發(fā)布時間：2023-12-09 13:44

　　無頭精子癥是一種十分罕見的畸形精子癥,與男性不育有關(guān)。由于無頭精子癥的發(fā)病率極低,目前在這一領(lǐng)域發(fā)表的文章很少,其確切的致病因素及發(fā)病機(jī)制尚不清楚。根據(jù)目前已有的報道,無頭精子癥具有遺傳性疾病的特征,目前只有少數(shù)幾個基因被認(rèn)為與無頭精子癥有關(guān),還遠(yuǎn)不能解釋人無頭精子癥的發(fā)生,因此需要探索更多的遺傳學(xué)病因,從而為臨床診斷及后期治療提供一定的理論依據(jù)。本論文對招募的一名無頭精子癥患者的精子進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析,并排除其他可能導(dǎo)致無頭精子表現(xiàn)的理化因素及其他相關(guān)疾病。而后取該患者的外周血進(jìn)行全外顯子組測序,找到了一個與精子發(fā)生相關(guān)的突變位點,并使用Sanger測序的方法對該患者及其家人的基因進(jìn)行驗證。檢測該患者精子中SUN5基因及PMFBP1基因的蛋白表達(dá),以排除其他可能的基因突變對于該患者無頭精子表型的影響。對該患者的精子進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析:巴氏染色后,在光學(xué)顯微鏡下觀察該患者精子,標(biāo)本中未見完整精子,且絕大多數(shù)為無頭精子,少數(shù)可見有頭無尾精子。在透射電子顯微鏡下觀察,患者精子頭部缺失,僅有尾部結(jié)構(gòu),尾部頂端殘留有胞漿小滴,尾部中段線粒體數(shù)量減少,線粒體形態(tài)及分布發(fā)生異常,線粒體鞘排列紊亂,未見明顯...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 精子概述
        1.1.1 精子發(fā)生
        1.1.2 精子正常形態(tài)
    1.2 畸形精子癥
    1.3 無頭精子
    1.4 無頭精子癥的遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制
    1.5 無頭精子癥的治療及輔助生殖結(jié)局
第二章 無頭精子癥患者精子形態(tài)學(xué)分析
    2.1 研究對象
    2.2 材料與方法
        2.2.1 主要實驗試劑及儀器
        2.2.2 精液的采集
        2.2.3 精液常規(guī)及精子質(zhì)量分析
        2.2.4 精子的巴氏染色
        2.2.5 精子透射電子顯微鏡樣本制備
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 患者無頭精子癥的診斷
        2.3.2 巴氏染色涂片觀察
        2.3.3 精子超微結(jié)構(gòu)觀察
第三章 全外顯子組測序及桑格測序
    3.1 材料與方法
        3.1.1 標(biāo)本的采集
        3.1.2 全外顯子組測序(whole-exome sequencing,WES)
        3.1.3 桑格測序
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 患者全外顯子組測序
        3.2.2 先證者及其家屬桑格測序
        3.2.3 家系系譜分析
        3.2.4 數(shù)據(jù)庫生物信息學(xué)分析
第四章 檢測精子中TSGA10、SUN5和PMFBP1蛋白表達(dá)
    4.1 材料與方法
        4.1.1 主要實驗試劑及儀器
        4.1.2 精子的免疫染色
    4.2 實驗結(jié)果
        4.2.1 SUN5蛋白及PMFBP1蛋白的免疫染色
        4.2.2 TSGA10蛋白的免疫染色
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡介
致謝



本文編號：3871693