孕酮及其受體在正常女性生殖功能的發(fā)揮中起著重要的作用。近年來孕酮及其受體與男性生殖越來越受學(xué)者們關(guān)注，已證實(shí)在男性生殖腺中存在孕酮受體mRNA，孕酮與其受體結(jié)合可以調(diào)節(jié)精子的產(chǎn)生，促進(jìn)精子受精。而在不明原因不育男性精子中，孕酮受體的表達(dá)缺陷及其對孕酮的反應(yīng)性降低可能成為導(dǎo)致不育的原因之一。孕酮受體基因的多態(tài)性與男性不育是否相關(guān),目前國內(nèi)外尚無報(bào)道，本研究將對其進(jìn)行初步探討。 材料與方法： 本實(shí)驗(yàn)采用PCR-限制性片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）方法對28例正常精液者，50例少精子癥者，35例弱精子癥者，21例無精子癥者,11例畸形精子癥者的孕酮受體基因多態(tài)性進(jìn)行研究。本實(shí)驗(yàn)所有血液樣本均來自于吉林大學(xué)第二附屬醫(yī)院生殖中心，通過靜脈采集外周血，放入到加入抗凝劑的采血管中。根據(jù)世界衛(wèi)生組織1987年制訂的精液常規(guī)檢查標(biāo)準(zhǔn)將留取血樣的患者精液分組。將所有血液樣本分別提取DNA,根據(jù)已發(fā)表的人的孕酮受體基因序列(Gene ID: AY525610),用Oligo.7.0軟件設(shè)計(jì)特異性引物，然后進(jìn)行PCR的擴(kuò)增及純化，將純化后的PCR產(chǎn)物，送至上海生工進(jìn)行目的基因的測序，最后進(jìn)行多態(tài)性的...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1DNA電泳

圖3.1DNA電泳擴(kuò)增1G/AF/R擴(kuò)增得到262bp條帶，與目的得到175bp大小條帶，與目的帶大小純化后送至上海生工測序，測序結(jié)果與

圖3.2+331G/A和175/481電泳結(jié)果

與目的帶大小一致；引物175/481F/R擴(kuò)增得到175bp大小條帶，與目的帶大小相符，結(jié)果如圖3.2。將PCR產(chǎn)物純化后送至上海生工測序，測序結(jié)果與Genebank公布序列一致。175bp262bp圖3.2+331G/A和175/481電泳結(jié)果1，2....

圖3.5b（右）G331測序結(jié)果

測序結(jié)果分別將基因型為G/A和基因型為G/G的PCR產(chǎn)物，送至上序引物為G331F�；蛐蜑镚/A基因型測序結(jié)果顯示為GC和T）的波峰（圖3.5a），而基因型為G/G基因型只顯示的波峰（圖3.5b）。

本文編號：4027632