本文關(guān)鍵詞：弱精子癥COX6B1的表達(dá)及其與體外受精結(jié)局的初步研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討弱精子癥及精液正常男性細(xì)胞色素氧化酶6B1在精子m RNA水平的表達(dá)及蛋白表達(dá)差異,同時了解該蛋白在精子的定位。方法收集于廣西醫(yī)科大學(xué)一附院生殖中心就診的精液正常組、弱精子癥組精液各50例,采用Pure Cepition液行密度梯度離心分離精子。提取精子總RNA后逆轉(zhuǎn)錄為c DNA,設(shè)計COX6B1基因特異性擴(kuò)增引物,通過實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q RT-PCR)以兩組精子c DNA為模板進(jìn)行特異性擴(kuò)增,比較兩組精子中COX6B1基因的轉(zhuǎn)錄水平差異。分別取兩組少量離心后精子稀釋至合適濃度,涂片后通過免疫熒光技術(shù),在激光掃描共聚焦熒光顯微鏡600倍油鏡下觀察,了解COX6B1在成熟精子的定位,同時隨機(jī)選擇視野拍照,比較兩組細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度差異。結(jié)果COX6B1蛋白定位在精子尾部中段,弱精子癥組COX6B1基因表達(dá)下調(diào),m RNA轉(zhuǎn)錄相對表達(dá)量1.393±1.447顯著低于精液正常組4.249±4.933(P=0.0080.01),弱精子癥組COX6B1平均熒光強(qiáng)度低于精液正常組(32.341±6.195 vs 48.931±5.784),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論COX6B1蛋白在精子尾部中段表達(dá),弱精子癥患者的精子中COX6B1 m RNA轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平較精液正常組均下調(diào),提示COX6B1基因有望成為弱精子癥的一個分子標(biāo)記。目的COX6B1差異表達(dá)的弱精子癥患者和精液正常者的IVF結(jié)局對照。方法兩組患者各50例,均于廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖中心行體外受精-胚胎移植,比較兩組的受精情況及臨床結(jié)局。結(jié)果弱精子癥組與精液正常組男性患者年齡、女性患者年齡、不孕年限無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。弱精子癥組的受精率為72.36%,低于精液正常組的79.91%,有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),弱精子癥組正常受精率也低于精液正常組(70.08%vs 63.60%)。兩組的卵裂率、優(yōu)胚率、臨床妊娠率及早期流產(chǎn)率無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論弱精子癥組受精率及正常受精率均低于精液正常組,兩組卵裂率、優(yōu)胚率、臨床妊娠率、早期流產(chǎn)率無統(tǒng)計學(xué)差異。推測COX6B1蛋白降低可能對線粒體能量代謝產(chǎn)生不利影響從而降低了受精率。
【關(guān)鍵詞】：細(xì)胞色素氧化酶6B 男性弱精子癥 基因表達(dá) 蛋白定位 細(xì)胞色素氧化酶6B 弱精子癥 體外受精-胚胎移植 受精率
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R698.2
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 第一部分 摘要6-7
• 第二部分 摘要7-8
• 第一部分 ABSTRACT8-10
• 第二部分 ABSTRACT10-12
• 前言12-16
• 第一部分 弱精子癥男性精子中COX6B1的表達(dá)及定位分析16-34
• 材料與方法16-22
• 結(jié)果22-26
• 討論26-33
• 小結(jié)33-34
• 第二部分 COX6B1差異表達(dá)的弱精子癥患者及精液正常者行IVF的結(jié)局比較34-43
• 材料與方法34-36
• 結(jié)果36-37
• 討論37-42
• 小結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 附錄49-50
• 綜述50-64
• 參考文獻(xiàn)59-64
• 致謝64-66
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文66-67

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