本文關(guān)鍵詞：高鈣離子誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞表達(dá)MCP-1和HMGB1的體外研究

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【摘要】：目的觀察體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞在高鈣離子環(huán)境下細(xì)胞損傷及炎性因子MCP-1和HMGB1的表達(dá)。方法體外培養(yǎng)人腎小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞),使用CaCl2配制成不同鈣離子濃度的溶液作為刺激劑,實(shí)驗(yàn)分為①正常對照組(+正常培養(yǎng)液)、②Ca Ⅰ組(5mmol/L Ca2+液)、③Ca Ⅱ組(10mmol/LCa2+液)、④Ca Ⅲ組(15 mmol/L Ca2+液)。各組細(xì)胞分別培養(yǎng)至3 h、6 h、9 h時,采用MTT法檢測細(xì)胞活力。培養(yǎng)6 h時,采用4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)進(jìn)行細(xì)胞凋亡染色,觀察各組細(xì)胞凋亡情況；同時收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液,采用ELISA法分別檢測各組細(xì)胞上清液過氧化氫(H2O2)和8-IP濃度,微量酶標(biāo)儀法檢測各組細(xì)胞上清液乳酸脫氫酶(LDH)活性。此外,培養(yǎng)6 h時收集各組細(xì)胞,采用RT-qPCR法檢測細(xì)胞MCP-1和HMGB1的mRNA表達(dá)情況；并收集各組細(xì)胞上清液,采用ELISA法檢測其MCP-1、HMGB1的含量。結(jié)果隨著細(xì)胞培養(yǎng)液中鈣離子濃度的增加,細(xì)胞活力抑制率和細(xì)胞凋亡明顯增加。LDH活性在正常對照組、Ca Ⅰ組、Ca Ⅱ組、Ca Ⅲ組分別為16.67±4.43U/L、51.42±7.70 U/L、69.15±8.54 U/L、85.46±8.60 U/L,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P0.05)。細(xì)胞上清液H2O2的濃度在正常對照組、Ca Ⅰ組、Ca Ⅱ組、Ca Ⅲ組分別為17.30±0.28 mmol/L.19.10±0.33 mmol/L.21.56±0.28 mmol/L.24.30±0.16 mmol/L,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P0.05)。細(xì)胞上清液8-IP的含量在正常對照組、Ca Ⅰ組、Ca Ⅱ組、Ca Ⅲ組分別為21.55±4.31 ng/ml,61.12±4.55 ng/ml, 78.48±2.57 ng/ml,94.74±3.34 ng/ml,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P0.05).RT-qPCR的結(jié)果顯示,與對照組比較,3個鈣離子誘導(dǎo)組細(xì)胞MCP-1和HMGBl的mRNA表達(dá)水平升高,差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P0.05)。此外,各組細(xì)胞上清液MCP-1含量測定值分別為13.48±1.60 pg/mL、22.93±2.86 pg/mL、40.57±1.63 pg/mL、 30.39±1.61 pg/mL,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P0.05)；細(xì)胞上清液HMGB1含量分別為138.17±5.99 pg/mL、181.82±4.54 pg/mL、346.81±20.26 pg/mL、223.15±16.0 pg/mL,各組間差異有統(tǒng)計學(xué)顯著性(P0.05)。結(jié)論本研究結(jié)果提示,高鈣離子可誘導(dǎo)人腎小管上皮細(xì)胞出現(xiàn)氧化應(yīng)激損傷,同時細(xì)胞高表達(dá)MCP-1和HMGB1。由MCP-1和HMGB1引發(fā)的炎癥反應(yīng)可能是高鈣尿參與結(jié)石形成的重要機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：高鈣尿 人腎小管上皮細(xì)胞 炎癥 MCP-1 HMGB1
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R691.4
【目錄】：

• 個人簡歷3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-13
• 實(shí)驗(yàn)材料13-16
• 實(shí)驗(yàn)方法16-30
• 結(jié)果30-46
• 討論46-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 附錄57-58
• 綜述58-73
• 參考文獻(xiàn)66-73
• 致謝73-74
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文74

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2 Baoping Chang;Xiao Wang;Songsou Gao;Bianfeng Zhao;Wanli Wang;Shaohua Yang;Qian Chu;Shiying Yu;;乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中HMGB1表達(dá)的臨床意義(英文)[J];The Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2014年05期

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4 丁寧;肖慧;高巨;許立新;佘守章;;HMGB1啟動子熒光素酶報告基因的構(gòu)建及鑒定[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2009年22期

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6 易世紅;孫陸果;魏成國;黃紅蘭;;脂多糖刺激對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞HMGB1表達(dá)的影響[J];中國生物制品學(xué)雜志;2009年08期

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8 欒正剛;郭仁宣;;HMGB1對急性壞死性胰腺炎大鼠腸上皮細(xì)胞緊密連接相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[J];中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展;2013年01期

9 張巧玲;任少敏;;HMGB1細(xì)胞因子作用研究進(jìn)展[J];疾病監(jiān)測與控制;2013年05期

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1 葉惠惠;張詠梅;劉河霞;張嬌麗;吳克儉;;HMGB1協(xié)同Toll樣受體4/MyD88/NF-κB參與小鼠酒精性胃黏膜損傷過程[A];中國生理學(xué)會消化內(nèi)分泌生殖代謝生理專業(yè)委員會2011年消化內(nèi)分泌生殖學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2011年

2 張曉娟;欒正剛;馬曉春;;構(gòu)建HMGB1基因真核細(xì)胞表達(dá)載體[A];中華醫(yī)學(xué)會第五次全國重癥醫(yī)學(xué)大會論文匯編[C];2011年

3 孟二紅;郭子寬;吳祖澤;王立生;;HMGB1對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[A];第11次中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文匯編[C];2007年

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本文編號：567612