發(fā)布時間：2017-09-23 17:03

  本文關(guān)鍵詞：VHL慢病毒表達和干擾載體的構(gòu)建及對腎癌細胞增殖和凋亡的影響

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【摘要】：目的構(gòu)建人VHL重組慢病毒表達載體及干擾載體,建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株,觀察VHL對腎癌細胞株增殖和凋亡的影響。方法構(gòu)建p Zs Green1-VHL及p LL3.7-sh VHL重組慢病毒載體,與3質(zhì)粒包裝系統(tǒng)用脂質(zhì)體法共同轉(zhuǎn)染293T細胞,包裝成病毒顆粒,分別感染A498、Caki-1細胞,并進行RT-PCR和Western blot檢驗細胞中VHL的表達。用MTS法和流式細胞儀檢測VHL對腎癌細胞增殖和凋亡效應(yīng)的影響。結(jié)果重組慢病毒載體及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株構(gòu)建成功,轉(zhuǎn)染后VHL在細胞中表達明顯變化;VHL過表達細胞的增殖速度明顯低于各對照組,而凋亡率明顯高于各對照組;VHL干擾細胞的增殖速度明顯高于各對照組,而凋亡率明顯低于各對照組(P0.05)。結(jié)論 VHL對腎癌細胞具有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用。
【作者單位】： 中國人民解放軍總醫(yī)院泌尿外科腎臟疾病國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 慢病毒載體 VHL基因 增殖 凋亡 腎腫瘤
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)(2012AA021101,2014AA020607)~~
【分類號】：R737.11
【正文快照】： VHL基因最早發(fā)現(xiàn)于常染色體顯性遺傳病vonHippel-Lindau的患者,它是以視網(wǎng)膜血管瘤、嗜鉻細胞瘤、腎透明細胞癌為特征的腫瘤綜合征。VHL基因位于人3號染色體短臂(3p25.3),有研究證實在腎透明細胞癌患者中,VHL基因的突變或啟動子的超甲基化會導(dǎo)致VHL基因功能失活。VHL基因功能

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1 徐勇,張文穎,馬騰驤;轉(zhuǎn)化生長因子 β Ⅱ 受體對膀胱癌細胞增殖的調(diào)節(jié)作用[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;1997年04期

2 吳銀霞;王業(yè)華;齊小康;顧沈陽;俞俊杰;;Let-7a下調(diào)k-Ras和c-Myc癌基因的表達抑制腎癌細胞增殖[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2014年06期

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中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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本文編號：906414