本文關(guān)鍵詞：P-糖蛋白在不同膀胱癌細(xì)胞株間的選擇性轉(zhuǎn)移

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【摘要】：目的探討功能性P-糖蛋白在膀胱癌不同細(xì)胞株間是否存在選擇性轉(zhuǎn)移及其機(jī)制。方法用Transwell將膀胱癌耐藥株細(xì)胞BIU-87/ADM分別與敏感膀胱癌細(xì)胞株T24和EJ進(jìn)行共培養(yǎng),共聚焦顯微鏡觀察共培養(yǎng)Transwell下室的T24和EJ細(xì)胞(即獲得性耐藥細(xì)胞Aq MDR)P-糖蛋白的轉(zhuǎn)移,利用Western Blot檢測(cè)BIU-87/ADM、T24/aq MDR、T24、EJ/aq MDR及EJ細(xì)胞P-gp的表達(dá)量,利用RT-PCR分析這些細(xì)胞MDR1 m RNA的表達(dá)水平。采用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)BIU-87/ADM、T24/aq MDR、T24、EJ/aq MDR及EJ細(xì)胞內(nèi)羅丹明-123熒光強(qiáng)度。利用RT-PCR分別對(duì)BIU-87/ADM、BIU-87、EJ、T24細(xì)胞中幾種介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞間惡性特質(zhì)轉(zhuǎn)移的細(xì)胞膜蛋白或受體(CD44分子、Ezrin蛋白、整合素b1)的m RNA表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果共聚焦結(jié)果顯示這些細(xì)胞核均呈藍(lán)色熒光,胞漿和胞膜呈不同程度的綠色熒光,BIU-87/ADM呈強(qiáng)綠色熒光,T24/aq MDR呈中等強(qiáng)度綠色熒光,而T24、EJ/aq MDR及EJ細(xì)胞均呈現(xiàn)弱綠色熒光。Western Blot檢測(cè)結(jié)果顯示,BIU-87/ADM細(xì)胞中P-gp的表達(dá)水平最高,T24/aq MDR細(xì)胞中P-gp的表達(dá)弱于BIU-87/ADM細(xì)胞(p0.05),卻明顯強(qiáng)于T24細(xì)胞(p0.05),而EJ/aq MDR和EJ細(xì)胞中P-gp表達(dá)水平均較低。RT-PCR結(jié)果顯示,只有BIU-87/ADM細(xì)胞中MDR1 m RNA表水平較高,而其余四種細(xì)胞表達(dá)水平很低且彼此間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。羅丹明123試驗(yàn)顯示:BIU-87/ADM、T24/aq MDR、T24、EJ/aq MDR及EJ細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度依次增高,其中T24、EJ/aq MDR及EJ細(xì)胞中熒光強(qiáng)度均較強(qiáng)且彼此間差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。RT-PCR檢測(cè)CD44分子、Ezrin蛋白、整合素b1在七種細(xì)胞中表達(dá)水平均較高,但彼此間差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論P(yáng)-gp能夠從耐藥的膀胱癌細(xì)胞株BIU-87/ADM轉(zhuǎn)移到敏感的膀胱癌細(xì)胞株T24中,且這種獲得性P-gp具有藥物外排功能。而P-gp不能或者很少量從耐藥的膀胱癌細(xì)胞株BIU-87/ADM轉(zhuǎn)移到敏感的膀胱癌細(xì)胞EJ中。在共培養(yǎng)前后P-gp轉(zhuǎn)移的過(guò)程中不伴有多藥耐藥基因MDR1的轉(zhuǎn)移。這一現(xiàn)象說(shuō)明P-gp在膀胱癌不同細(xì)胞株間轉(zhuǎn)移具有選擇性,在以微粒(MPs)介導(dǎo)的膀胱癌細(xì)胞株間P-gp轉(zhuǎn)移的機(jī)制中,CD44分子、Ezrin蛋白、整合素b1在各種細(xì)胞中表達(dá)均無(wú)明差異,即無(wú)充分證據(jù)支持這些粘附分子參與了P-gp在膀胱癌細(xì)胞間的轉(zhuǎn)移,這也為進(jìn)一步研究P-gp介導(dǎo)的膀胱癌多藥耐藥的機(jī)制提供了新的思路及研究方向。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌細(xì)胞 P-糖蛋白 mdr1基因 多藥耐藥 膜微粒
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 英文縮寫(xiě)一覽表4-5
• 摘要5-6
• Abstract6-7
• 前言7-10
• 材料與方法10-22
• 1 實(shí)驗(yàn)材料10-13
• 2 實(shí)驗(yàn)方法13-22
• 結(jié)果22-31
• 1 激光共聚焦顯微鏡觀察P-gp在不同AqMDR 細(xì)胞的轉(zhuǎn)移22-23
• 2 Western Blot 分析各種細(xì)胞P-gp表達(dá)水平23-24
• 3 RT-PCR 檢測(cè)各組細(xì)胞 MDR1 的 m RNA 表達(dá)24-25
• 4 羅丹明-123 外排實(shí)驗(yàn)25-27
• 5 RT-PCR檢測(cè)編碼CD44 、Ezrin、整合素β1等蛋白的基因的mRNA在各種細(xì)胞中的表達(dá)水平27-31
• 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 綜述39-46
• 參考文獻(xiàn)44-46
• 致謝46

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 朱寶英;黃靜;王永林;方翼;;P-糖蛋白及腫瘤多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)[J];中國(guó)藥房;2011年06期

2 聞鎳;張雙慶;朱凌;于敏;李佐剛;;P-糖蛋白最新研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥事;2011年07期

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本文編號(hào)：973064