本文關(guān)鍵詞：Angiopoietin-1聯(lián)用L-mimosine對(duì)糖尿病大鼠腎臟缺氧及相關(guān)因子的影響

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【摘要】：背景和目的:糖尿病腎臟存在慢性缺氧和異常的血管生成,且與血管生成調(diào)控因子失衡相關(guān)。前期實(shí)驗(yàn)已證實(shí)Angiopoietin-1(Ang-1)可改善糖尿病腎臟血管生成調(diào)控因子異常表達(dá),一定程度上緩解糖尿病腎臟微血管病變。本課題通過Ang-1聯(lián)用低氧誘導(dǎo)因子(HIF)降解抑制劑(L-mimosine,L-mim),探討其對(duì)糖尿病腎臟缺氧及相關(guān)因子表達(dá)的影響。方法:構(gòu)建Ang-1腺病毒表達(dá)載體(Ad-Ang-1)。使用鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射誘導(dǎo)構(gòu)建SD大鼠糖尿病模型。設(shè)正常對(duì)照組(N組)、糖尿病組(D組)、Ang-1+L-mim治療組(AL組)及空白載體組(K組)。AL組于糖尿病成模8周后經(jīng)陰莖靜脈給予Ad-Ang-1(3×108 pfu/只),并隔日腹腔注射L-mim(50mg/kg);于12周、16周后采血觀察血糖、尿素、肌酐以及24小時(shí)尿蛋白變化;處死大鼠前1.5h靜脈注射缺氧探針(Hypoxyprobe?-1),取腎臟組織,免疫組化觀察缺氧情況,免疫組化/熒光、免疫印跡(western bloting)和實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-PCR)檢測(cè)Ang-1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、HIF-1α、血紅素加氧酶-1(HO-1)表達(dá)變化。結(jié)果:1.三個(gè)糖尿病模型組血糖、24小時(shí)尿蛋白均明顯高于N組(P0.01),且AL組24小時(shí)尿蛋白低于D組、K組(P0.05)。2.腎臟病理顯示三個(gè)糖尿病模型組可見不同程度腎小球增大、系膜基質(zhì)增多、細(xì)胞數(shù)增多、腎小管擴(kuò)張,部分球囊擴(kuò)張、腎小管上皮細(xì)胞顆粒和空泡變性等,AL組病理改變相對(duì)減輕。3.腎組織缺氧探針免疫組化顯示12周三個(gè)糖尿病模型組腎臟陽(yáng)性著染面積較N組明顯增大(P0.01),AL組陽(yáng)性著染面積較D組、K組明顯減小(P0.01),且AL組16周陽(yáng)性著染面積小于12周(P0.05)。4.免疫組化/熒光及蛋白印跡顯示:1Ang-1突出表達(dá)于腎小球及腎臟小血管,三個(gè)糖尿病模型組腎組織Ang-1明顯上調(diào)(P0.05),其中AL組16周時(shí)上調(diào)顯著高于D組和K組(P0.01);2VEGF突出表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞,三個(gè)糖尿病模型組腎組織VEGF顯著上調(diào)(P0.01),其中AL組上調(diào)明顯高于D組和K組(P0.05);3HIF-1α主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞,三個(gè)糖尿病模型組腎組織HIF-1α均顯著上調(diào)(P0.01),16周時(shí)D組和K組較12周時(shí)明顯下調(diào)(P0.05)且顯著低于AL組(P0.01);4HO-1主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞,三個(gè)糖尿病模型組腎組織HO-1明顯上調(diào)(P0.05),其中AL組上調(diào)明顯高于D組和K組(P0.05)。5.RT-PCR結(jié)果顯示:1三個(gè)糖尿病模型組腎組織Ang-1m RNA表達(dá)上調(diào),但僅AL組顯著高于N組(P0.05),且16周時(shí)明顯下調(diào)(P0.05);2三個(gè)糖尿病模型組12周時(shí)腎組織VEGFm RNA表達(dá)上調(diào),但僅AL組顯著高于N組(P0.05),16周時(shí)表達(dá)均下調(diào),但均無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);3三個(gè)糖尿病模型組腎組織HIF-1αm RNA表達(dá)上調(diào),但僅AL組顯著高于N組(P0.05),且16周時(shí)仍高于D組、K組(P0.05);4三個(gè)糖尿病模型組腎組織HO-1m RNA表達(dá)均較N組上調(diào),但僅16周時(shí)AL組顯著高于N組和D、K組(P0.05)。6.相關(guān)分析顯示:VEGF與Ang-1、HIF-1α表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.868、0.735,P0.05),三者表達(dá)水平與缺氧探針陽(yáng)性著染程度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.928、-0.956、-0.751,P0.05)。結(jié)論:1.Ang-1和L-mim聯(lián)用可改善糖尿病大鼠腎臟缺氧狀況。2.Ang-1和L-mim聯(lián)用可上調(diào)HIF-1α、VEGF、HO-1等缺氧相關(guān)因子的表達(dá),并且與改善糖尿病鼠腎缺氧相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病腎臟疾病 缺氧 血管生成 促血管生成素-1 L-mimosine
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-21
• 結(jié)果21-45
• 討論45-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 綜述53-60
• 參考文獻(xiàn)（綜述）58-60
• 致謝60-61
• 作者簡(jiǎn)介61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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本文編號(hào)：907162