本文關(guān)鍵詞：MKP-1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及功能研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：近年來大量研究證明絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)的表達(dá)水平與多種腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展以及預(yù)后密切相關(guān)。有學(xué)者報(bào)道MKP-1在乳腺癌、前列腺癌、非小細(xì)胞肺癌等不同類型的腫瘤中表達(dá)異常,且發(fā)揮不同的作用,然而MKP-1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及其作用機(jī)制研究鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)主要就MKP-1在腎透明細(xì)胞癌及其癌旁組織中的表達(dá)情況以及與臨床病理資料的關(guān)系進(jìn)行研究,在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系中過表達(dá)和敲低MKP-1基因,探究其對細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。方法：①采用蛋白免疫印跡(western-blot)以及免疫組化方法檢測MKP-1蛋白在腎透明細(xì)胞癌及其癌旁組織中的表達(dá)情況,通過實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time PCR)檢測100例腎透明細(xì)胞癌組織中MKP-1的mRNA表達(dá)水平并分析其與臨床病理資料的相關(guān)性。②通過實(shí)時(shí)定量PCR和western-blot方法檢測腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系A(chǔ)498、Caki-1、786-0以及正常腎小管上皮細(xì)胞系HKC、HK2中MKP-1的表達(dá)。③構(gòu)建過表達(dá)和敲低MKP-1的慢病毒質(zhì)粒,培養(yǎng)穩(wěn)定高表達(dá)和低表達(dá)MKP-1的A498腎癌細(xì)胞系以及低表達(dá)MKP-1的Caki-1腎癌細(xì)胞系。④通過MTS方法檢測各穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的增殖情況,采用劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其遷移和侵襲能力的變化。結(jié)果：①在mRNA水平,MKP-1在腎癌組織中的表達(dá)均較其癌旁組織高(P0.001),在蛋白水平,western-blot和免疫組化均有相同的趨勢;在100例腎癌組織中MKP-1的mRNA表達(dá)水平與腫瘤的大小(P=0.010)、腫瘤的T分期(P=0.041)呈正相關(guān),與年齡(P=0.457)、性別(P=0.363)、BMI(P=0.476)、Fuhrman核分級(P=0.188)無相關(guān)性。②腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系的MKP-1表達(dá)水平顯著高于正常腎小管上皮細(xì)胞系。③成功構(gòu)建了過表達(dá)以及敲低MKP-1質(zhì)粒,并進(jìn)行慢病毒包裝,成功培育了過表達(dá)、敲低MKP-1的A498腎癌穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系以及敲低MKP-1的Caki-1腎癌穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。④在A498和Caki-1的細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)中,與空載體對照組相比,MTS實(shí)驗(yàn)顯示過表達(dá)MKP-1的細(xì)胞增殖能力明顯上升,敲低MKP-1的細(xì)胞增殖能力顯著下降;劃痕實(shí)驗(yàn)顯示過表達(dá)MKP-1的遷移細(xì)胞數(shù)顯著增多,敲低MKP-1的遷移細(xì)胞數(shù)明顯較少;transwell實(shí)驗(yàn)顯示過表達(dá)MKP-1的穿膜細(xì)胞數(shù)顯著增多,敲低MKP-1的穿膜細(xì)胞數(shù)顯著減少(P均0.05)。結(jié)論：MKP-1在腎透明細(xì)胞癌組織中的異常高表達(dá)可能與腫瘤的生長、侵襲能力有關(guān),在腎透明細(xì)胞癌的惡性進(jìn)展中發(fā)揮重要作用。
【關(guān)鍵詞】：MKP-1 腎腫瘤 增殖 侵襲力
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.11
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-11
• 第一部分 MKP-1在腎透明細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及與臨床病理資料的相關(guān)性11-21
• 1. 材料與方法11-18
• 2. 結(jié)果18-20
• 3. 小結(jié)20-21
• 第二部分 MKP-1過表達(dá)質(zhì)粒和敲除質(zhì)粒的構(gòu)建、慢病毒包裝以及腎癌穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的建立21-29
• 1. 材料與方法21-26
• 2. 結(jié)果26-28
• 3. 小結(jié)28-29
• 第三部分 改變MKP-1的表達(dá)對人腎癌細(xì)胞系A(chǔ)498和Caki-1增殖、遷移和侵襲能力的影響29-34
• 1. 材料與方法29-31
• 2. 結(jié)果31-33
• 3. 小結(jié)33-34
• 討論及結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 綜述：MKP-1在腫瘤中的研究進(jìn)展38-46
• 參考文獻(xiàn)42-46
• 英文縮略詞表46-47
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文47-48
• 致謝48

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鞏會(huì)杰;牛少曦;李世超;沈東來;顧良友;李新濤;高宇;張瑜;馬鑫;姚遠(yuǎn)新;張旭;;雙特異性磷酸酶-1過表達(dá)對腎癌細(xì)胞株A498增殖和侵襲的影響[J];解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2015年04期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 鮑洋洋;靶向抑制GLUT-1及PI3K/Akt信號通路提高喉癌放射敏感性體外研究[D];浙江大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：MKP-1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及功能研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：462370