趨化因子CCL20與Th17細(xì)胞在IgA腎病發(fā)病機(jī)制中的相互作用
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更多相關(guān)文章: IgAN CCL20/CCR6 Th17/IL-17 發(fā)病機(jī)制
【摘要】:目的:檢測趨化因子CCL20在IgAN患者的表達(dá)水平,探討其受體CCR6在外周血免疫細(xì)胞的表達(dá),并探究他們與Th17細(xì)胞在IgAN之間的相互作用,為IgAN的發(fā)病機(jī)制提供一條新思路。方法:1、用IgAN患者血清與人腎小球系膜細(xì)胞孵育24小時,運用RT-PCR技術(shù)篩選出高表達(dá)的趨化因子;運用Jacalin-Agrose親和層析法提取IgAN患者血清和健康人血清中的Ig A1,然后分別與腎小球系膜細(xì)胞孵育24小時,再通過RT-PCR檢測兩組CCL20的m RNA表達(dá)水平;再用ELISA的方法直接檢測IgAN及健康人兩組血清中CCL20的表達(dá)水平。2、通過transwell趨化實驗及流式細(xì)胞分析了解CCL20優(yōu)先趨化的細(xì)胞及其受體在哪種(哪幾種)細(xì)胞上表達(dá)水平較高。3、通過胞內(nèi)因子染色實驗及細(xì)胞因子表達(dá)譜實驗檢測CCR6~+細(xì)胞與Th17細(xì)胞之間的關(guān)系。4、應(yīng)用免疫組化和免疫熒光技術(shù)分別檢測CCL20、T細(xì)胞及Th17細(xì)胞三者在IgAN患者腎臟組織、其他腎病組織及癌旁組織的表達(dá)。結(jié)果:1、趨化因子CCL20在IgAN患者血清與HMC孵育后的表達(dá)上升;且無論是檢測兩組血清提取的Ig A1與HMC孵育,還是單測IgAN患者和健康對照組的血清,結(jié)果均是CCL20的表達(dá)水平在IgAN患者組顯著高于健康對照組;2、趨化因子CCL20優(yōu)先趨化外周血T細(xì)胞(成熟T細(xì)胞),并且其受體CCR6在成熟T細(xì)胞中表達(dá)水平及平均熒光強度都較高;3、CCR6~+T細(xì)胞主要是分泌IL-17的Th17細(xì)胞,它們分泌炎癥因子到引起腎臟損傷或者形成免疫炎癥反應(yīng)進(jìn)一步損傷;4、用免疫組化法檢測在IgAN患者組織檢測到CCL20,而對照組則否;用免疫熒光法檢測到CD3~+CCR6~+IL-17~+細(xì)胞的存在,而對照組則否。結(jié)論:在IgAN中CCL20的高表達(dá)引起CCR6~+T細(xì)胞(主要是Th17細(xì)胞)的高表達(dá),Th17細(xì)胞通過分泌大量的炎癥因子和細(xì)胞因子進(jìn)一步引起腎臟損傷。
【關(guān)鍵詞】:IgAN CCL20/CCR6 Th17/IL-17 發(fā)病機(jī)制
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R692.31
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-11
- 第一部分:材料與方法11-25
- 第二部分:結(jié)果25-39
- 第三部分:討論39-43
- 結(jié)論43-44
- 參考文獻(xiàn)44-50
- 綜述50-62
- 參考文獻(xiàn)57-62
- 碩士期間完成論文62-63
- 名詞縮寫表63-64
- 致謝64-65
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本文編號:903865
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