吡柔比星對膀胱癌EJ細(xì)胞增殖及Livin和Caspase-3表達(dá)的影響
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【摘要】:目的吡柔比星為半合成的蒽環(huán)類抗癌藥,常用于膀胱癌術(shù)后,預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)。文中探討吡柔比星對體外培養(yǎng)人膀胱癌EJ細(xì)胞株增殖情況及對相關(guān)基因Livin、Caspase-3表達(dá)的影響,并探討其可能的作用機(jī)制。方法使用不同濃度的吡柔比星(0、0.1、1、10μg/m L)分別處理EJ細(xì)胞株,通過細(xì)胞增殖曲線實驗檢測不同濃度吡柔比星對EJ細(xì)胞株生長的影響;倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度吡柔比星作用EJ細(xì)胞24 h后,膀胱癌EJ細(xì)胞周期的分布變化;RTPCR法檢測不同藥物濃度作用后Livin、Caspase-3 mRNA表達(dá)的情況;Western blot法檢測確認(rèn)Livin、Caspase-3蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 0μg/m L吡柔比星作用EJ細(xì)胞24 h后,細(xì)胞大小均一,輪廓清楚。隨吡柔比星濃度升高(0.1、1、10μg/m L),EJ細(xì)胞縮小變形明顯,細(xì)胞逐漸萎縮、碎裂。與0μg/m L吡柔比星比較,0.1、1、10μg/m L吡柔比星干預(yù)膀胱癌EJ細(xì)胞24、48、72 h后,細(xì)胞的增殖活性明顯受到抑制(P0.05),0.1、1、10μg/m L吡柔比星間及各時間點間(24、48、72 h)EJ細(xì)胞A值差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。細(xì)胞增殖抑制率隨吡柔比星濃度升高、作用時間延長而升高,有明顯的時間-劑量效應(yīng)關(guān)系(P0.05)。0.1、1、10μg/m L吡柔比星作用EJ細(xì)胞24 h后,Livin mRNA表達(dá)水平(0.63±0.09、0.44±0.06,、0.21±0.02)較0μg/m L吡柔比星(0.84±0.07)明顯降低(P0.05),而Caspase-3 mRNA表達(dá)水平(0.31±0.08、0.52±0.04、0.75±0.01)較0μg/m L吡柔比星(0.12±0.03)明顯升高(P0.05);Livin蛋白表達(dá)水平(0.43±0.08、0.26±0.06、0.11±0.01)較0μg/m L吡柔比星(0.74±0.03)明顯降低(P0.05),而Caspase-3蛋白表達(dá)水平(0.41±0.07、0.62±0.03、0.90±0.06)較0μg/m L吡柔比星(0.22±0.02)明顯升高(P0.05)。結(jié)論吡柔比星抑制EJ細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)其凋亡的關(guān)鍵機(jī)制可能與下調(diào)EJ細(xì)胞中Livin蛋白的表達(dá)、上調(diào)Caspase-3蛋白的表達(dá),并使細(xì)胞阻滯于G2期有關(guān)。
【作者單位】: 桂林醫(yī)學(xué)院研究生院;新疆醫(yī)科大學(xué)研究生院;桂林醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】: 膀胱癌 細(xì)胞周期 吡柔比星 Livin Caspase-
【基金】:廣西壯族自治區(qū)高等學(xué)校科研資助項目(200103YB092) 廣西壯族自治區(qū)教育廳科研項目(200911LX290)
【分類號】:R737.14
【正文快照】: 0引言膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,占全部惡性腫瘤的3.2%。男性膀胱癌的發(fā)病率位居全身惡性腫瘤的第7位,女性排在第10位,且發(fā)病率呈逐年升高趨勢[1-2]。吡柔比星作為一種廣譜抗腫瘤藥,具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性,通過阻斷癌細(xì)胞的細(xì)胞分裂周期,進(jìn)而殺滅癌細(xì)胞。近年來研
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本文編號:501462
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