發(fā)布時(shí)間：2017-08-15 03:32

  本文關(guān)鍵詞：S1P1-3在雄性去勢(shì)大鼠陰莖海綿體組織中的表達(dá)

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【摘要】：目的:雄激素與勃起功能障礙(ED)之間有密切聯(lián)系。雄激素缺乏并發(fā)ED可能與低雄激素狀態(tài)下陰莖海綿體組織內(nèi)皮功能障礙、eNOS活性及表達(dá)下調(diào)以及RhoA/Rho激酶信號(hào)通路上調(diào)有關(guān),但雄激素調(diào)節(jié)上述兩條通路的具體機(jī)制目前并不清楚。而eNOS、RhoA/Rho激酶的調(diào)控與1磷酸鞘氨醇(S1P)有關(guān),S1P作為細(xì)胞外的一個(gè)配體,與相應(yīng)的細(xì)胞膜受體-S1P受體結(jié)合后觸發(fā)相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo),S1P與不同的S1P受體結(jié)合可發(fā)揮不同的生物學(xué)效應(yīng)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),高血壓可以通過抑制陰莖海綿體內(nèi)S1P1表達(dá)抑制eNOS/NO/cGMP信號(hào)通路,上調(diào)S1P2、S1P3表達(dá)激活Rho A/Rho激酶信號(hào)通路引起ED。但陰莖海綿體中S1P1-3的表達(dá)與雄激素的關(guān)系目前尚不清楚。本研究比較S1P-3在去勢(shì)大鼠、對(duì)照組及去勢(shì)后睪酮替代治療組大鼠陰莖海綿體組織中的表達(dá),探討S1P-3與低雄激素狀態(tài)ED的關(guān)系及對(duì)勃起功能的影響。對(duì)于改善低雄激素狀態(tài)引起的ED(尤其是不宜采用雄激素替代治療,如前列腺癌等)患者具有重要的意義。方法:8周齡健康雄性SD大鼠18只,隨機(jī)分為去勢(shì)組、對(duì)照組及睪酮替代組各6只,4周后稱重,麻醉前首先測(cè)定大鼠體重,用1%戊巴比妥鈉40mg/kg腹腔內(nèi)注射麻醉各組大鼠,仔細(xì)分離并顯露出大鼠左側(cè)頸總動(dòng)脈,將充滿肝素生理鹽水的26G針頭穿刺插入頸總動(dòng)脈,穿刺成功后將其連接于壓力換能器,連續(xù)監(jiān)測(cè)大鼠頸動(dòng)脈平均動(dòng)脈壓(MAP)的變化。用充滿肝素生理鹽水的24 G針頭穿刺插入大鼠陰莖海綿體內(nèi)固定并連接到壓力換能器,測(cè)定大鼠陰莖海綿體內(nèi)壓(ICP)。于大鼠下腹部沿腹正中線切開進(jìn)入腹腔,在前列腺兩側(cè)葉的后方找到星狀盆神經(jīng)節(jié)作為電刺激點(diǎn),用不同強(qiáng)度的電刺激刺激盆神經(jīng)節(jié)(刺激波幅為5ms,刺激強(qiáng)度分別為3v5v,刺激頻率為12hz,持續(xù)刺激時(shí)間35s,刺激時(shí)間間隔3min)。采用壓力換能器連續(xù)記錄大鼠icpmax及map值。大鼠勃起功能測(cè)定完畢后采血,分別測(cè)定三組大鼠血清睪酮水平及血清s1p水平。取陰莖海綿體標(biāo)本,將陰莖海綿體標(biāo)本分為兩部分,一部分保存于-80℃超低溫冰箱,以供western-blot實(shí)驗(yàn)分析,另一部分用于免疫組化分析。免疫組化和western-blot印跡方法分別檢測(cè)s1p1-3、enos、p-enos、rock1及rock2在大鼠陰莖海綿體組織中的表達(dá)。結(jié)果:血清睪酮水平:去勢(shì)組(11.79±1.18ng/dl)較對(duì)照組(461.65±29.52ng/dl)和替代組(456.77±38.12ng/dl)顯著降低(p0.01),而替代組與對(duì)照組血清睪酮無顯著差異。靜息狀態(tài)(0v電壓)時(shí)去勢(shì)組icpmax/map比值(0.088±0.014)較對(duì)照組(0.155±0.011)和替代組(0.153±0.012)顯著降低(p0.01),而對(duì)照組與替代組無顯著差異;3v電刺激盆神經(jīng)節(jié)后去勢(shì)組icpmax/map比值(0.323±0.014)較對(duì)照組(0.711±0.010)及替代組(0.697±0.017)顯著降低(p0.01),而對(duì)照組與替代組無顯著差異;5v電刺激盆神經(jīng)節(jié)后去勢(shì)組icpmax/map比值(0.432±0.012)較對(duì)照組(0.819±0.024)及替代組(0.763±0.027)顯著降低(p0.01),而對(duì)照組與替代組無顯著差異。血清s1p水平:去勢(shì)組(6.682±0.289ng/ml)與對(duì)照組(6.642±0.216ng/ml)及替代組(6.897±0.165ng/ml)之間無顯著差異。免疫組化結(jié)果顯示s1p1主要表達(dá)在血管內(nèi)皮細(xì)胞,s1p2主要表達(dá)在海綿體平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞,s1p3主要表達(dá)在海綿體平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞胞,enos、p-enos主要表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞和海綿竇腔,rock1、rock2主要表達(dá)于海綿體血管平滑肌細(xì)胞胞質(zhì)中。免疫組化數(shù)據(jù)分析采用積分光密度值(IOD)表示,結(jié)果顯示S1P1、eNOS、P-eNOS在去勢(shì)組的表達(dá)顯著低于對(duì)照組和替代組(P0.01),S1P2、S1P3、ROCK1及ROCK2在去勢(shì)組的表達(dá)顯著高于對(duì)照組對(duì)照組和替代組(P0.01)。Western blot印跡顯示S1P1、eNOS、P-eNOS在去勢(shì)組大鼠陰莖海綿體中表達(dá)量的相對(duì)光密度值較對(duì)照組和替代組顯著降低(P0.01),S1P2、S1P3、ROCK1及ROCK2在去勢(shì)組大鼠陰莖海綿體中表達(dá)量的相對(duì)光密度值較對(duì)照組和替代組顯著升高(P0.01)。血清睪酮水平與S1P1/GAPDH吸光度比值呈正相關(guān)(P0.05);血清睪酮水平與S1P2、S1P3/GAPDH吸光度比值呈負(fù)相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:雄激素缺乏導(dǎo)致大鼠ICPmax/MAP顯著降低,與陰莖海綿體內(nèi)S1P1表達(dá)下調(diào)、抑制eNOS/NO/cGMP信號(hào)通路,S1P2、S1P3表達(dá)升高、激活Rho A/Rho激酶信號(hào)通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：1磷酸鞘氨醇 1磷酸鞘氨醇受體1-3 Rho激酶 內(nèi)皮源性一氧化氮合酶 去勢(shì) 勃起功能障礙 大鼠
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R698.1
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-12
• 前言12-17
• 材料與方法17-24
• 結(jié)果24-32
• 討論32-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 英漢縮略詞對(duì)照表42-43
• 致謝43-44
• 淫羊藿在勃起功能障礙治療中的研究進(jìn)展44-55
• 參考文獻(xiàn)50-55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 左川;黃一鳴;姜睿;楊海帆;程波;陳楓;;雄激素缺乏對(duì)大鼠陰莖海綿體H2S信號(hào)通路的影響[J];中華男科學(xué)雜志;2014年07期

2 莊t，

本文編號(hào)：676096