目的:膀胱癌發(fā)病率在全世界惡性腫瘤中高居第十位,在男性惡性腫瘤中排第六。在中國,膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最高發(fā)的惡性腫瘤,也是男性最易發(fā)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率正逐年增加。膀胱癌的發(fā)生發(fā)展機制尚未研究清楚,且生物學行為復雜,極易復發(fā)和轉(zhuǎn)移。因此研究膀胱癌發(fā)病機理及影響其進展的因素對癌癥治療有著至關(guān)重要的作用。而polo-like kinase 1(PLK1)與包括膀胱癌在內(nèi)的多種癌癥的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系。其致癌基因作用已被廣泛證實。此外,微小RNA廣泛存在于生物體的各種細胞中,參與生命體生長發(fā)育的各個階段。它在物種間的高度保守性證明其有著重要作用。目前已有許多研究報道微小RNA與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。因此可以推測微小RNA可能與PLK1共同參與調(diào)節(jié)膀胱癌的生物學進程,研究微小RNA與PLK1影響膀胱癌的生物學特性的方式,可以為理解膀胱癌發(fā)生進展和臨床治療提供新的思路。方法:1、收集28對膀胱癌及癌旁正常組織,用qRT-PCR實驗檢測PLK1的mRNA表達量。2、用生物信息學的方法預測miR-505-5p可能調(diào)控PLK1,同時驗證miR-505-5p在組織中的表達量,然后用皮爾森相關(guān)分析與PL...

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文略縮語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 研究對象和分組
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)
        2.3.2 細胞計數(shù)
        2.3.3 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
        2.3.4 雙熒光素酶報告實驗
        2.3.5 qRT-PCR實驗檢測RNA表達量
        2.3.6 Western blot檢測蛋白表達量
        2.3.7 CCK-8 實驗測細胞活性
        2.3.8 Transwell實驗檢測細胞遷移
        2.3.9 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
        2.3.10 統(tǒng)計學分析
3 實驗結(jié)果
    3.1 miR-505-5p和 PLK1 在膀胱癌組織中的表達量及相關(guān)性
    3.2 miR-505-5p在膀胱癌細胞中抑制PLK1 的蛋白表達
    3.3 雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)證明miR-505-5p與 PLK1 mRNA的3'-UTR結(jié)合
    3.4 miR-505-5p通過靶向作用于PLK1 而影響膀胱癌細胞的生物學行為
        3.4.1 CCK-8 實驗檢測miR-505-5p對膀胱癌細胞增殖活力的影響
        3.4.2 Transwell實驗檢測miR-505-5p對膀胱癌細胞遷移能力的影響
        3.4.3 流式細胞術(shù)檢測miR-505-5p對膀胱癌細胞凋亡的影響
    3.5 過表達PLK1 可以回復miR-505-5p對于膀胱癌細胞的生物學行為的影響
        3.5.1 過表達PLK1 可以提高膀胱癌細胞中PLK1 蛋白的表達量
        3.5.2 過表達PLK1 可以消除miR-505-5p對膀胱癌細胞的增殖影響
        3.5.3 過表達PLK1 可以消除miR-505-5p對膀胱癌細胞促凋亡作用
        3.5.4 過表達PLK1 可以消除miR-505-5p對膀胱癌細胞遷移的抑制能力
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3888030