本文關(guān)鍵詞：攜抗基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體脂質(zhì)微泡在評(píng)價(jià)兔睪丸不同程度缺血再灌注損傷中的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的比較不同程度缺血及不同復(fù)灌注時(shí)間引起的睪丸微血管的損傷改變,研究攜抗基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體脂質(zhì)微泡(TMB-9)在兔睪丸不同程度缺血再灌注損傷中的評(píng)價(jià),尋求一種更能客觀、直接評(píng)價(jià)睪丸微血管損傷的無(wú)創(chuàng)方法。方法制備普通脂質(zhì)微泡(MB)及攜抗基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體脂質(zhì)微泡(TMB-9)并檢測(cè)其相關(guān)聲學(xué)特性。將54只成年健康大白兔隨機(jī)分成對(duì)照組(S組)、輕度缺血復(fù)灌注組(R1、R2、R3、R4組),中度缺血復(fù)灌注組(R1'、R2'、R3'、R4'組)共9組,每組6只。隨機(jī)選擇一側(cè)睪丸,于睪丸上方2cm處完全結(jié)扎精索建立睪丸缺血模型,肉眼可見(jiàn)陰囊壁變黑,彩超監(jiān)測(cè)下示睪丸血流量完全消失,其中R1、R2、R3、R4組分別缺血2h后,復(fù)灌注2h、6h、12h、24h,建立睪丸微血管輕度缺血不同復(fù)灌注程度模型;R1'、R2'、R3'、R4'組分別缺血4h后,復(fù)灌注2h、6h、12h、24h,建立睪丸微血管中度缺血不同復(fù)灌注程度模型。S組暴露精索后穿線但不結(jié)扎。術(shù)前、術(shù)后每組分別進(jìn)行雙側(cè)睪丸MB及TMB-9超聲造影,運(yùn)用超聲造影量化分析技術(shù)分析各組造影參數(shù):峰值強(qiáng)度(PI)、達(dá)峰時(shí)間(TP)、曲率(Slope)、平均渡越時(shí)間(MTT)、峰值減半時(shí)間(DT/2)和曲線下面積(Area)的變化以及兩種脂質(zhì)微泡之間的區(qū)別。各組術(shù)前及造影結(jié)束后,在彩超引導(dǎo)下經(jīng)心臟穿刺取血3ml,實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)血漿血管性血友病因子(v WF)、一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)含量。術(shù)后取術(shù)側(cè)睪丸,多點(diǎn)取材,行HE染色及免疫組織化學(xué)染色檢查(基質(zhì)金屬蛋白酶MMP-9),對(duì)比觀察各組病理變化以及組間區(qū)別。使用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,所有數(shù)據(jù)均以x±s表示,兩組數(shù)據(jù)間的比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。差異性檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)為P0.05(雙側(cè))。結(jié)果脂質(zhì)微泡造影劑為乳狀白色稠狀液體,光鏡下可見(jiàn)粒徑約為3-5μm,分布較均一的圓形微泡,室溫下靜置30min后,可出現(xiàn)分層,微泡變大、數(shù)量減少,24h后液體變澄清,幾乎未見(jiàn)明顯微泡。術(shù)前各實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組間術(shù)側(cè)睪丸超聲造影(MB組及TMB9組)各參數(shù)無(wú)明顯差別(P0.05)。輕度缺血組,TMB9組中,R1組較S組患側(cè)PI、Slope、Area明顯增加(P0.01),MTT、DT/2明顯延長(zhǎng)(P0.01),TP明顯縮短(P0.01)。隨著復(fù)灌注時(shí)間延長(zhǎng),PI、Slope、Area逐漸降低(P0.05),TP、MTT、DT/2逐漸增加(P0.05)。TMB9組較MB組PI、MTT增加(P0.05),DT/2、Slope、Area顯著增加,TP明顯降低(P0.01)。中度缺血組,TMB9組中,R1'組較S組PI、Slope、Area明顯增加(P0.01),DT/2延長(zhǎng)(P0.05),TP減少(P0.01)。隨著復(fù)灌注時(shí)間進(jìn)一步延長(zhǎng),PI、Slope明顯降低(P0.01)、Area減少(P0.05),TP、DT/2、MTT明顯延長(zhǎng)(P0.01)。TMB9組較MB組PI顯著增加,Slope、DT/2、MTT、Area顯著增加,TP明顯降低(P0.01)。術(shù)前各組間血漿v WF、NO、ET-1含量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。術(shù)后各實(shí)驗(yàn)組血漿v WF、NO、ET-1含量均較S組顯著增高(P0.01)。在輕度缺血復(fù)位早期(R1及R2組),v WF、NO、ET-1逐漸升高,R3組中ET-1含量最高。中度缺血組中,隨著復(fù)灌注時(shí)間延長(zhǎng),ET-1,NO水平逐漸升高(P0.05)。睪丸病理檢查結(jié)果:S組睪丸間質(zhì)微血管未見(jiàn)擴(kuò)張,未見(jiàn)出血、血栓形成;輕度缺血組及中度缺血組中,隨著復(fù)灌注時(shí)間延長(zhǎng),睪丸微血管擴(kuò)張充血明顯,腔內(nèi)可見(jiàn)血栓形成,管腔及間質(zhì)內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)增多,管壁玻璃樣變性,微血管基底膜MMP-9表達(dá)逐漸增多,間質(zhì)水腫逐漸加重。結(jié)論攜抗基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體脂質(zhì)微泡(TMB-9)比普通脂質(zhì)微泡(MB)能夠更好地評(píng)價(jià)睪丸微血管損傷的程度。不同缺血時(shí)間與不同復(fù)灌注時(shí)間會(huì)引起不同程度睪丸微血管的損傷改變。
【關(guān)鍵詞】：MB TMB9 睪丸微血管 缺血再灌注損傷 MMP-9
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R445.1;R697
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• ABSTRACT4-7
• 前言7-8
• 材料與方法8-21
• 結(jié)果21-45
• 討論45-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-54
• 綜述54-61
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 致謝61

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3 姜學(xué)平;程茜;錢夢(mèng)，

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