本文關(guān)鍵詞：胰高血糖素樣肽-1對晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制

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【摘要】：[背景]隨著生活水平提高,飲食結(jié)構(gòu)改變,體力活動減少,糖尿病的患病率呈上升趨勢。糖尿病腎病(Diabetic nephropathy, DN)作為糖尿病的嚴(yán)重微血管并發(fā)癥,是導(dǎo)致患者死亡、殘疾的主要原因之一。在發(fā)達(dá)國家,DN已成為終末期腎病的首要原因。在我國,糖尿病腎病為引起終末期腎病的第二原因,僅次于腎小球腎炎。終末期腎病治療費(fèi)用高,給社會帶來沉重的財政負(fù)擔(dān)。因此加強(qiáng)對早期糖尿病腎病的干預(yù)和防治,對降低終末期腎病的發(fā)病率有十分重要的臨床意義和社會意義。最初研究認(rèn)為系膜外基質(zhì)增多和系膜增寬是糖尿病腎病的關(guān)鍵性病理改變,然而,這并不能完全解釋尿白蛋白排泄率以及腎小球濾過率的變化。越來越多的研究證實,足細(xì)胞的損傷和凋亡在糖尿病腎病的早期發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。足細(xì)胞,即腎小球臟層上皮細(xì)胞,是一種終末分化的多突狀細(xì)胞,為腎小球濾過屏障的主要組成部分。此外,足細(xì)胞還可以對抗毛細(xì)血管腔內(nèi)的流體靜水壓,維持毛細(xì)血管腔的開放,合成基質(zhì)成分以及清除腎小球囊腔的免疫復(fù)合物和其它大分子物質(zhì)。糖尿病患者存在糖、蛋白質(zhì)、脂肪代謝紊亂,這些代謝因素可以通過不同的途徑損害腎臟。造成DN足細(xì)胞受損的可能因素有高血糖、高血壓、高血脂、糖基化終末產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)上調(diào)等。近年來,調(diào)節(jié)RAGE受體上調(diào)的上游通路及其下游通路導(dǎo)致足細(xì)胞受損及凋亡的機(jī)制成為研究熱點。RAGE是AGEs(advanced glycation end products,糖基化終末產(chǎn)物)的特異性受體,但并非專一受體,體內(nèi)的多種氧化應(yīng)激產(chǎn)物如AOPPs(advanced oxidative protein products,晚期氧化蛋白產(chǎn)物)、脂多糖、補(bǔ)體C3a等信號分子均可以作用于RAGE受體,介導(dǎo)組織和細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。目前,AOPPs在糖尿病腎病中的致病作用逐漸引起了廣泛的關(guān)注。AOPPs是次氯酸對蛋白質(zhì)氧化修飾生成的含雙酪氨酸的蛋白交聯(lián)物,結(jié)構(gòu)和生物學(xué)作用與AGEs相似。有人研究了2型糖尿病患者血漿中AOPP的濃度與蛋白尿的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)隨著蛋白尿逐漸增多,體內(nèi)AOPP濃度也隨之逐漸增加,這提示AOPP可能參與了DN的發(fā)生發(fā)展,并且它能反映腎臟受損害的程度。另有研究表明,在糖尿病腎臟損傷早期時,若注射AOPPs,可以加重腎臟的結(jié)構(gòu)損傷和功能失調(diào)。在慢性腎病患者,血液循環(huán)中的AOPPs濃度水平與腎病進(jìn)展速度呈正相關(guān)。AOPPs還可以通過其受體RAGE通路激活NADPH氧化酶并促進(jìn)糖尿病患者腎臟炎癥反應(yīng),如誘導(dǎo)致炎細(xì)胞因子和黏附分子的產(chǎn)生。以上的研究都反映了AOPP的致炎、致氧化應(yīng)激作用,并表明了AOPPs的慢性蓄積加劇了腎臟的炎癥反應(yīng),且促進(jìn)了DN的進(jìn)展。Zhou LL等發(fā)現(xiàn)AOPPs可以導(dǎo)致小鼠來源的足細(xì)胞凋亡率明顯增加,且在一定范圍內(nèi),足細(xì)胞的凋亡率與AOPPs作用的濃度和時間呈依賴性增加,在AOPPs濃度為200ug/ml,作用時間為48小時的條件下,足細(xì)胞凋亡率發(fā)生最高。同時,體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)足細(xì)胞的凋亡與蛋白尿的出現(xiàn)同步,并且均發(fā)生在明顯的足細(xì)胞數(shù)量缺失之前,這提示足細(xì)胞的凋亡有可能是DN發(fā)病進(jìn)展的早期形式。研究還發(fā)現(xiàn),AOPPs誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡主要是通過激活NADPH氧化酶,從而增加細(xì)胞內(nèi)活性氧的產(chǎn)生,同時上調(diào)了p53、Bax、 caspase3的活性來實現(xiàn)的。在2012年,該研究團(tuán)隊又分別從體內(nèi)和體外實驗來證實AOPPs-RAGE通路介導(dǎo)了足細(xì)胞的凋亡,AOPP經(jīng)PKC途徑激活NADPH氧化酶,使細(xì)胞內(nèi)超氧化物過表達(dá),并且依次促進(jìn)p53/Bax/caspase依賴的經(jīng)典凋亡途徑誘導(dǎo)足細(xì)胞發(fā)生凋亡,反過來,通過加用RAGE抑制劑可以明顯阻斷AOPPs誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡。這些研究提示：AOPPs-RAGE通路的活化是各種生化和分子轉(zhuǎn)導(dǎo)信號的共同途徑并最終導(dǎo)致組織炎癥蔓延和細(xì)胞功能紊亂的這一假說。越來越多研究發(fā)現(xiàn)GLP-1 (glucagon-like peptide-1,胰高血糖素樣肽-1)在臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、胰島細(xì)胞、心肌細(xì)胞、視網(wǎng)膜細(xì)胞等可拮抗AGEs或AOPPs的致炎癥、致氧化應(yīng)激作用。GLP-1是由腸道L細(xì)胞分泌的一種重要的腸肽激素,可通過其受體作用于胰島β細(xì)胞促進(jìn)胰島素分泌,同時還可以促進(jìn)p細(xì)胞增殖和抑制p細(xì)胞凋亡,目前已廣泛應(yīng)用于臨床2型糖尿病的治療。研究表明,GLP-1除了可以促進(jìn)p細(xì)胞增殖、抑制p細(xì)胞凋亡,促進(jìn)胰島素分泌、抑制胰高血糖素釋放等作用外,還具有確切的心血管保護(hù)作用,此外,體內(nèi)外研究均證實,GLP-1對心臟、大腦、腎臟等器官及其細(xì)胞和組織具有保護(hù)作用。最新的研究證實,GLP-1在多種細(xì)胞中均可減弱AGEs-RAGE-氧化應(yīng)激軸,防止細(xì)胞凋亡。Ishibashi等研究發(fā)現(xiàn)GLP-1可以通過GLP-1受體直接作用于腎臟系膜細(xì)胞,激活cAMP通路而減少RAGE的表達(dá),降低活性氧簇的產(chǎn)生,最終減輕AGEs-RAGE誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對腎臟的損害。Oeseburg H等發(fā)現(xiàn)GLP-1能減輕Zucker糖尿病肥胖大鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)；此后Puddu A等在胰腺p細(xì)胞HIT-T15中也發(fā)現(xiàn)GLP-1減弱AGEs誘導(dǎo)的RAGE表達(dá),抵抗AGEs-RAGE通路AGEs誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和壞死。探討減少足細(xì)胞的早期損傷和凋亡作用因素和機(jī)制,將為臨床糖尿病腎病的早期干預(yù)提供新的思路和策略。本研究以AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡為研究模型,探討GLP-1干預(yù)對足細(xì)胞凋亡的影響及其相關(guān)機(jī)制,以期為拓展GLP-1的腎臟保護(hù)作用提供實驗基礎(chǔ)。[目的]本課題擬在以AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡為研究模型的基礎(chǔ)上,通過觀察GLP-1干預(yù)對AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響,同時檢測其對細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白及對AOPPs-RAGE通路的影響,初步探討GLP-1對AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響及分子機(jī)制。[內(nèi)容]課題分為以下兩大部分：第一部分GLP-1對AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響目的以AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡為研究模型,觀測GLP-1干預(yù)對AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響。方法1.體外制備、鑒定AOPP將20 mg/ml小鼠血清白蛋白(RSA)與等體積的40 mmol/1次氯酸混合,放置30min,制備出RSA與次氯酸摩爾比為1：140的AOPP。制備的AOPP經(jīng)由無內(nèi)毒素PBS透析24h,除去過多游離的次氯酸。用0.22μm的微孔濾膜過濾除菌后4℃保存。20 mg/ml RSA與PBS等體積混合,作為對照。以熒光分光光度計鑒定AOPP。2.培養(yǎng)足細(xì)胞增殖期：33℃孵箱培養(yǎng)。在重組小鼠γ-干擾素誘導(dǎo)下增生,待其長至約85%,使用0.05%胰蛋白酶-EDTA消化細(xì)胞后傳代。分化期：待細(xì)胞長至30-40%時,用不含IFN-y的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入37℃孵箱繼續(xù)培養(yǎng),每周換液2-3次,約培養(yǎng)10-14天。目標(biāo)：長出足突,最好長出二級足突。3.CCK8法測定細(xì)胞的活力實驗分組：200μg/mLAOPPs與不同濃度GLP-1(0、10、50、100、200 nmol/L)共同作用足細(xì)胞48h。將上述各組細(xì)胞按每孔5×104個細(xì)胞的密度種于96孔板的玻片上,待達(dá)到70%-90%融合時收集細(xì)胞。每孔加入10μl CCK-8試劑,繼續(xù)培養(yǎng)2h。在酶聯(lián)免疫檢測儀OD450nm處測量各孔的吸光值。同時設(shè)置空白孔和對照孔。細(xì)胞存活率=(測定組OD值-空白組OD值)／(對照組OD值-空白組OD值)。4. Hoechst33258熒光染色觀察各組足細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化5.流式細(xì)胞儀檢測分析足細(xì)胞凋亡率實驗共分為4組,依次為陰性對照RSA組、200μg/mLAOPPs、100 nmol/LGLP-1組、200μg/mLAOPPs+100 nmol/LGLP-1組,作用足細(xì)胞48h后,收集各組細(xì)胞,離心,棄上清,PBS液清洗二次,均勻吹散沉淀細(xì)胞,加入Annexin V和碘化丙啶(P1),避光放置15min,于流式細(xì)胞儀上樣檢測,軟件分析細(xì)胞凋亡率。統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計分析,實驗數(shù)據(jù)屬計量資料,則以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用單向方差分析(One-Way ANOVA)檢驗,兩兩比較采用LSD法。相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)分析法。P0.050,具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.研究不同濃度GLP-1 (0、10、50、100、200 nmol/L)拮抗200μg/mL AOPPs對足細(xì)胞的活性影響AOPPs組的OD值為0.10±0.02,與陰性對照組(0.35±0.02)相比,有顯著差異(P=0.000)。AOPPs+GLP-1組在10、50、100、200 nmol/L GLP-1四種不同濃度下的的OD值依次為0.11±0.01、0.16±0.02、0.21±0.03、0.23±0.02,分別與AOPPs組相比較,除了AOPPs+1 Onmol/LGLP-1組的OD值與AOPPs組相比,無顯著差異之外(P=0.932),50、100、200 nmol/L GLP-1三組OD值均顯著高于AOPPs組(AOPPs組vs.50 nmol/LGLP-1+AOPPs組,P= 0.036; vs.100、200 nmol/LGLP-1+AOPPs組,P=0.000)。AOPPs組和四個不同濃度的AOPPs+GLP-1組的OD值均顯著低于對照組(P=0.000)。經(jīng)Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),GLP-1濃度(10、50、100、200 nmol/L)與足細(xì)胞的OD值間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(r=0.901,P=0.000)。2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化藥物干預(yù)各組足細(xì)胞48h后,Hoechst33258染色,于熒光顯微鏡下觀察：可見陰性對照組足細(xì)胞細(xì)胞核染色質(zhì)呈均勻熒光；AOPPs組的細(xì)胞核固縮,核致密濃染或裂解呈碎塊狀,核染色質(zhì)邊集；AOPPs+GLP-1細(xì)胞核濃染、固縮及核碎裂的細(xì)胞較AOPPs組明顯減少。3.流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞早期凋亡率各組細(xì)胞經(jīng)藥物作用48h后,AOPPs組的足細(xì)胞總凋亡率為(26.78±2.58)%,顯著高于陰性對照組(7.27±0.55)%(P=0.000),同時亦顯著高于AOPPs+GLP-1組(14.43±0.93)%(P=0.001)。結(jié)論GLP-1在一定的濃度范圍(50～200 nmol/L)內(nèi)有拮抗AOPPs抑制足細(xì)胞活性的作用,而且可部分減少AOPPs誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡。第二部分GLP-1抑制AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的機(jī)制第一節(jié)GLP-1對AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞的氧化應(yīng)激caspase家族主要酶的影響目的通過激光共聚焦檢測足細(xì)胞氧化應(yīng)激水平,并采用酶聯(lián)反應(yīng)法檢測caspase-9、-3酶活性,探討GLP-1在足細(xì)胞發(fā)揮抗凋亡作用的可能機(jī)制。方法1.激光共聚焦檢測活性氧(ROS)在處理好的足細(xì)胞中加入DCFH2DA熒光探針(用無血清培養(yǎng)基以1：1000稀釋)對細(xì)胞內(nèi)ROS進(jìn)行熒光標(biāo)記,在37℃含5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育30min,棄去培養(yǎng)液,PBS液清洗3次,在熒光顯微鏡下觀察各組中細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度。2. ELISA法檢測細(xì)胞凋亡蛋白酶caspase-9、-3酶活性各組細(xì)胞孵育48h,消化、離心后、用細(xì)胞裂解液重懸,再加入對應(yīng)的反應(yīng)底物。37℃水浴2h后,加樣至96孔培養(yǎng)板,最后用酶聯(lián)免疫檢測儀測OD值,檢測波長為405 nm。統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計分析,實驗數(shù)據(jù)屬計量資料,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用單向方差分析(One-Way ANOVA)檢驗,兩兩比較采用LSD法。P0.050,具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.GLP-1抑制AOPPs誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS生成足細(xì)胞陰性對照組的熒光值為30.58±2.06。AOPPs作用48h后細(xì)胞的熒光值為64.60±2.91,顯著高于對照組(P=0.000)。AOPPs+GLP-1組的熒光值為48.93±2.99,顯著低于AOPPs組(P=0.000),仍高于對照組(P=0.000)。2.GLP-1對AOPPs誘導(dǎo)caspase-9、-3的活性的影響各組細(xì)胞干預(yù)48h后,AOPPs組的caspase-3、-9顯著高于各自的RSA對照組(P=0.000,0.000)和AOPPs+GLP-1組(P=0.000,0.000)。結(jié)論AOPPs作用于足細(xì)胞48h后,細(xì)胞內(nèi)ROS水平升高,凋亡蛋白酶caspase-9、-3的活性增加,GLP-1可部分減少AOPPs誘導(dǎo)的這些效應(yīng)。第二節(jié)Exendin 9-39對AOPPs誘導(dǎo)的RAGE信號通路的影響目的研究GLP-1受體抑制劑Exendin 9-39對AOPPs-RAGE信號通路及其下游Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討GLP-1減輕AOPPs所致足細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。方法1.實驗共分為4組,分別為陰性對照組、200μg/mLAOPPs、 200μg/mLAOPPs+100 nmol/LGLP-1組、200μg/mLAOPPs+100 nmol/LGLP-1組±GLP-1受體抑制劑(exentin9-39),作用足細(xì)胞48h。2.Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡(余同第一章)3.qPCR測RAGE mRNA細(xì)胞使用胰酶進(jìn)行消化,以1×105個/mL接種于培養(yǎng)皿內(nèi),培養(yǎng)24h,吸去培養(yǎng)基,干預(yù)結(jié)束后,Trizol提取總RNA,并采用紫外分光光度計進(jìn)行RNA含量的檢測,根據(jù)RT-PCR試劑盒進(jìn)行操作,使用熒光定量PCR法進(jìn)行基因相對表達(dá)量的檢測。4. Western blotting法檢測細(xì)胞RAGE、Bcl-2、Bax蛋白的表達(dá)收集各組細(xì)胞,根據(jù)蛋白提取試劑盒操作,分別提取各組細(xì)胞總蛋白及核蛋白,采用BCA法測定蛋白濃度。每組蛋白質(zhì)樣本20μg,以12% SDS-PAOPP進(jìn)行電泳,轉(zhuǎn)膜后5%脫脂奶粉封閉2h,洗膜后加入RSA-TBS稀釋的抗RAGE抗體、抗Bcl-2單克隆抗體(1：1000),抗Bax(1：2000)單克隆抗體,4℃孵育過夜,再次洗膜后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗(1：5000)雜交1h,洗膜后顯色,結(jié)果用Image J分析軟件對目的條帶進(jìn)行灰度值分析。統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(i±s)表示,采用單向方差分析(One-Way ANOVA)檢驗,兩兩比較采用LSD法。P0.050具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.不同濃度GLP-1對AOPPs上調(diào)足細(xì)胞RAGE基因和蛋白表達(dá)水平的影響按實驗分組施加不同干預(yù)后,RT-PCR測定各組足細(xì)胞的RAGE mRNA含量,AOPPs組RAGE mRNA表達(dá)量(8.59±3.10),顯著高于陰性對照組(2.17±0.63,P=0.000), AOPPs+(50、100、200 nmol/L)GLP-1組作用于足細(xì)胞48h后,RAGE mRNA含量分別為2.87±1.00,1.98±0.35,1.00±0.22,均顯著低于AOPPs組(8.59±3.10,P=0.000),50nmol/L組的RAGE mRNA含量高于100nmol/L組(P=0.022),而100 nmol/L組的RAGE mRNA亦高于200 nmol/L (P=0.001)。同樣干預(yù)后,Western blot檢測GLP-1對足細(xì)胞RAGE蛋白表達(dá)水平。AOPPs組的RAGE蛋白灰度值校正值為1.04±0.02,顯著高于RSA對照組(0.14±0.01,P=0.000)相比。AOPPs+(10、50、100、200nmol/L) GLP-1組的RAGE蛋白灰度值校正值依次為0.72±0.05,0.35±0.01,0.24±0.01,均顯著低于AOPPs組(P=0.000)。50 nmol/L組的RAGE蛋白表達(dá)量高于100 nmol/L組(P=0.022),而100 nmol/L組的RAGE蛋白表達(dá)量亦高于200 nmol/L (P=0.001).2. exendin9-39對GLP-1拮抗AOPPs誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響各組細(xì)胞經(jīng)干預(yù)作用48h后,AOPPs組的總凋亡細(xì)胞百分率為(27.57±1.11)%,顯著高于對照組(6.55±0.31)%(P=0.000),同時亦顯著高于AOPPs+GLP-1組(9.53±0.64)%(P=0.002)。exendin9-39預(yù)處理組的凋亡率為(18.41±1.16)%,顯著高于AOPPs+GLP-1組(P=0.000)。3. exendin9-39對GLP-1與AOPPs干預(yù)下足細(xì)胞的Bcl-2、Bax、RAGE蛋白表達(dá)的影響各組細(xì)胞經(jīng)作用48h后,AOPPs組Bax、RAGE蛋白表達(dá)量顯著高于對照組(P=0.006,0.000), Bcl-2蛋白表達(dá)低于對照組(P=0.000),故Bcl-2/Bax比值顯著低于對照組(P=0.000)。AOPPs+GLP-1組足細(xì)胞的Bcl-2蛋白表達(dá)水平明顯高于AOPPs單獨(dú)處理組(P=0.001),而Bax和RAGE水平顯著低于AOPPs組(P=0.014,0.002),exendin9-39減弱了GLP-1抑制Bax和RAGE升高的作用(P=0.004,0.000 vs. AOPPs+GLP-1組),同時削弱了GLP-1促進(jìn)Bcl-2蛋白表達(dá)增加的作用(vs. AOPPs+GLP-1組,P=0.001)。結(jié)論RAGE受體的下調(diào)可能參與了GLP-1改善AOPPs誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡作用；GLP-1可以增加AOPPs誘導(dǎo)的足細(xì)胞凋亡過程中抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá),而減少促凋亡蛋白Bax的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：胰高血糖素樣肽-1 晚期氧化蛋白產(chǎn)物 足細(xì)胞 凋亡
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R587.2;R692.9
【目錄】：

• 摘要3-12
• ABSTRACT12-22
• 前言22-31
• 參考文獻(xiàn)27-31
• 第一部分 胰高血糖素樣肽-1對晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的影響31-48
• 1. 材料與方法32-38
• 2. 結(jié)果38-42
• 3. 討論42-44
• 4. 小結(jié)44
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 第二部分 GLP-1抑制AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡的機(jī)制48-77
• 第一節(jié) GLP-1對AOPPs誘導(dǎo)足細(xì)胞的氧化應(yīng)激和caspase家族主要酶的影響48-58
• 1. 材料與方法48-49
• 2. 實驗方法49-51
• 3. 結(jié)果51-52
• 4. 討論52-55
• 5. 小結(jié)55
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 第二節(jié) GLP-1對AOPPs誘導(dǎo)的RAGE信號通路的影響58-77
• 1. 材料與方法58-64
• 2. 結(jié)果64-72
• 3. 討論72-74
• 4. 小結(jié)74
• 參考文獻(xiàn)74-77
• 結(jié)論77-78
• 中英文縮略詞表78-79
• 攻讀學(xué)位期間成果79-80
• 致謝80-81

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 田景琰;李鳳英;劉峗;龍紅梅;李文毅;王曉;張宏利;李果;羅敏;;ACEI和ARB治療改善糖尿病大鼠胰島素分泌功能的研究[J];放射免疫學(xué)雜志;2009年05期

2 魯辛;蔡德鴻;;胰島局部腎素-血管緊張素系統(tǒng)在糖尿病及胰島移植中的作用[J];廣東醫(yī)學(xué);2006年11期

3 劉敏;張樺;陳宏;魯辛;孫嘉;張振;李明;蔡德鴻;;血管緊張素Ⅱ?qū)﹄x體人胰島細(xì)胞內(nèi)游離Ca~(2+)及cAMP的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2007年09期

4 劉敏;蔡德鴻;;血管緊張素Ⅱ?qū)σ葝uβ細(xì)胞功能及胰島素敏感性的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2008年01期

5 米彥;姚陳果;李成祥;孫才新;唐均英;楊方黎;;ns脈沖電場誘導(dǎo)裸小鼠皮下人黑色素移植瘤凋亡[J];高電壓技術(shù);2009年09期

6 張瑛;夏學(xué)穎;胡麗莉;關(guān)小倩;鄒和群;;晚期糖基化終產(chǎn)物對脂肪細(xì)胞產(chǎn)生活性氧的誘導(dǎo)作用及其機(jī)制[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年01期

7 張楊;王朝英;陳偉慶;;缺血性腦卒中患者血漿腎素水平與阿司匹林所致消化道出血的關(guān)系[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年29期

8 陳媛清;崔森;;BCL-2蛋白家族與慢性高原病造血細(xì)胞凋亡變化[J];高原醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

9 高俊苓;;血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑治療心力衰竭的研究進(jìn)展[J];河北醫(yī)藥;2008年07期

10 盧朝暉,王敏,秦詠梅;細(xì)胞凋亡與皮膚創(chuàng)傷愈合及病理性瘢痕形成[J];中國麻風(fēng)皮膚病雜志;2004年06期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝靖;紫薯素對~(60)Coγ輻射導(dǎo)致的小鼠胸腺細(xì)胞損傷的抑制作用及機(jī)制[D];中國海洋大學(xué);2011年

2 肖行遠(yuǎn);二甲雙胍通過抑制IGF-1軸下調(diào)良性前列腺上皮細(xì)胞生長活性的研究[D];華中科技大學(xué);2012年

3 朱炬;大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)元損傷與caspase-9及其相關(guān)因素的表達(dá)及調(diào)節(jié)的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2003年

4 潘東寧;肺癌相關(guān)新基因CT120A/B的功能研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

5 宋冬晶;針對Fas基因的RNAi對神經(jīng)細(xì)胞缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2006年

6 李志琴;Casper在細(xì)胞凋亡和NF-κB活化中的作用機(jī)制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

7 李智博;胡桃楸活性成分分離解析及抗腫瘤作用的研究[D];大連理工大學(xué);2008年

8 梁杏歡;體外高糖誘導(dǎo)SD大鼠胰島細(xì)胞凋亡與厄貝沙坦的干預(yù)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2008年

9 米彥;納秒脈沖電場誘導(dǎo)腫瘤凋亡的窗口效應(yīng)與實驗研究[D];重慶大學(xué);2009年

10 羅沛華;基于RARα靶點的維甲酸誘導(dǎo)細(xì)胞分化和凋亡作用機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉養(yǎng)歲;雷公藤甲素對肝癌細(xì)胞化療敏感性的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

2 趙慧玲;中國鹵蟲API5在早期胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)及其功能研究[D];遼寧師范大學(xué);2011年

3 徐秀利;5-FU聯(lián)合雷公藤甲素治療胰腺癌作用的體外實驗研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

4 糜公仆;2型糖尿病患者血管緊張素Ⅱ水平與脂聯(lián)素、胰島β細(xì)胞分泌功能的關(guān)系探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

5 史宏偉;不同磁場強(qiáng)度的硅膠包埋磁片對缺血性眼病的影響[D];延邊大學(xué);2011年

6 許玉馨;TmSm對乳腺癌化療藥物的增敏與耐藥細(xì)胞的作用及其相關(guān)機(jī)制初探[D];華東理工大學(xué);2011年

7 李銳莉;CuSO_4L_(51)抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞生長及其機(jī)制研究[D];鄭州大學(xué);2012年

8 李曉武;鴉膽子油乳對膀胱癌細(xì)胞系BIU-87增殖的影響及其機(jī)制的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

9 趙志偉;大鼠肢體缺血—再灌注后海馬Fas蛋白表達(dá)的變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

10 張夔鳴;腦缺氧損傷后細(xì)胞色素C、Bcl-2表達(dá)的實驗研究[D];四川大學(xué);2004年

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本文編號：809186