QDPR基因表達(dá)水平對(duì)腎小管上皮細(xì)胞系NRK-52E細(xì)胞DHFR表達(dá)的影響
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【摘要】:目的 OLETF大鼠醌式二氫生物喋呤還原酶(Quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)存在K93T點(diǎn)突變,QDPR催化醌型二氫生物喋呤還原成四氫生物喋呤(tetrahydrobiopterin,BH4);二氫葉酸還原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)能將二氫喋呤還原成BH4,提示生物喋呤代謝與葉酸代謝通路之間有串?dāng)_。文中通過(guò)研究QDPR基因表達(dá)水平對(duì)腎小管上皮NRK-52E細(xì)胞DHFR表達(dá)的影響,探討QDPR基因在糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)中的作用機(jī)制。方法 Western blot檢測(cè)高糖環(huán)境下NRK-52E細(xì)胞及OLETF大鼠DHFR蛋白表達(dá)情況。利用慢病毒技術(shù)感染NRK-52E細(xì)胞,制作空載過(guò)表達(dá)、過(guò)表達(dá)QDPR敲低隨機(jī)序列對(duì)照和敲低QDPR模型。每組再分別給予5.4 mmol/L正常糖培養(yǎng)基和30 mmol/L高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞72 h,模擬DN模型。實(shí)驗(yàn)分組:NRK-52E對(duì)照組、NRK-52E高糖組、空載過(guò)表達(dá)病毒對(duì)照組、空載過(guò)表達(dá)病毒高糖組、QDPR基因過(guò)表達(dá)組、QDPR基因過(guò)表達(dá)高糖組、敲低隨機(jī)序列對(duì)照組、敲低隨機(jī)序列高糖組、QDPR基因敲低組、QDPR基因敲低高糖組。觀察高糖環(huán)境QDPR基因的表達(dá)情況對(duì)DHFR蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果 NRK-52E高糖組DHFR蛋白含量(0.33±0.16)低于NRK-52E對(duì)照組(0.64±0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);OLETF大鼠DHFR蛋白的表達(dá)水平(1.03±0.12)明顯低于LETO大鼠的表達(dá)水平(1.56±0.16),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。與空載過(guò)表達(dá)病毒高糖組(0.63±0.08)相比,QDPR基因過(guò)表達(dá)高糖組DHFR蛋白含量(0.12±0.09)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與敲低隨機(jī)序列對(duì)照組(0.52±0.08)相比,QDPR基因敲低高糖組DHFR表達(dá)量(0.62±0.27)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論DHFR蛋白在DN的發(fā)生發(fā)展中可能起到重要作用,QDPR基因過(guò)表達(dá)使DHFR蛋白表達(dá)含量下降,QDPR基因過(guò)表達(dá)通過(guò)下調(diào)DHFR蛋白的表達(dá)水平進(jìn)而影響DN的發(fā)展。
【作者單位】: 華北理工大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心/老年醫(yī)學(xué)國(guó)際科技合作基地;唐山市玉田縣醫(yī)院內(nèi)分泌科;華北理工大學(xué)附屬開灤總醫(yī)院內(nèi)分泌科;北京軍區(qū)解放軍261醫(yī)院心血管內(nèi)科;中日友好醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 糖尿病腎病 二氫生物喋呤還原酶 二氫葉酸還原酶 腎小管上皮細(xì)胞
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81100518,81373795) 河北省高等學(xué)?茖W(xué)研究計(jì)劃(QN2014013)
【分類號(hào)】:R587.2;R692.9
【正文快照】: Influence of QDPR expression on DHFR expression of NRK-52E cells in high glucose ambienceYANG Xiang-jun1,PU Zhi-jie2,MENG Ling-yu3,MA Yan-hong4,HE Hai-lan1,XIONG Hao1,WU Xue-jing3,ZHANG Hao-jun5,LI Zhi-guo1(1.Medical Research Center,North China Universit
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