干細(xì)胞生物學(xué)功能的影響[D];大連理工大學(xué);2015年

4 尚志剛;慢病毒介導(dǎo)P63基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞的實驗研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

5 依里牙爾·依里哈木;IFN-γ增強脂肪干細(xì)胞介導(dǎo)的免疫抑制機制[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

6 李江璇;VEGF基因修飾后人脂肪干細(xì)胞上清對成纖維細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞的影響[D];暨南大學(xué);2015年

7 祁美武;脂肪干細(xì)胞治療放射性肌肉纖維化的實驗研究[D];南華大學(xué);2015年

8 何赤東;不同方法制備富血小板纖維蛋白對脂肪干細(xì)胞體外增殖影響的實驗研究[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

9 黃成龍;骨質(zhì)疏松小鼠脂肪干細(xì)胞成骨能力的研究[D];四川醫(yī)科大學(xué);2015年

10 潘晨晨;糖尿病勃起功能障礙的臨床證型與實驗研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

，

本文編號：1021749