本文關(guān)鍵詞：腎細(xì)胞癌RASSF2A基因啟動子甲基化狀態(tài)及轉(zhuǎn)錄表達(dá)的研究

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【摘要】：目的:腎細(xì)胞癌(Renal Cell Carcinoma,RCC)是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅我國人群的健康。隨著對腫瘤病因研究的不斷深入,發(fā)現(xiàn)表觀遺傳學(xué)改變在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起著非常重要的作用。表觀遺傳學(xué)研究主要包括DNA甲基化、組蛋白修飾、染色質(zhì)重塑、RNA干擾、遺傳印記及隨機染色體(X)失活,目前研究比較深入的就是抑癌基因DNA甲基化與腫瘤之間關(guān)系。有文獻(xiàn)已經(jīng)證實RASSF2A基因啟動子甲基化是導(dǎo)致鼻咽癌、乳腺癌等惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的原因之一。而RASSF2A的甲基化是否與RCC有關(guān)則未見報道。本研究通過檢測RCC組織、癌旁及正常組織中RASSF2A基因啟動子的甲基化狀態(tài)及其m RNA的表達(dá)情況,初步探討RASSF2A基因在RCC發(fā)生發(fā)展中的作用,為RCC的早期診斷和治療提供理論依據(jù)。方法:本研究擬采用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)(Methylation-Specific PCR,MSP)來檢測60例RCC組織、癌旁及正常組織中RASSF2A基因的啟動子甲基化狀態(tài);采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcriptase-PCR,RT-PCR)來檢測60例RCC組織、癌旁及正常組織中RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量。并運用統(tǒng)計軟件SPSS20.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理,分析RASSF2A基因與臨床參數(shù)之間的關(guān)系。結(jié)果:1在RCC組織、癌旁及正常組織中RASSF2A基因有三種不同的甲基化狀態(tài):完全非甲基化、不完全甲基化、完全甲基化。2 60例RCC組織、癌旁及正常組織標(biāo)本中其甲基化率分別為36.7%(22/60),13.3%(8/60),11.7%(7/60),經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,RCC組織RASSF2A基因啟動子甲基化率明顯高于癌旁及正常組織,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=8.711 P=0.003,χ2=10.231 P=0.001);RASSF2A基因啟動子甲基化率在癌旁組織和正常組織中差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.076 P=0.783)。60例RCC組織標(biāo)本中,RASSF2A基因啟動子甲基化率在性別(χ2=0.191 P=0.662)、年齡(χ2=0.463 P=0.496)、腫瘤大小(χ2=0.301 P=0.583)、Fuhrman核分級(χ2=0.935 P=0.621)四方面無統(tǒng)計學(xué)差異(P值均大于0.05);在吸煙(χ2=6.962 P=0.008)、臨床分期(Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期)(P=0.003)兩方面有統(tǒng)計學(xué)差異(P值均小于0.05)。3 60例RCC組織、癌旁及正常組織標(biāo)本中RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量分別為0.35±0.07、0.55±0.09、0.59±0.09,采用單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量在RCC組織中明顯低于癌旁及正常組織,其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000,P=0.000);癌旁組織和正常組織中RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.247)。60例RCC組織標(biāo)本中,RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量在性別(t=0.624,P=0.538)、年齡(t=-0.392,P=0.698)、腫瘤大小(t=-0.328,P=0.745)三方面無統(tǒng)計學(xué)差異(P值均大于0.05);在吸煙(t=-3.186,P=0.002)、臨床分期(Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期)(t=-3.592,P=0.001)兩方面有統(tǒng)計學(xué)差異(P值小于0.05)。4在RCC組織中,甲基化陽性患者RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量為0.37±0.07,甲基化陰性患者RASSF2A基因m RNA的相對表達(dá)量0.57±0.11,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=-5.605,P=0.000)。結(jié)論:1 RASSF2A啟動子區(qū)高甲基化是RCC的頻發(fā)事件,抑癌基因RASSF2A的失活可能是導(dǎo)致RCC的重要原因之一。2 RASSF2A基因m RNA在RCC組織中的相對表達(dá)量明顯低于癌旁組織和正常組織,提示RASSF2A基因m RNA表達(dá)下降可能參與了RCC的發(fā)生、發(fā)展過程。3在RCC組織中RASSF2A基因m RNA在甲基化陽性病例中的相對表達(dá)量低于甲基化陰性病例中m RNA的相對表達(dá)量。研究結(jié)果提示RASSF2A基因啟動子區(qū)的高甲基化可能是導(dǎo)致其轉(zhuǎn)錄沉默的重要原因。
【關(guān)鍵詞】：腎細(xì)胞癌 RASSF2A 啟動子 甲基化 基因表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-20
• 結(jié)果20-22
• 附圖22-24
• 附表24-27
• 討論27-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-35
• 綜述 表觀遺傳學(xué)在腫瘤中的研究進(jìn)展35-45
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 致謝45-46
• 個人簡歷46

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 王瑞嫻;徐建紅;;基因組DNA甲基化及組蛋白甲基化[J];遺傳;2014年03期

2 王慧涵;張國君;姚鯤;楊威;廖愛軍;趙成海;劉卓剛;;SFRP5在白血病細(xì)胞中基因甲基化狀態(tài)及蛋白表達(dá)分析[J];中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2012年12期

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本文編號：805527