目的:膀胱癌發(fā)病率在全世界惡性腫瘤中高居第十位,在男性惡性腫瘤中排第六。在中國(guó),膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最高發(fā)的惡性腫瘤,也是男性最易發(fā)的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率正逐年增加。膀胱癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚未研究清楚,且生物學(xué)行為復(fù)雜,極易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。因此研究膀胱癌發(fā)病機(jī)理及影響其進(jìn)展的因素對(duì)癌癥治療有著至關(guān)重要的作用。而polo-like kinase 1(PLK1)與包括膀胱癌在內(nèi)的多種癌癥的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系。其致癌基因作用已被廣泛證實(shí)。此外,微小RNA廣泛存在于生物體的各種細(xì)胞中,參與生命體生長(zhǎng)發(fā)育的各個(gè)階段。它在物種間的高度保守性證明其有著重要作用。目前已有許多研究報(bào)道微小RNA與膀胱癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。因此可以推測(cè)微小RNA可能與PLK1共同參與調(diào)節(jié)膀胱癌的生物學(xué)進(jìn)程,研究微小RNA與PLK1影響膀胱癌的生物學(xué)特性的方式,可以為理解膀胱癌發(fā)生進(jìn)展和臨床治療提供新的思路。方法:1、收集28對(duì)膀胱癌及癌旁正常組織,用qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)PLK1的mRNA表達(dá)量。2、用生物信息學(xué)的方法預(yù)測(cè)miR-505-5p可能調(diào)控PLK1,同時(shí)驗(yàn)證miR-505-5p在組織中的表達(dá)量,然后用皮爾森相關(guān)分析與PL...

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文略縮語(yǔ)
1 前言
2 材料和方法
    2.1 主要試劑和儀器
        2.1.1 主要試劑
        2.1.2 主要儀器
    2.2 研究對(duì)象和分組
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.3.3 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
        2.3.4 雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)
        2.3.5 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RNA表達(dá)量
        2.3.6 Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)量
        2.3.7 CCK-8 實(shí)驗(yàn)測(cè)細(xì)胞活性
        2.3.8 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移
        2.3.9 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 miR-505-5p和 PLK1 在膀胱癌組織中的表達(dá)量及相關(guān)性
    3.2 miR-505-5p在膀胱癌細(xì)胞中抑制PLK1 的蛋白表達(dá)
    3.3 雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)證明miR-505-5p與 PLK1 mRNA的3'-UTR結(jié)合
    3.4 miR-505-5p通過(guò)靶向作用于PLK1 而影響膀胱癌細(xì)胞的生物學(xué)行為
        3.4.1 CCK-8 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-505-5p對(duì)膀胱癌細(xì)胞增殖活力的影響
        3.4.2 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miR-505-5p對(duì)膀胱癌細(xì)胞遷移能力的影響
        3.4.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)miR-505-5p對(duì)膀胱癌細(xì)胞凋亡的影響
    3.5 過(guò)表達(dá)PLK1 可以回復(fù)miR-505-5p對(duì)于膀胱癌細(xì)胞的生物學(xué)行為的影響
        3.5.1 過(guò)表達(dá)PLK1 可以提高膀胱癌細(xì)胞中PLK1 蛋白的表達(dá)量
        3.5.2 過(guò)表達(dá)PLK1 可以消除miR-505-5p對(duì)膀胱癌細(xì)胞的增殖影響
        3.5.3 過(guò)表達(dá)PLK1 可以消除miR-505-5p對(duì)膀胱癌細(xì)胞促凋亡作用
        3.5.4 過(guò)表達(dá)PLK1 可以消除miR-505-5p對(duì)膀胱癌細(xì)胞遷移的抑制能力
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3888030