發(fā)布時(shí)間：2017-06-28 01:04

  本文關(guān)鍵詞：PLCε通過(guò)STAT3磷酸化調(diào)控膀胱癌細(xì)胞炎癥因子釋放，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分PLCε和p-STAT3蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及相關(guān)性目的研究磷脂酶Cε(PLCs)、磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3(p-STAT3)蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌(TCCB)中的表達(dá)相關(guān)性及與TCCB病理分級(jí)分期之間的關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)48例膀胱移行細(xì)胞癌組織及21例癌旁組織中PLCs和p-STAT3蛋白表達(dá),顯微鏡下觀察并拍照,IPP6.0軟件分析平均光密度值,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析PLCε和p-STAT3的表達(dá)與臨床各病理參數(shù)的關(guān)系及兩者的相關(guān)性。結(jié)果PLCε與p-STAT3在膀胱移行細(xì)胞癌組織表達(dá)水平均明顯高于相應(yīng)癌旁組織(P0.01)。PLCε蛋白表達(dá)水平與膀胱移行細(xì)胞癌病理分期有關(guān)(P0.05)但與病理分級(jí)無(wú)關(guān)(P0.05)；p-STAT3蛋白表達(dá)水平與病理分期及病理分級(jí)均無(wú)關(guān)(P0.05)。Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示PLCε與p-STAT3的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.817,P0.01)。結(jié)論P(yáng)LCε蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌組織中高表達(dá),且與p-STAT3的高表達(dá)密切相關(guān),為進(jìn)一步探索PLCε及p-STAT3在膀胱癌發(fā)生發(fā)展中的作用奠定了基礎(chǔ)。第二部分PLCε對(duì)膀胱癌細(xì)胞炎癥相關(guān)因子表達(dá)的影響目的探討感染Ad-shPLCε腺病毒后對(duì)膀胱癌T24, BIU-87細(xì)胞炎癥相關(guān)因子表達(dá)的影響。方法膀胱癌T24, BIU-87細(xì)胞分別感染陽(yáng)性腺病毒(Ad-shPLCε)和空載腺病毒(Ad-HK), qRT-PCR和western blot檢測(cè)PLCε表達(dá),qRT-PCR及ELISA檢測(cè)interleukin-6 (IL-6),tumor necrosis factor-a (TNF-a)和interleukin-1β (IL-1β)表達(dá),western blot檢測(cè)TLR4, Myd88表達(dá)。結(jié)果T24, BIU-87細(xì)胞分別感染陽(yáng)性腺病毒(Ad-shPLCε)后,PLCε表達(dá)明顯下調(diào),表明PLCε特異腺病毒干擾效果好。qRT-PCR及ELISA結(jié)果顯示感染Ad-shPLCε組IL-6,TNFa,IL-1β mRNA及蛋白表達(dá)下調(diào),與Ad-HK組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western blot結(jié)果顯示感染Ad-shPLCε組TLR4, Myd88蛋白表達(dá)水平下調(diào),與Ad-HK組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論應(yīng)用腺病毒RNA干擾技術(shù)干擾PLCε基因后,抑制細(xì)胞因子IL-6,TNF-a和IL-1 p的表達(dá)及TLR4, Myd88的表達(dá)。第三部分沉默PLCε基因通過(guò)下調(diào)STAT3磷酸化水平抑制細(xì)胞因子的釋放目的進(jìn)一步探討PLCs調(diào)控膀胱癌細(xì)胞中細(xì)胞因子釋放的分子機(jī)制。方法膀胱癌細(xì)胞株T24, BIU-87分別用LPS, Ad-shPLCε, LPS聯(lián)合Ad-shPLCε處理,ELISA檢測(cè)IL-6,TNF-a和IL-1p分泌；Western blot檢測(cè)Ad-shPLCε處理后p-STAT3, STAT3及p-ERK, ERK的表達(dá)；不同濃度的p-STAT3抑制劑S3I-201處理T24, BIU-87細(xì)胞,western blot檢測(cè)p-STAT3的表達(dá)；S3I-201聯(lián)合Ad-shPLCε處理T24, BIU-87細(xì)胞,western blot檢測(cè)p-STAT3的表達(dá)；T24, BIU-87細(xì)胞用LPS, Ad-shPLCε, LPS聯(lián)合Ad-shPLCε處理,western blot檢測(cè)p-STAT3的表達(dá)。結(jié)果ELISA結(jié)果顯示：IL-6,TNF-a, IL-1β表達(dá)在LPS聯(lián)合Ad-shPLCε處理組低于LPS單獨(dú)處理組。Ad-shPLCε處理后p-STAT3表達(dá)明顯下調(diào),而STAT3, p-ERK, ERK表達(dá)無(wú)明顯變化。western blot結(jié)果顯示：S31-201能明顯抑制T24, BIU-87細(xì)胞中p-STAT3的表達(dá)并且呈濃度依賴性,S3I-201與Ad-shPLCε協(xié)同抑制T24, BIU-87細(xì)胞中p-STAT3的表達(dá)。p-STAT3的表達(dá)水平在LPS聯(lián)合Ad-shPLCs處理組低于LPS單獨(dú)處理組。結(jié)論干擾PLCε基因的表達(dá)通過(guò)下調(diào)STAT3的磷酸化抑制膀胱癌細(xì)胞促炎細(xì)胞因子的釋放。
【關(guān)鍵詞】：PLCε p-STAT3 膀胱移行細(xì)胞癌 PLCε IL-6 TNF-a IL-1β TLR4 Myd88 PLCε LPS p-STAT3 S3I-201
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.14;R730.43
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-16
• 附：技術(shù)路線16-17
• 第一部分 PLCε和p-STAT3蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其相關(guān)性17-23
• 1 材料與方法17-19
• 2 結(jié)果19-21
• 3 討論21-23
• 第二部分 PLCε對(duì)膀胱癌細(xì)胞炎癥相關(guān)因子表達(dá)的影響23-34
• 1 材料與方法23-29
• 2 結(jié)果29-32
• 3 討論32-34
• 第三部分 沉默PLCε基因通過(guò)下調(diào)STAT3磷酸化水平抑制細(xì)胞因子的釋放34-42
• 1 材料與方法34-35
• 2 結(jié)果35-40
• 3 討論40-42
• 全文總結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 文獻(xiàn)綜述47-56
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 致謝56-57
• 玫讀碩士學(xué)位期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄57

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本文編號(hào)：491892