天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當前位置:主頁 > 醫(yī)學論文 > 泌尿論文 >

IGF-1對腎小管上皮細胞轉分化作用機制的影響

發(fā)布時間:2017-07-31 13:33

  本文關鍵詞:IGF-1對腎小管上皮細胞轉分化作用機制的影響


  更多相關文章: 胰島素樣生長因子 腎小管上皮細胞 轉分化 PI3K/Akt


【摘要】:目的:探討PI3K/Akt通路在IGF-1誘導的人腎小管上皮細胞(human kidney proximal tubular epithelial cell line,HKCs)間質(zhì)轉分化過程中的作用和意義。方法:用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)液將HKCs細胞培養(yǎng)于6孔板或培養(yǎng)瓶中,待細胞生長至亞融合狀態(tài),吸棄培養(yǎng)基,換成無血清(free serum medium,FSM)的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h,然后分成:①正常對照組:用10%FBS的DMEM/F12培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞;②IGF-1(50ug/L)組:用50ug/L IGF-1培養(yǎng)細胞;③IGF-1+PI3K/Akt抑制劑LY294002組:用50ug/L IGF-1+15umol/L LY294002培養(yǎng)細胞;按以上分組分別培養(yǎng)24h、48h和72h。免疫印跡法(western blotting)方法檢測a-平滑肌肌動蛋白(a-SMA)、總Akt(t-Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表達。再按上述方法將細胞分為:①正常對照組;②IGF-1(50ug/L)組;③IGF-1+不同濃度的LY294002(5、15、20umol/L)組,共同培養(yǎng)48h。倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化;聚合酶鏈式反應(RT-PCR)方法檢測a-SMA和p-Akt m RNA表達水平。DAPI染色法檢測HKCs細胞凋亡的情況。結果:(1)WB結果顯示:隨著IGF-1(50ug/L)作用時間的延長,a-SMA蛋白表達上調(diào)(p0.05),Akt蛋白表達上調(diào)(p0.05),p-Akt蛋白表達上調(diào)(p0.05),且作用呈時間依賴性。(2)與IGF-1(50ug/L)單獨作用于HKCs細胞相比,IGF-1(50ug/L)和LY294002(15umol/L)共同作用后,a-SMA蛋白表達下調(diào)(p0.05),Akt蛋白表達下調(diào)(p0.05),p-Akt蛋白表達下調(diào)(p0.05),且作用呈時間依賴性。(3)IGF-1(50ug/L)作用48h后,RT-PCR結果顯示:a-SMA m RNA表達明顯增加(p0.05),p-Akt m RNA表達明顯增加(p0.05)。(4)不同濃度的LY294002均能使p-Akt m RNA表達減少(p0.05),a-SMA m RNA表達減少(p0.05),且作用呈濃度依賴性。(5)相差顯微鏡結果顯示:正常對照組細胞呈卵石樣緊密排列生長;IGF-1刺激使HKCs細胞形態(tài)顯著變化,由橢圓形變?yōu)樗笮?同時促進HKCs細胞增殖;LY294002可阻礙這種變化。(6)DAPI結果顯示:IGF-1能夠抑制細胞凋亡,促進細胞增殖,而加入不同的LY294002后卻表現(xiàn)出典型的凋亡形態(tài)特征,且呈濃度和時間依賴性。結論:(1)IGF-1能誘導HKCs細胞中PI3K/Akt激活,從而促進腎小管上皮細胞轉分化,參與糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展;(2)PI3K/Akt通路參與IGF-1誘導的轉分化過程,PI3K/Akt是IGF-1誘導EMT信號轉導通路中的下游因子之一;(3)PI3K/Akt特異性抑制劑LY294002可抑制IGF-1誘導的轉分化作用,提示LY294002可能通過抗纖維化作用保護腎臟。
【關鍵詞】:胰島素樣生長因子 腎小管上皮細胞 轉分化 PI3K/Akt
【學位授予單位】:福建醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R587.2;R692.9
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • ABSTRACT6-9
  • 常用英文縮略詞表9-10
  • 前言10-15
  • 材料與方法15-24
  • 結果24-33
  • 討論33-38
  • 結論38-39
  • 參考文獻39-43
  • 綜述43-52
  • 參考文獻49-52
  • 致謝52

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 王佳賀;闞亮;舒林華;楊艷敏;何平;;PI3K/AKT途徑在大腸埃希菌誘導U937細胞凋亡中的作用[J];中國組織化學與細胞化學雜志;2009年04期

2 張詠言,王學清,劉聰,潘莉莉,李強;2型糖尿病血胰島素樣生長因子-1水平與糖尿病腎病的關系[J];臨床薈萃;2000年11期

3 劉紅燕,王麗芬,勞英蘭,黃珍萍,顏曉東,林碧,黃忠,余勁明,黃瑩;胰島素樣生長因子-1和生長激素與2型糖尿病腎病的關系[J];臨床薈萃;2001年09期

4 凌宏艷;胡弼;奉水東;廖端芳;文格波;;表觀遺傳調(diào)控在糖尿病及其并發(fā)癥中的作用[J];生物化學與生物物理進展;2012年01期

,

本文編號:599419

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/mjlw/599419.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權申明:資料由用戶0ca97***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
亚洲欧美日韩国产自拍| 91偷拍裸体一区二区三区| 国产午夜福利片在线观看| 深夜视频成人在线观看| 欧美不雅视频午夜福利| 在线观看中文字幕91| 精品亚洲一区二区三区w竹菊| 中文字幕av诱惑一区二区| 欧美激情一区=区三区| 国产又粗又长又爽又猛的视频| 视频一区二区 国产精品| 色老汉在线视频免费亚欧| 国内九一激情白浆发布| 欧美成人国产精品高清| 激情亚洲内射一区二区三区| 国产成人精品一区在线观看| 欧美日韩校园春色激情偷拍| 中文字幕一区二区三区中文| 真实偷拍一区二区免费视频| 最新日韩精品一推荐日韩精品| 国产av一二三区在线观看| 免费午夜福利不卡片在线 视频| 国产一区欧美一区日韩一区| 欧美日韩精品一区二区三区不卡| 成人国产激情福利久久| 午夜久久精品福利视频| 国产不卡最新在线视频| 日韩欧美一区二区黄色| 99日韩在线视频精品免费| 日本道播放一区二区三区| 日本精品啪啪一区二区三区| 国产高清一区二区不卡| 中文字幕一区二区久久综合| 人妻熟女中文字幕在线| 国内精品伊人久久久av高清 | 国产性情片一区二区三区| 精品视频一区二区三区不卡| 日韩特级黄片免费观看| 欧美久久一区二区精品| 亚洲欧美精品伊人久久| 一本色道久久综合狠狠躁|