本文關(guān)鍵詞：沉默Notch信號(hào)通路對(duì)膀胱癌EMT影響的體內(nèi)研究

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【摘要】：目的:通過(guò)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探討沉默Notch受體對(duì)膀胱癌對(duì)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影響和分子機(jī)制。方法:構(gòu)建膀胱腫瘤5637細(xì)胞裸鼠移植模型18只,隨機(jī)分成3組(n=6):分別為加藥組(γ分泌酶抑制劑處理組)、轉(zhuǎn)染組(沉默Notch-1受體組)和對(duì)照組。每7天皮外測(cè)量瘤體大小,5周后處死,取出瘤體,測(cè)量瘤體大小及質(zhì)量,病理切片檢測(cè)瘤體性質(zhì),免疫組化檢測(cè)瘤體內(nèi)EMT標(biāo)記物蛋白的表達(dá)情況,通過(guò)RT-PCR及為westen blot技術(shù)檢測(cè)各組瘤體組織內(nèi)E-cadherin、N-cadherin、vimentin的m RNA及蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:加藥組、及轉(zhuǎn)染組瘤體生長(zhǎng)速度均低于對(duì)照組(P0.05),加藥組瘤體生長(zhǎng)速度低于轉(zhuǎn)染組(P0.05),5周后,加藥組瘤體大小、質(zhì)量顯著低于對(duì)照組(P0.05),轉(zhuǎn)染組瘤體大小、質(zhì)量均低于對(duì)照組(P0.05),加藥組瘤體大小、質(zhì)量均低于轉(zhuǎn)染組(P0.05),經(jīng)病理切片證實(shí)為惡性腫瘤組織,鏡下見(jiàn)瘤細(xì)胞大小不等,細(xì)胞核濃染,胞漿豐富,異型性明顯,細(xì)胞密集。通過(guò)免疫組化檢測(cè)瘤體內(nèi)EMT標(biāo)記物蛋白的表達(dá)情況示:移植腫瘤組織中,轉(zhuǎn)染組E-cadherin、N-cadherin蛋白表達(dá)上調(diào),vimentin蛋白表達(dá)下調(diào);加藥組E-cadherin蛋白表達(dá)上調(diào),而N-cadherin、vimentin蛋白表達(dá)下調(diào)(圖15)。通過(guò)RT-PCR及western blot技術(shù)檢測(cè)各組瘤體組織內(nèi)E-cadherin、N-cadherin、vimentin的m RNA及蛋白表達(dá)變化,結(jié)果顯示:轉(zhuǎn)染組E-cadherin、N-cadherin m RNA和蛋白表達(dá)顯著性上調(diào)(P0.05),vimentin m RNA和蛋白顯著性下調(diào)(P0.05);加藥組E-cadherin m RNA和蛋白表達(dá)顯著性上調(diào)(P0.05),而N-cadherin、vimentin m RNA和蛋白顯著性下調(diào)(P0.05)。結(jié)論:在體內(nèi)通過(guò)沉默Notch信號(hào)通路,能有效抑制膀胱癌EMT進(jìn)程,并有效的抑制瘤體生長(zhǎng)。
【關(guān)鍵詞】：膀胱癌 Notch EMT 裸鼠
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.14
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-12
• 第2章 材料與方法12-21
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-14
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物12
• 2.1.2 細(xì)胞株來(lái)源12
• 2.1.3 主要試劑12-13
• 2.1.4 主要儀器與設(shè)備13
• 2.1.5 主要試劑的配制13-14
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法14-20
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)14
• 2.2.2 細(xì)胞復(fù)蘇和換液14-15
• 2.2.3 細(xì)胞傳代15
• 2.2.4 細(xì)胞凍存15
• 2.2.5 調(diào)整細(xì)胞濃度15-16
• 2.2.6 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)16
• 2.2.7 實(shí)驗(yàn)裸鼠移植瘤模型的構(gòu)建16
• 2.2.8 裸鼠的分組及處理16
• 2.2.9 裸鼠生長(zhǎng)狀態(tài)及移植瘤的觀察16-17
• 2.2.10 瘤體組織HE染色法17
• 2.2.11 瘤體組織免疫組化17-18
• 2.2.12 瘤體組織qRT-PCR檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、vimentin的m RNA表達(dá)變化18-19
• 2.2.13 瘤體組織western blot檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、vimentin的蛋白表達(dá)19-20
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理20-21
• 第3章 結(jié)果21-26
• 3.1 裸鼠模型成瘤率及各組裸鼠體內(nèi)腫瘤生長(zhǎng)情況觀察21
• 3.2 各瘤體之間的比較21-22
• 3.3 HE染色22-23
• 3.4 免疫組化23-24
• 3.5 Western bloting檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、vimentin的m RNA表達(dá)變化24-25
• 3.6 qRT-PCR檢測(cè)E-cadherin、N-cadherin、vimentin的m RNA表達(dá)變化25-26
• 第4章 討論26-29
• 第5章 結(jié)論和展望29-30
• 5.1 結(jié)論29
• 5.2 展望29-30
• 致謝30-31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 綜述 膀胱癌相關(guān)信號(hào)通路研究進(jìn)展34-38
• 參考文獻(xiàn)37-38

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1 張冬;于占革;;Notch信號(hào)通路與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年22期

2 孟曉;宋穎;劉云鵬;楊向紅;;大鼠骨髓源內(nèi)皮祖細(xì)胞分化過(guò)程N(yùn)otch信號(hào)通路活化及欖香烯干預(yù)機(jī)制的探討[J];中華腫瘤防治雜志;2012年07期

3 王t，

本文編號(hào)：944277