本文關鍵詞：IgA腎病患者外周B淋巴細胞miR-374b致病機制研究

  更多相關文章： MiR-374b B淋巴細胞 IgA1 O-糖基化 IgA腎病

【摘要】：目的：IgA腎病(IgAN)是世界最常見的原發(fā)性腎小球疾病,也是導致終末期腎衰的重要原因。在中國約45%的原發(fā)性腎小球腎炎患者表現(xiàn)為IgAN。IgAN患者IgA1分子鉸鏈區(qū)O-糖鏈半乳糖基減少,異常糖基化的IgA1在系膜區(qū)沉積,導致系膜活化和腎臟損傷。但目前為止IgAN患者低糖基化IgA1的發(fā)生機制尚未完全闡明。多種證據(jù)表明miRNAs可參與基因的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控,并且在包括腎臟疾病在內(nèi)的多種疾病的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。我們在前期芯片分析中發(fā)現(xiàn)IgAN患者外周B淋巴細胞中miR-374b顯著上調(diào)。本研究驗證了miR-374b表達水平變化及其臨床意義,并深入研究了miR-374b的致病機制。方法：入組30例在南京軍區(qū)南京總醫(yī)院國家腎臟疾病臨床醫(yī)學研究中心行腎穿刺明確診斷為原發(fā)性IgAN患者,腎活檢病理檢查包括光鏡和免疫病理,部分病例行電鏡檢查以排除薄基底膜腎病。臨床上已排除諸如過敏性紫癜、肝硬化等繼發(fā)性IgAN。正常對照組由15名健康志愿者組成,收集血液標本。經(jīng)抗-CD19磁珠分離外周血B淋巴細胞,利用RT-PCR, western blot(WB)及原位雜交(ISH)或原代培養(yǎng)等技術進行相關分析。利用HAA凝集素結合實驗分析患者血清及細胞培養(yǎng)基上清液中IgA1異常糖基化水平。通過雙熒光素酶報告基因檢測miRNA結合靶點。MiR-374b轉(zhuǎn)染B淋巴細胞,觀察靶基因Cosmc和PTEN表達水平,并檢測B淋巴細胞增殖速度。本研究符合赫爾辛基宣言原則并經(jīng)南京軍區(qū)南京總醫(yī)院倫理委員會審查通過。結果：IgAN患者平均年齡34.8±12.1歲,男/女性別比16/14,24h尿蛋白、尿沉渣紅細胞、血清肌酐分別為1.53±1.19g/d、157.0(63.0～290.0)×104/ml、1.09±0.49mg/d1。在IgAN患者B淋巴細胞中Cosmc和PTEN的mRNA和蛋白水平明顯下降,并分別與IgA1異常糖基化水平及B淋巴細胞計數(shù)正相關。最近有研究報道,在IgAN患者外周血單核細胞(PBMCs)中有37個差異表達的miRNAs,在這些差異表達的miRNAs中,miR-374b表達增加。我們利用抗CD19磁珠分離IgAN患者外周血B淋巴細胞,并分析miRNAs表達譜發(fā)現(xiàn)miR-374b在IgAN患者B淋巴細胞中表達水平顯著升高。經(jīng)相關分析,我們發(fā)現(xiàn)miR-374b可能靶向PTEN和Cosmc。而且,IgAN患者miR-374b水平與MEST評分和蛋白尿水平正相關。通過熒光素酶報告基因檢測和WB證實miR-374b可靶向PTEN和Cosmc。對來自正常對照B淋巴細胞原代培養(yǎng)后轉(zhuǎn)染miR-374b mimics,可降低內(nèi)源性PTEN和Cosmc水平,并且導致B淋巴細胞增殖和異常糖基化IgA1的產(chǎn)生。相反,抑制原代培養(yǎng)的B淋巴細胞中miR-374b表達,可增加PTEN和Cosmc水平,并可抑制B淋巴細胞增殖和異常糖基化IgA1的產(chǎn)生。結論：IgAN患者miR-374b表達上調(diào)通過靶向PTEN和Cosmc促進B淋巴細胞增殖和IgA1異常糖基化。抑制miR-374b可阻止B淋巴細胞增殖和IgA1異常糖基化,可能成為治療IgAN的新方法。
【關鍵詞】：MiR-374b B淋巴細胞 IgA1 O-糖基化 IgA腎病
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R692.31
【目錄】：

• 高頻英文縮略詞表5-7
• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-14
• 材料與方法14-24
• 1. 材料14-16
• 2. 方法16-23
• 統(tǒng)汁學分析23-24
• 結果24-31
• 討論31-34
• 全文總結34
• 創(chuàng)新性34-35
• 參考文獻35-39
• 綜述：IGA腎病發(fā)病機制研究進展39-57
• 引言39
• IGAN中的GD-IGA1及抗GD-IGA1抗體39-42
• 基于基因組研究的其它發(fā)現(xiàn)42-44
• IGAN IGA1分泌細胞中的信號通路44-46
• MICRORNA在IGAN中的作用46-49
• 小結49-51
• 參考文獻51-57
• 附錄57-59
• 碩士期間工作58-59
• 致謝59-60

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1 高文濤,張一楚,姜洪華,歐敬民,于勇;局部腎素血管緊張素系統(tǒng)在人T淋巴細胞增殖中的表達及作用[J];上海醫(yī)學;2003年06期

2 沈(王羽)t2,吳寧華,程小款,張力,衡鳳燕;升溫對T淋巴細胞增殖的影響[J];中國醫(yī)學科學院學報;1988年04期

3 石玉城,曹素元,楊在綱;固本消敏湯對淋巴細胞增殖的影響及方劑作用分析[J];貴陽中醫(yī)學院學報;1991年04期

4 王華;;淋巴細胞增殖試驗作為毒物暴露生物指標的可能性[J];國外醫(yī)學(衛(wèi)生學分冊);1992年04期

5 張志慧;陳金亮;王殿華;;龜鹿益髓膠囊對實驗性腦脊髓炎發(fā)病情況、T淋巴細胞增殖及細胞因子的影響[J];時珍國醫(yī)國藥;2008年06期

6 仲人前;體外測定B淋巴細胞增殖法[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;1989年01期

7 聶小華,史寶軍,敖宗華,尹光耀,金堅,陶文沂;黃芪活性成分的提取及其對淋巴細胞增殖的影響[J];無錫輕工大學學報;2003年04期

8 宋朋紅,謝海洋,鄭樹森,吳健;蛋白酶體抑制劑對T淋巴細胞增殖活化的影響[J];中國病理生理雜志;2005年03期

9 呂佩源;宋春風;高昌星;井上敦;;實驗性變態(tài)反應性腦脊髓炎T淋巴細胞增殖和腫瘤壞死因子-α變化的意義(英文)[J];疑難病雜志;2006年03期

10 富東旭;李大林;李殿俊;李霞;付東然;李波;;瘦素對人類外周血T淋巴細胞增殖作用的影響[J];中國免疫學雜志;2006年07期

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1 劉擁軍;;銀消顆粒對小鼠T、B淋巴細胞增殖的影響[A];中華中醫(yī)藥學會皮膚科分會第七次學術年會、2010年重慶四川中西醫(yī)結合皮膚性病學術年會、全國中西醫(yī)結合診療皮膚性病新進展新技術學習班論文匯編[C];2010年

2 宋朋紅;謝海洋;鄭樹森;吳健;;蛋白酶體抑制劑對T淋巴細胞增殖活化的影響[A];2004年浙江省外科學學術年會論文匯編[C];2004年

3 賈永前;曾婷婷;潘曉夫;李亞瓊;范家鳳;孟文彤;;骨髓間充質(zhì)干細胞及轉(zhuǎn)基因骨髓間充質(zhì)干細胞對淋巴細胞增殖的影響[A];中華醫(yī)學會第八次全國血液學學術會議論文匯編[C];2004年

4 白彥萍;陳志華;李紅艷;楊頂權;;常用中藥靜脈注射劑對T淋巴細胞增殖的影響的比較[A];2003中國中西醫(yī)結合皮膚性病學術會議論文匯編[C];2003年

5 吳嵐;趙麗娟;楊娉婷;魯靜;肖衛(wèi)國;;紅霉素對T淋巴細胞增殖的影響[A];第十屆全國風濕病學學術會議論文集[C];2005年

6 朱平;;移植后淋巴細胞增殖病的病因和臨床診治[A];第一屆全國難治性淋巴瘤學術研討會暨第二屆全國多發(fā)性骨髓瘤學術研討會（國家級血液系統(tǒng)惡性腫瘤繼續(xù)醫(yī)學教育學習班）繼續(xù)教育集[C];2007年

7 曹秀明;馬嬌;萬曉峰;;N-乙酰氨基葡萄糖激活Ca~(2+)信號通路體外誘導小鼠T淋巴細胞增殖[A];全國第十一屆生化與分子藥理學學術會議論文集[C];2009年

8 丁晨光;田普訓;薛武軍;潘曉鳴;項和立;李楊;靳占奎;毛天賜;段萬里;席敏;田曉輝;;蟲草素在體外抑制T淋巴細胞增殖和向Th17分化[A];2012中國器官移植大會論文匯編[C];2012年

9 宋向鳳;孫翔;王輝;;雌孕激素對淋巴細胞增殖的影響[A];第6次全國微生物學與免疫學大會論文摘要匯編[C];2004年

10 陳櫻;鄧為民;姚智;李海東;;高糖促進美羅華對人B淋巴細胞增殖的抑制作用及相關機制[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

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1 趙洪強;哺乳動物雷帕霉素靶蛋白復合物2在白介素-35介導T淋巴細胞增殖抑制中的作用及機制[D];中國人民解放軍醫(yī)學院;2015年

2 王瑾;抗β1-腎上腺素受體自身抗體對T淋巴細胞增殖和分泌功能的影響[D];山西醫(yī)科大學;2011年

3 蔣燕靈;抗B7分子單克隆抗體與免疫抑制劑聯(lián)用對感染人巨細胞病毒的T淋巴細胞增殖影響及機理初探[D];浙江大學;2007年

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1 胡帥;IgA腎病患者外周B淋巴細胞miR-374b致病機制研究[D];南京大學;2016年

2 宋瑾;人羊膜間充質(zhì)干細胞對淋巴細胞增殖的影響及致瘤性研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2015年

3 呂婷婷;β_1-腎上腺素受體自身抗體對大鼠B淋巴細胞增殖的影響及其可能機制[D];山西醫(yī)科大學;2012年

4 禚守蓉;XGD-1對人外周血T淋巴細胞增殖和IL-2R表達的影響[D];昆明醫(yī)學院;2003年

5 張丹;一氧化氮在人骨髓間充質(zhì)干細胞抑制淋巴細胞增殖中的機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2008年

6 曾婷婷;小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞在體外對淋巴細胞增殖和細胞凋亡的影響[D];四川大學;2006年

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8 張碩;人骨髓間充質(zhì)干細胞抑制T淋巴細胞增殖及IL-10、IFN-γ、LFA-1 mRNA表達的實驗研究[D];河北醫(yī)科大學;2010年

9 宮照龍;胸腺素alpha-1基因的克隆、表達及其對淋巴細胞增殖的影響[D];安徽醫(yī)科大學;2004年

10 柯珍;hsBAFF通過Ca~(2+)-CaMKII信號轉(zhuǎn)導激活mTOR通路促進B淋巴細胞增殖機理研究[D];南京師范大學;2012年

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