發(fā)布時間：2017-08-29 18:39

  本文關鍵詞：骨髓間充質干細胞修復大鼠體外循環(huán)急性腎損傷的研究

  更多相關文章： 間充質干細胞 體外循環(huán) 急性腎損傷 大鼠

【摘要】：目的：探討骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells, MSC)對大鼠體外循環(huán)(cardiopulmonary bypass, CPB)急性腎損傷(acute kidney injury, AKI)的保護作用及機制方法1、采用密度梯度離心法、貼壁分離法原代分離、培養(yǎng)、純化綠色熒光蛋白轉基因(enhanced green fluorescent protein transgenic, eGFP)大鼠骨髓MSC。2、成年雄性SD大鼠72只,體重(288.8±26.1)g,隨機分為：sham組、CPB組和CPB+MSC組。sham組穿刺但不實施體外循環(huán)；其余兩組建立CPB模型,CPB+MSC組于轉流結束后經(jīng)右側頸外靜脈注射1.5*106 MSCs。于術后6h、24h、48h取血清及腎標本。檢測血清Cr、IL-10、IL-6及腎組織VEGF、IGF-1的含量,并切片觀察腎組織損傷及MSC的歸巢。結果1、成功分離、提取MSC,培養(yǎng)至第3代時形成漩渦狀、紡錘形、形態(tài)相對均一的貼壁細胞,熒光顯微鏡下可觀察大片具有綠色熒光表達的MSC,流式細胞檢測CD29、CD90、CD45、CD34的表達率分別為99.74%、98.01%、0.16%、14.09%。2、建立大鼠CPB-AKI模型(成功率90%)。①比較各組血清Cr、IL-6水平發(fā)現(xiàn),M組、C組較S組顯著升高(P0.05),且M組在各時間點對應水平低于C組(P0.05)。而各組血清IL-10比較發(fā)現(xiàn),M組較C組顯著升高(P0.05),同時M組在各時間點對應水平高于C組(P0.05)。②比較腎組織VEGF、IGF-1的表達發(fā)現(xiàn),M組水平較C組增高。③觀察各組腎臟病理切片顯示,M組較C組損傷減輕。冰凍切片觀察eGFP-MSC大量積聚于肺組織中最多,腎臟幾乎未觀察到歸巢。結論1、右側頸外靜脈及雙側股動脈插管,能夠成功在體重224-320g雄性SD大鼠上建立CPB-AKI模型(成功率90%)2、MSC能夠對CPB-AKI的產(chǎn)生保護作用,可能是通過旁分泌具有抗炎及細胞保護作用的活性因子,完成對機體免疫系統(tǒng)的調節(jié)及損傷組織的修復。
【關鍵詞】：間充質干細胞 體外循環(huán) 急性腎損傷 大鼠
【學位授予單位】：南京大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R692
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 中英文對照縮寫9-11
• 前言11-13
• 文獻綜述 骨髓間充質干細胞治療急性腎損傷的機制探討13-20
• 第一章 資料與方法20-23
• 1 實驗動物與材料20
• 2 eGFP大鼠骨髓MSC的分離、培養(yǎng)和鑒定20
• 3 實驗動物分組及建立CPB模型20-21
• 4 治療處理21
• 5 標本收集及檢測21-22
• 6 統(tǒng)計學分析22-23
• 第二章 結果23-27
• 1 eGFP-MSC的形態(tài)23
• 2 eGFP-MSC的鑒定23-24
• 3 血清Cr、IL-6、IL-10的水平24
• 4 腎組織VEGF、IGF-1的表達24-25
• 5 腎組織病理改變25-26
• 6 eGFP-MSC的定位26-27
• 第三章 討論27-29
• 第四章 結論29-30
• 參考文獻30-40
• 致謝40-41
• 作者簡介41
• 研究生期間發(fā)表的論文41-42

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本文編號：754851