本文關(guān)鍵詞：UBE2C基因沉默對膀胱癌5637細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響及其機(jī)制

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【摘要】：目的探討人類泛素偶聯(lián)酶E2C(UBE2C)基因沉默對膀胱癌5637細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響及作用機(jī)制。方法將對數(shù)生長期的膀胱癌5637細(xì)胞隨機(jī)分為5組,其中UBE2C siRNA1、2、3組及陰性對照組分別采用瞬時轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染3條UBE2C小干擾RNA(UBE2C siRNA1、2、3)和陰性對照-siRNA,空白對照組不進(jìn)行轉(zhuǎn)染。采用RT-PCR法和Western blotting法檢測各組UBE2C mRNA及蛋白相對表達(dá)量,UBE2C siRNA1、2、3組細(xì)胞UBE2C mRNA及蛋白相對表達(dá)量均低于陰性對照組、空白對照組,UBE2C siRNA2組明顯低于UBE2C siRNA1、3組(P均0.05);證實UBE2C siRNA2組沉默效果最好。收集UBE2C siRNA2組和陰性對照組、空白對照組細(xì)胞,采用MTT法檢測培養(yǎng)0、24、48、72、96 h的細(xì)胞增殖能力(以O(shè)D490表示),Transwell侵襲實驗檢測侵襲能力(以穿過小室膜的細(xì)胞數(shù)表示),Western blotting法檢測細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相對表達(dá)量。結(jié)果隨著培養(yǎng)時間的延長,UBE2C siRNA2組、陰性對照組和空白對照組OD490呈升高趨勢;UBE2C siRNA2組培養(yǎng)48、72、96 h的OD490均明顯低于陰性對照組和空白對照組(P均0.01)。UBE2C siRNA2組、陰性對照組和空白對照組穿過小室膜的細(xì)胞數(shù)分別為(58.3±2.2)、(129.3±3.1)、(162.7±5.1)個,組間兩兩比較P均0.01。三組細(xì)胞Akt蛋白相對表達(dá)量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05),UBE2C siRNA2組p-Akt蛋白相對表達(dá)量低于陰性對照組和空白對照組(P均0.01)。結(jié)論 UBE2C基因沉默后膀胱癌5637細(xì)胞增殖和侵襲能力降低,抑制Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可能是其作用機(jī)制。
【作者單位】： 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 膀胱癌 人類泛素偶聯(lián)酶EC 細(xì)胞增殖 侵襲 細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶B
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(81272823) 河南省教育廳科技創(chuàng)新團(tuán)隊支持計劃(14IRTSTHN020)
【分類號】：R737.14
【正文快照】： 膀胱癌具有多發(fā)、高復(fù)發(fā)性的特點,復(fù)發(fā)后的惡性程度較首發(fā)時更高。人類泛素偶聯(lián)酶E2C(UBE2C)屬于泛素-蛋白酶體通路(UPP)中的E2酶家族。UPP家族由泛素激活酶、泛素偶聯(lián)酶、泛素連接酶等組成[1],可引起真核生物細(xì)胞內(nèi)蛋白的降解[2],對調(diào)控細(xì)胞周期、細(xì)胞程序性死亡、轉(zhuǎn)錄及腫瘤

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：980072