本文關(guān)鍵詞：抑制內(nèi)源性硫化氫生成加重尿源性膿毒癥腎損傷的腎細(xì)胞凋亡，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的復(fù)制兔尿源性膿毒血癥模型,應(yīng)用胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)抑制劑DL-炔丙基甘氨酸(DL-Propargylglycine,PAG)抑制內(nèi)源性硫化氫的生成,觀察兔腎組織Bcl-2、Bax、CSE及NF-κB的表達(dá)及腎臟組織細(xì)胞凋亡情況,明確內(nèi)源性硫化氫對尿源性膿毒血癥腎臟細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制。方法1、將兔左側(cè)輸尿管遠(yuǎn)端結(jié)扎,在其近端注入大腸桿菌(ATCC25922),制造尿源性膿毒血癥動(dòng)物模型;2、將32只健康雄性兔(1.8-2.2Kg/只)隨機(jī)分為4組:對照組(A組);假手術(shù)組(B組);尿源性膿毒血癥組(C組);PAG組(D組),每組8只;3、將各組分為術(shù)前,術(shù)后12h、24h、36h、48h,5個(gè)時(shí)間點(diǎn)觀測肛溫(RT)、呼吸(RR)和心率(HR)等指標(biāo);4、5個(gè)時(shí)間點(diǎn)采血,行外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)分析、腎功能(Cr、BUN)測定;5、術(shù)后48小時(shí)測血漿硫化氫濃度;6、術(shù)后48小時(shí)各組兔處死后取腎組織HE染色,并觀察其結(jié)構(gòu)形態(tài)的變化;PCR法檢測各組兔Bcl-2、Bax及CSE的表達(dá);Tunel法檢測其腎組織細(xì)胞凋亡;免疫組化法檢測兔腎組織中NF-κB的表達(dá)。結(jié)果1.各組兔術(shù)前、術(shù)后各體溫、呼吸及心率比較:A組與B組體溫、呼吸及心率情況相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);C組高于A、B兩組(P0.05),D組高于C組(P0.05)。2.抽血結(jié)果比較:各組兔術(shù)前白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、血肌酐(CR)、血尿素氮(BUN),無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)的血白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞;CR、BUN結(jié)果:A組與B組相比,無明顯差異(P0.05);C組各指標(biāo)值高于A、B兩組(P0.05);D組與C組相比各指標(biāo)均呈上升趨勢,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.術(shù)后48H血漿H2S濃度檢測:A、B組血漿H2S的含量相比無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C、D兩組血漿H2S的含量與A、B組相比明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。其中D組血漿H2S的含量較C組明顯降低,差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.病理形態(tài)改變:HE染色:A、B兩組兔腎組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)大致相同,呈正常形態(tài);C組腎組織充血、膿腫,大量炎癥細(xì)胞浸潤,腎小球與腎小囊、腎小管出現(xiàn)形態(tài)改變;D組比C組腎臟病理損害更嚴(yán)重。5.RT-PCR法檢測:腎臟組織中Bax、Bcl-2及CSE的表達(dá)情況:A組與B組Bax、Bcl-2、CSE的表達(dá)相差不大;Bax的表達(dá)于D組最強(qiáng),相反Bcl-2及CSE于D組表達(dá)最微弱;D組與C組相比Bax表達(dá)明顯增強(qiáng),而Bcl-2及CSE表達(dá)明顯減弱。6.TUNEL法檢測腎組織的細(xì)胞凋亡:A、B兩組可見少量腎小管的上皮細(xì)胞凋亡。C組可見成片的細(xì)胞凋亡和凋亡小體形成,與A、B兩組凋亡指數(shù)相比差異明顯(P0.05)。D組較C組腎組織細(xì)胞凋亡情況嚴(yán)重,呈廣泛片狀(P0.05)。7.免疫組化法檢測各組兔NF-ΚB蛋白的表達(dá)情況:A、B組NF-ΚB蛋白檢測相比無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);C組術(shù)后48h中NF-ΚB的蛋白與A、B組比較明顯增強(qiáng)(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;D組術(shù)后48h NF-ΚB的蛋白與C組相比亦有增強(qiáng)(P0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論1、成功復(fù)制兔尿源性膿毒血癥模型;2、應(yīng)用PAG可抑制兔尿源性膿毒血癥內(nèi)源性H2S的生成,加重了尿源性膿毒血癥腎損傷;其機(jī)制可能是通過上調(diào)NF-κB的表達(dá),同時(shí)上調(diào)凋亡相關(guān)BAX的表達(dá),以及下調(diào)凋亡相關(guān)Bcl-2的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)源性硫化氫 PAG 尿源性膿毒血癥 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R692;R459.7
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-13
• 第1章 緒論13-15
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.2 主要試劑與配制15-16
• 2.3 主要儀器、設(shè)備16-17
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法17-23
• 3.1 大腸桿菌培養(yǎng)及菌液制備17
• 3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組以及手術(shù)操作17-18
• 3.3 觀察和檢測指標(biāo)及檢測方法18-22
• 3.4 數(shù)據(jù)分析22-23
• 第4章 結(jié)果23-37
• 4.1 四組兔的的情況比較23
• 4.2 四組兔肛溫（RT）、呼吸頻率（RR）及心率（HR）的改變23-26
• 4.3 四組兔肌酐（Cr）、尿素氮（BUN） 改變26-28
• 4.4 四組兔的白細(xì)胞（WBC）、中性粒細(xì)胞（N）的改變28-30
• 4.5 術(shù)后 48 H測血漿H2S含量30-31
• 4.6 腎臟HE染色后改變31-32
• 4.7 Tunel法檢測，腎細(xì)胞凋亡情況32-33
• 4.8 RT-PCR 法檢測四組兔 Bax、Bcl-2 及 CSE 的表達(dá)水平33-35
• 4.9 免疫組化法檢測四組新西蘭兔腎臟組織 NF-ΚB 蛋白的表達(dá)35-37
• 第5章 討論37-40
• 第6章 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 文縮寫注解45-46
• 綜述46-51
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 碩士期間發(fā)表的文章51-52
• 致謝52

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

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  本文關(guān)鍵詞：抑制內(nèi)源性硫化氫生成加重尿源性膿毒癥腎損傷的腎細(xì)胞凋亡，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：506986