本文關(guān)鍵詞：miR-27a對(duì)前列腺癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響

  更多相關(guān)文章： 前列腺癌 mi R-27a 遷移 侵襲 MARCKS

【摘要】：前列腺癌是世界范圍內(nèi)最為高發(fā)的男性癌癥之一,其中在發(fā)達(dá)國(guó)家更為普遍。在我國(guó),前列腺癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤。伴隨著人民生活質(zhì)量的提升以及針對(duì)前列腺癌的診斷技術(shù)的逐步普及,其發(fā)病率也呈逐年上升的趨勢(shì)。盡管雄激素剝奪治療在治療之初顯示一定的療效,但大部分患者最終死于癌癥的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,因此,探討影響前列腺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)因子將對(duì)前列腺癌的治療具有潛在的指導(dǎo)意義。mi RNAs作為一種小非編碼的RNA,是近些年的研究熱點(diǎn)。伴隨著研究的逐漸深入,發(fā)現(xiàn)mi RNAs能夠通過靶向抑制其靶基因在腫瘤的許多生物學(xué)過程中發(fā)揮重要地作用。其中由于mi R-27a在乳腺癌中異常的高表達(dá),而被認(rèn)為具有癌基因的功能,并能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。而mi R-27a前列腺癌中的存在這種異常高表達(dá)的現(xiàn)象,因此mi R-27a可能與前列腺癌的轉(zhuǎn)移相關(guān)。蛋白酶體抑制劑是一種在腫瘤治療過程中常用的抗癌藥物,其通過對(duì)蛋白酶體的抑制進(jìn)而達(dá)到抗腫瘤的作用。本課題通過RT-PCR檢測(cè)五種前列腺癌細(xì)胞中內(nèi)源性mi R-27a的表達(dá)水平,證明mi R-27a的表達(dá)水平與前列腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移水平呈正相關(guān)。接著檢測(cè)mi R-27a對(duì)前列腺癌細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響,證明mi R-27a能夠促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲。另外,利用在線軟件對(duì)mi R-27a的靶基因進(jìn)行了預(yù)測(cè),并利用RT-PCR和Western Blot篩選出mi R-27a的一個(gè)新靶基因—具有調(diào)控細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的MARCKS。為以后對(duì)分子機(jī)制的進(jìn)一步研究打下基礎(chǔ)。本課題通過一系列的實(shí)驗(yàn)證明了mi R-27a能夠促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的遷移和侵襲,并篩選出mi R-27a的一個(gè)新的靶基因MARCKS。同時(shí)雷公藤紅素與mi RNA表達(dá)圖譜分析結(jié)果顯示蛋白酶體抑制劑雷公藤紅素能夠抑制mi R-27a的表達(dá),進(jìn)一步證明雷公藤紅素能夠抑制前列腺癌的遷移和侵襲。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步闡明mi R-27a在前列腺癌發(fā)生和發(fā)展過程中所起的作用提供了寶貴的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：前列腺癌 mi R-27a 遷移 侵襲 MARCKS
【學(xué)位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.25
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第1章 緒論8-22
• 1.1 課題背景及研究的目的和意義8-9
• 1.2 前列腺癌的研究進(jìn)展9-14
• 1.2.1 前列腺癌的流行病學(xué)分析9-10
• 1.2.2 前列腺癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制10-12
• 1.2.3 前列腺癌的診斷及治療研究進(jìn)展12-14
• 1.3 miRNA的研究進(jìn)展14-19
• 1.3.1 miRNA簡(jiǎn)介15
• 1.3.2 miRNA在前列腺癌中的研究進(jìn)展15-18
• 1.3.3 miR-27a與腫瘤的轉(zhuǎn)移18-19
• 1.4 蛋白酶體抑制劑抗腫瘤的研究19-20
• 1.5 本課題的主要研究?jī)?nèi)容20
• 1.6 技術(shù)路線20-22
• 第2章 材料與方法22-34
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑22-23
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料22
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑22-23
• 2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備23-24
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法24-34
• 2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)24
• 2.3.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染24-25
• 2.3.3 質(zhì)粒提取 (大提)25-26
• 2.3.4 血液DNA提取26-27
• 2.3.5 細(xì)胞總蛋白提取以及蛋白濃度的測(cè)定27-28
• 2.3.6 Western blotting28-29
• 2.3.7 Western blotting膜的Stripping29
• 2.3.8 RNA提取29-30
• 2.3.9 miRNA的提取30-31
• 2.3.10 miRNA加尾31
• 2.3.11 RT-PCR31-32
• 2.3.12 實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)32-33
• 2.3.13 劃痕實(shí)驗(yàn)33
• 2.3.14 Transwell實(shí)驗(yàn)33-34
• 第3章 miR-27a對(duì)前列腺癌細(xì)胞的影響34-43
• 3.1 引言34
• 3.2 前列腺癌細(xì)胞中內(nèi)源性mi R-27a的表達(dá)水平檢測(cè)34-35
• 3.3 miR-27a在乳腺癌和肺腺癌中的表達(dá)水平35-37
• 3.4 miR-27a對(duì)前列腺癌細(xì)胞遷移的影響37-40
• 3.5 miR-27a對(duì)前列腺癌細(xì)胞侵襲的影響40-41
• 3.6 本章小結(jié)41-43
• 第4章 miR-27a靶基因的預(yù)測(cè)、篩選和初步鑒定43-50
• 4.1 引言43
• 4.2 miR-27a靶基因的預(yù)測(cè)與篩選鑒定43-47
• 4.3 在乳腺癌和肺癌細(xì)胞系中mi R-27a對(duì)其靶基因的蛋白水平的影響47
• 4.4 雷公藤紅素對(duì)mi R-27a的影響47-48
• 4.5 本章小結(jié)48-50
• 討論50-51
• 結(jié)論51-52
• 展望52-53
• 參考文獻(xiàn)53-61
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及其它成果61-63
• 致謝63

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