本文關鍵詞：IRS-1及ERK2絲氨酸磷酸化與PCOS患者IR的關系

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【摘要】：目的研究多囊卵巢綜合癥(polycystic ovary syndrome PCOS)伴胰島素抵抗(insulin resistance IR)和無胰島素抵抗患者的黃素化顆粒細胞胰島素受體底物1(insulin receptor substrate-1 IRS-1)和細胞外信號調節(jié)激酶-2(extracellular signal-regulated kinase-2 ERK2)蛋白表達及其絲氨酸磷酸化程度,探討PCOS患者胰島素抵抗發(fā)生的分子生物學機制。方法收集行體外受精-胚胎移植(IVF-ET)治療的PCOS患者和正常對照組患者取卵日卵泡黃素化顆粒細胞,并進行提純培養(yǎng)。根據(jù)IR穩(wěn)態(tài)模型指數(shù)HOMA將PCOS患者顆粒細胞分為IR組和無IR組。采用Western blot方法測定三組顆粒細胞IRS-1、IRS-1Ser312磷酸化和ERK2、ERK2絲氨酸磷酸化的表達。結果(1)單因素方差分析PCOS伴IR組和無IR組體內促黃體生成素和睪酮水平及BMI均較正常對照組高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)FIN及HOMA-IR進行比較,PCOS伴IR組最高,對照組最低,三組間差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);三組之間FPG比較,差異無顯著性(P0.05);PCOS伴IR組BMI高于PCOS無IR組和對照組,差異有顯著性(P0.05),PCOS無IR組和對照組之間BMI比較無明顯差異(P0.05)。(3)PCOS伴IR組IRS-1Ser312磷酸化及ERK2磷酸化程度均較另外兩組高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05),但IRS-1和ERK2蛋白表達量三組之間無明顯差異(P0.05)。PCOS伴IR組肥胖患者與非肥胖患者IRS-1Ser312、ERK2絲氨酸磷酸化無明顯差異(P0.05)。結論PCOS患者卵巢顆粒細胞如同其他經(jīng)典胰島素靶細胞一樣存在IR,且有胰島素受體后信號轉導分子的改變;PCOS患者卵巢顆粒細胞并不是通過增加ERK2和IRS-1蛋白的表達量,而是通過增強ERK2磷酸化和IRS-1Ser312磷酸化,進而提高MAPK通路活性、降低PI3-K通路活性,導致PCOS患者IR的發(fā)生。
【關鍵詞】：人卵巢顆粒細胞 胰島素抵抗 胰島素受體底物1 細胞外信號調節(jié)激酶-2 磷酸化
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R711.75
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-7
• 引言7-9
• 第1章 材料和方法9-17
• 1.1 臨床資料9
• 1.2 實驗儀器、材料與試劑9-13
• 1.2.1 實驗儀器9-10
• 1.2.2 實驗材料與試劑10-11
• 1.2.3 主要溶液配制11-13
• 1.3 實驗方法13-16
• 1.3.1 顆粒細胞提純與培養(yǎng)13
• 1.3.2 顆粒細胞總蛋白的提取13
• 1.3.3 免疫印跡法檢測IRS-1、ERK2蛋白表達13-15
• 1.3.4 免疫沉淀法檢測IRS-1、ERK2絲氨酸磷酸化程度15
• 1.3.5 空腹血糖(Fasting plasma glucose，，F(xiàn)PG)的測定15-16
• 1.3.6 血清胰島素的測定及胰島素抵抗的評價16
• 1.4 統(tǒng)計分析16-17
• 第2章 結果17-20
• 2.1 三組患者血清激素水平比較17
• 2.2 三組患者FPG、FIN、HOMA-IR及BMI比較17
• 2.3 顆粒細胞培養(yǎng)情況17-18
• 2.3.1 顆粒細胞形態(tài)特征及生長狀態(tài)17-18
• 2.3.2 顆粒細胞數(shù)及活率18
• 2.4 三組患者顆粒細胞IRS-1 和ERK2蛋白表達及絲氨酸磷酸化比較18-19
• 2.5 IR肥胖組與非肥胖組IRS-1 和ERK2絲氨酸磷酸化比較19-20
• 第3章 討論20-25
• 3.1 卵巢顆粒細胞與PCOS患者IR20
• 3.2 肥胖與PCOS患者IR20
• 3.3 PCOS患者卵巢局部胰島素作用途徑缺陷20-21
• 3.4 IRS-1 與IR的關系21-22
• 3.4.1 IRS-l的結構與功能21-22
• 3.4.2 IRS-1 蛋白表達及絲氨酸磷酸化與PCOS患者IR22
• 3.5 ERK2與IR的關系22-23
• 3.5.1 ERK2的結構與功能22-23
• 3.5.2 ERK2蛋白表達及絲氨酸磷酸化與PCOS患者IR23
• 3.6 肥胖與IRS-1、ERK2絲氨酸磷酸化23-24
• 3.7 問題與展望24-25
• 第4章 結論25-26
• 參考文獻26-29
• 綜述29-37
• 參考文獻35-37
• 攻讀學位期間的研究成果37-38
• 致謝38-39

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：1010938