本文關(guān)鍵詞：α1-腎上腺素在前列腺Cajal間質(zhì)細(xì)胞上的表達(dá)及意義

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【摘要】：目的:通過體外分離豚鼠前列腺、切片、體外分離培養(yǎng)前列腺Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICCs)及雙標(biāo)免疫熒光從組織學(xué)及細(xì)胞學(xué)角度觀察α1腎上腺素受體在前列腺上的表達(dá),探究α1-腎上腺素受體在豚鼠前列腺ICCs上的表達(dá)及其生理意義,為深入研究前列腺增生癥、慢性前列腺炎及早泄等與前列腺平滑肌功能紊亂的相關(guān)疾病奠定基礎(chǔ)。方法:本課題以成年豚鼠前列腺ICC為研究對象。制作豚鼠前列腺組織冰凍切片及體外培養(yǎng)的豚鼠前列腺細(xì)胞進(jìn)行雙重免疫熒光染色,使用酪氨酸激酶受體(c-Kit)作為ICCs的標(biāo)記物,α肌動(dòng)蛋白(α-actin)標(biāo)記平滑肌細(xì)胞,分別進(jìn)行c-Kit與α1-腎上腺素受體、α-actin與α1-腎上腺素受體配對的免疫熒光雙標(biāo)記染色。結(jié)果:豚鼠前列腺組織經(jīng)切片、雙標(biāo)免疫熒光染色后,c-Kit染色陽性的ICCs分布于平滑肌之間,c-Kit與α1-腎上腺素受體抗體在ICCs上均染色陽性,平滑肌上α1-腎上腺素受體染色陽性。且ICCs上α1-腎上腺素受體染色明顯較平滑肌上α1-腎上腺素受體染色深。體外分離培養(yǎng)的前列腺ICCs呈梭形或星形,分布于平滑肌中,細(xì)胞相對于平滑肌細(xì)胞較小,ICCs借細(xì)胞兩側(cè)突起與周邊ICC或SMC連接在一起呈網(wǎng)狀分布。體外分離培養(yǎng)的豚鼠前列腺ICCs,染色后置于激光共聚焦顯微鏡下觀察,ICCs上同時(shí)存在c-Kit受體與α1-腎上腺素受體。此外,體外分離培養(yǎng)的前列腺ICCs占混合細(xì)胞培養(yǎng)的少數(shù),絕大多數(shù)細(xì)胞為前列腺平滑肌細(xì)胞,其細(xì)胞相對于ICCs較大,其形態(tài)多樣,倒置顯微鏡下很容易與ICCs細(xì)胞鑒別,細(xì)胞多聚集在一起呈團(tuán)塊狀。結(jié)論:(1)前列腺ICCs上確實(shí)存在α1-腎上腺素受體。(2)α1-腎上腺素受體在前列腺ICCs上的表達(dá)明顯高于在前列腺平滑肌上的表達(dá)。(3)前列腺ICCs與前列腺平滑肌形成“神經(jīng)信號-ICCs-平滑肌”這一信號傳遞系統(tǒng)可能參與射精的調(diào)節(jié)過程,具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。(4)體外成功分離培養(yǎng)出3種不同形態(tài)的前列腺ICCs,可能為前列腺ICCs的3種不同亞型,具體情況尚有待研究。
【關(guān)鍵詞】：Cajal間質(zhì)細(xì)胞 α1-腎上腺素受體 交感神經(jīng) 前列腺 豚鼠
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R697.3
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 英文縮略詞表8-9
• 前言9-11
• 材料與方法11-15
• 1. 一般材料11
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求及來源11
• 1.2 實(shí)驗(yàn)所需試劑及來源11
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器11
• 2. 方法11-15
• 2.1 豚鼠前列腺標(biāo)本取材11-12
• 2.2 組織免疫熒光標(biāo)記鑒定ICCs12
• 2.3 組織免疫熒光雙重標(biāo)記12
• 2.4 豚鼠前列腺ICCs體外培養(yǎng)12-13
• 2.5 細(xì)胞免疫熒標(biāo)記鑒定體外分離培養(yǎng)ICCs13
• 2.6 細(xì)胞免疫熒光雙重標(biāo)記前列腺ICCs13-14
• 2.7 細(xì)胞免疫熒光雙重標(biāo)記前列腺平滑肌14-15
• 結(jié)果15-18
• 1. 組織水平結(jié)果15-16
• 1.1 組織免疫熒光標(biāo)記鑒定ICCs15
• 1.2 組織免疫熒光雙重標(biāo)記15-16
• 2. 體外分離培養(yǎng)的前列腺ICCs16
• 3. 細(xì)胞學(xué)免疫熒光16-18
• 3.1 體外分離培養(yǎng)ICCs免疫熒光鑒定16-17
• 3.2 體外分離培養(yǎng)ICCs免疫熒光雙重標(biāo)記17
• 3.3 體外分離培養(yǎng)豚鼠前列腺平滑肌免疫熒光雙標(biāo)染色17-18
• 討論18-22
• 結(jié)論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-26
• 文獻(xiàn)綜述26-32
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 致謝32-33
• 附錄33-36
• 作者簡介36-37
• 導(dǎo)師評閱表37

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