攜抗基質金屬蛋白酶-9抗體脂質微泡在評價兔睪丸不同程度缺血再灌注損傷中的實驗研究
本文關鍵詞:攜抗基質金屬蛋白酶-9抗體脂質微泡在評價兔睪丸不同程度缺血再灌注損傷中的實驗研究
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【摘要】:目的比較不同程度缺血及不同復灌注時間引起的睪丸微血管的損傷改變,研究攜抗基質金屬蛋白酶-9抗體脂質微泡(TMB-9)在兔睪丸不同程度缺血再灌注損傷中的評價,尋求一種更能客觀、直接評價睪丸微血管損傷的無創(chuàng)方法。方法制備普通脂質微泡(MB)及攜抗基質金屬蛋白酶-9抗體脂質微泡(TMB-9)并檢測其相關聲學特性。將54只成年健康大白兔隨機分成對照組(S組)、輕度缺血復灌注組(R1、R2、R3、R4組),中度缺血復灌注組(R1'、R2'、R3'、R4'組)共9組,每組6只。隨機選擇一側睪丸,于睪丸上方2cm處完全結扎精索建立睪丸缺血模型,肉眼可見陰囊壁變黑,彩超監(jiān)測下示睪丸血流量完全消失,其中R1、R2、R3、R4組分別缺血2h后,復灌注2h、6h、12h、24h,建立睪丸微血管輕度缺血不同復灌注程度模型;R1'、R2'、R3'、R4'組分別缺血4h后,復灌注2h、6h、12h、24h,建立睪丸微血管中度缺血不同復灌注程度模型。S組暴露精索后穿線但不結扎。術前、術后每組分別進行雙側睪丸MB及TMB-9超聲造影,運用超聲造影量化分析技術分析各組造影參數:峰值強度(PI)、達峰時間(TP)、曲率(Slope)、平均渡越時間(MTT)、峰值減半時間(DT/2)和曲線下面積(Area)的變化以及兩種脂質微泡之間的區(qū)別。各組術前及造影結束后,在彩超引導下經心臟穿刺取血3ml,實驗室檢測血漿血管性血友病因子(v WF)、一氧化氮(NO)、內皮素-1(ET-1)含量。術后取術側睪丸,多點取材,行HE染色及免疫組織化學染色檢查(基質金屬蛋白酶MMP-9),對比觀察各組病理變化以及組間區(qū)別。使用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析,所有數據均以x±s表示,兩組數據間的比較采用兩獨立樣本t檢驗。差異性檢驗水準設為P0.05(雙側)。結果脂質微泡造影劑為乳狀白色稠狀液體,光鏡下可見粒徑約為3-5μm,分布較均一的圓形微泡,室溫下靜置30min后,可出現(xiàn)分層,微泡變大、數量減少,24h后液體變澄清,幾乎未見明顯微泡。術前各實驗組、對照組間術側睪丸超聲造影(MB組及TMB9組)各參數無明顯差別(P0.05)。輕度缺血組,TMB9組中,R1組較S組患側PI、Slope、Area明顯增加(P0.01),MTT、DT/2明顯延長(P0.01),TP明顯縮短(P0.01)。隨著復灌注時間延長,PI、Slope、Area逐漸降低(P0.05),TP、MTT、DT/2逐漸增加(P0.05)。TMB9組較MB組PI、MTT增加(P0.05),DT/2、Slope、Area顯著增加,TP明顯降低(P0.01)。中度缺血組,TMB9組中,R1'組較S組PI、Slope、Area明顯增加(P0.01),DT/2延長(P0.05),TP減少(P0.01)。隨著復灌注時間進一步延長,PI、Slope明顯降低(P0.01)、Area減少(P0.05),TP、DT/2、MTT明顯延長(P0.01)。TMB9組較MB組PI顯著增加,Slope、DT/2、MTT、Area顯著增加,TP明顯降低(P0.01)。術前各組間血漿v WF、NO、ET-1含量均無統(tǒng)計學差異(P0.05)。術后各實驗組血漿v WF、NO、ET-1含量均較S組顯著增高(P0.01)。在輕度缺血復位早期(R1及R2組),v WF、NO、ET-1逐漸升高,R3組中ET-1含量最高。中度缺血組中,隨著復灌注時間延長,ET-1,NO水平逐漸升高(P0.05)。睪丸病理檢查結果:S組睪丸間質微血管未見擴張,未見出血、血栓形成;輕度缺血組及中度缺血組中,隨著復灌注時間延長,睪丸微血管擴張充血明顯,腔內可見血栓形成,管腔及間質內炎癥細胞浸潤增多,管壁玻璃樣變性,微血管基底膜MMP-9表達逐漸增多,間質水腫逐漸加重。結論攜抗基質金屬蛋白酶-9抗體脂質微泡(TMB-9)比普通脂質微泡(MB)能夠更好地評價睪丸微血管損傷的程度。不同缺血時間與不同復灌注時間會引起不同程度睪丸微血管的損傷改變。
【關鍵詞】:MB TMB9 睪丸微血管 缺血再灌注損傷 MMP-9
【學位授予單位】:福建醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R445.1;R697
【目錄】:
- 中文摘要2-4
- ABSTRACT4-7
- 前言7-8
- 材料與方法8-21
- 結果21-45
- 討論45-51
- 結論51-52
- 參考文獻52-54
- 綜述54-61
- 參考文獻59-61
- 致謝61
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本文編號:593815
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