本文關(guān)鍵詞：精子堿性單細(xì)胞凝膠電泳法優(yōu)化條件的建立及效果分析

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【摘要】：目的:探討精子堿性單細(xì)胞凝膠電泳法(SCGE)的主要影響因素,并優(yōu)化條件,以利于標(biāo)準(zhǔn)化。方法:采用不同濃度H2O2處理精子,堿性SCGE檢測精子DNA碎片(SDF),探討凝膠層數(shù)、DNA解旋及電泳時(shí)的p H、DNA解旋及電泳時(shí)間、計(jì)數(shù)精子數(shù)對結(jié)果的影響,分析優(yōu)化后方法的重復(fù)性,并用于檢測40例精液標(biāo)本。結(jié)果:3層瓊脂糖凝膠可降低本底,DNA解旋及電泳緩沖液最佳p H值為10,最佳DNA解旋及電泳時(shí)間分別為40 min和30 min,計(jì)數(shù)50個(gè)精子即可保證結(jié)果的可靠性。優(yōu)化后的堿性SCGE,用尾部DNA含量百分比表示,其批內(nèi)、批間變異系數(shù)(CV)分別為3.12%、7.13%,用DNA損傷得分表示,其批內(nèi)、批間CV分別為2.38%和6.09%。與健康生育男性相比,少弱畸形精子癥不育男性精液SDF顯著升高(P0.05)。結(jié)論:優(yōu)化后的精子堿性SCGE,重復(fù)性好,易于標(biāo)準(zhǔn)化,可用于不育男性SDF檢測,適合在臨床推廣應(yīng)用。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系;湖南省婦幼保健院生殖中心;
【關(guān)鍵詞】： 精子 DNA損傷 精子DNA碎片 堿性單細(xì)胞凝膠電泳
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81273002) 中南大學(xué)研究生自主探索創(chuàng)新項(xiàng)目(2014zzts327)~~
【分類號】：R698.2
【正文快照】： Supported by grants from National Natural Science Foundation of China(81273002)and Central South University Innovation Foundation for Postgraduates(2014zzts327).Correspondence to:XU Ke-qian,email:xukeqian@126.comReceived:May 4,2014;accepted:October 13,20，

本文編號：897874