發(fā)布時間：2017-09-13 08:24

  本文關鍵詞：miR-27a對前列腺癌細胞遷移和侵襲的影響

  更多相關文章： 前列腺癌 mi R-27a 遷移 侵襲 MARCKS

【摘要】：前列腺癌是世界范圍內最為高發(fā)的男性癌癥之一,其中在發(fā)達國家更為普遍。在我國,前列腺癌是泌尿系統(tǒng)常見的惡性腫瘤。伴隨著人民生活質量的提升以及針對前列腺癌的診斷技術的逐步普及,其發(fā)病率也呈逐年上升的趨勢。盡管雄激素剝奪治療在治療之初顯示一定的療效,但大部分患者最終死于癌癥的復發(fā)和轉移,因此,探討影響前列腺癌轉移的相關因子將對前列腺癌的治療具有潛在的指導意義。mi RNAs作為一種小非編碼的RNA,是近些年的研究熱點。伴隨著研究的逐漸深入,發(fā)現mi RNAs能夠通過靶向抑制其靶基因在腫瘤的許多生物學過程中發(fā)揮重要地作用。其中由于mi R-27a在乳腺癌中異常的高表達,而被認為具有癌基因的功能,并能夠促進腫瘤細胞的轉移。而mi R-27a前列腺癌中的存在這種異常高表達的現象,因此mi R-27a可能與前列腺癌的轉移相關。蛋白酶體抑制劑是一種在腫瘤治療過程中常用的抗癌藥物,其通過對蛋白酶體的抑制進而達到抗腫瘤的作用。本課題通過RT-PCR檢測五種前列腺癌細胞中內源性mi R-27a的表達水平,證明mi R-27a的表達水平與前列腺癌細胞的轉移水平呈正相關。接著檢測mi R-27a對前列腺癌細胞遷移和侵襲能力的影響,證明mi R-27a能夠促進前列腺癌細胞的遷移和侵襲。另外,利用在線軟件對mi R-27a的靶基因進行了預測,并利用RT-PCR和Western Blot篩選出mi R-27a的一個新靶基因—具有調控細胞轉移能力的MARCKS。為以后對分子機制的進一步研究打下基礎。本課題通過一系列的實驗證明了mi R-27a能夠促進前列腺癌細胞的遷移和侵襲,并篩選出mi R-27a的一個新的靶基因MARCKS。同時雷公藤紅素與mi RNA表達圖譜分析結果顯示蛋白酶體抑制劑雷公藤紅素能夠抑制mi R-27a的表達,進一步證明雷公藤紅素能夠抑制前列腺癌的遷移和侵襲。我們的實驗結果為進一步闡明mi R-27a在前列腺癌發(fā)生和發(fā)展過程中所起的作用提供了寶貴的實驗依據。
【關鍵詞】：前列腺癌 mi R-27a 遷移 侵襲 MARCKS
【學位授予單位】：哈爾濱工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R737.25
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第1章 緒論8-22
• 1.1 課題背景及研究的目的和意義8-9
• 1.2 前列腺癌的研究進展9-14
• 1.2.1 前列腺癌的流行病學分析9-10
• 1.2.2 前列腺癌轉移的分子機制10-12
• 1.2.3 前列腺癌的診斷及治療研究進展12-14
• 1.3 miRNA的研究進展14-19
• 1.3.1 miRNA簡介15
• 1.3.2 miRNA在前列腺癌中的研究進展15-18
• 1.3.3 miR-27a與腫瘤的轉移18-19
• 1.4 蛋白酶體抑制劑抗腫瘤的研究19-20
• 1.5 本課題的主要研究內容20
• 1.6 技術路線20-22
• 第2章 材料與方法22-34
• 2.1 實驗材料與試劑22-23
• 2.1.1 實驗材料22
• 2.1.2 實驗試劑22-23
• 2.2 實驗設備23-24
• 2.3 實驗方法24-34
• 2.3.1 細胞培養(yǎng)24
• 2.3.2 細胞轉染24-25
• 2.3.3 質粒提取 (大提)25-26
• 2.3.4 血液DNA提取26-27
• 2.3.5 細胞總蛋白提取以及蛋白濃度的測定27-28
• 2.3.6 Western blotting28-29
• 2.3.7 Western blotting膜的Stripping29
• 2.3.8 RNA提取29-30
• 2.3.9 miRNA的提取30-31
• 2.3.10 miRNA加尾31
• 2.3.11 RT-PCR31-32
• 2.3.12 實時定量PCR反應32-33
• 2.3.13 劃痕實驗33
• 2.3.14 Transwell實驗33-34
• 第3章 miR-27a對前列腺癌細胞的影響34-43
• 3.1 引言34
• 3.2 前列腺癌細胞中內源性mi R-27a的表達水平檢測34-35
• 3.3 miR-27a在乳腺癌和肺腺癌中的表達水平35-37
• 3.4 miR-27a對前列腺癌細胞遷移的影響37-40
• 3.5 miR-27a對前列腺癌細胞侵襲的影響40-41
• 3.6 本章小結41-43
• 第4章 miR-27a靶基因的預測、篩選和初步鑒定43-50
• 4.1 引言43
• 4.2 miR-27a靶基因的預測與篩選鑒定43-47
• 4.3 在乳腺癌和肺癌細胞系中mi R-27a對其靶基因的蛋白水平的影響47
• 4.4 雷公藤紅素對mi R-27a的影響47-48
• 4.5 本章小結48-50
• 討論50-51
• 結論51-52
• 展望52-53
• 參考文獻53-61
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文及其它成果61-63
• 致謝63

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