研究背景和目的： 前列腺癌是一種常見的男性泌尿系統(tǒng)腫瘤,并且在美國的男性腫瘤死亡率排名第二。雖然局限性前列腺癌患者在成功地接受根治性前列腺切除術(shù)或者放射性治療后能夠獲得良好的治療效果,但是前列腺癌患者往往死于激素難治性腫瘤和腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。在實際的臨床工作中,由于各種客觀原因以及缺乏特異性的診斷標(biāo)準(zhǔn),使泌尿外科醫(yī)生對于辨別哪部分前列腺癌患者術(shù)后可能出現(xiàn)腫瘤進(jìn)展、腫瘤復(fù)發(fā),需要及時給予進(jìn)一步的輔助治療這個問題上產(chǎn)生一定的困難。前列腺癌患者的預(yù)后情況根據(jù)腫瘤的臨床分期和病理分級呈現(xiàn)多種的變化。許多科研人員希望尋找前列腺癌的特異性分子標(biāo)記物來幫助臨床醫(yī)生解決臨床上所遇到的困境。研究發(fā)現(xiàn)許多敏感度高的新型前列腺癌分子標(biāo)記物與腫瘤的生物學(xué)侵襲行為有關(guān),并且能夠?qū)膊〉脑\斷和治療產(chǎn)生重要的臨床價值。現(xiàn)階段,如何有效地治療前列腺癌的轉(zhuǎn)移已經(jīng)成為前列腺癌治療方法的一個重要難題。最近,許多研究的焦點集中在如何利用各種預(yù)測前列腺癌預(yù)后情況的臨床指標(biāo)來建立一個診斷模型準(zhǔn)確地提供必要的臨床信息。前列腺癌腫瘤細(xì)胞根據(jù)其所屬種類具有高度或者低度的腫瘤轉(zhuǎn)移潛能,包括細(xì)胞分化、細(xì)胞間粘附、細(xì)胞侵襲力和細(xì)胞運動力。這些促...

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
材料
    1.1 實驗器材
    1.2 實驗試劑
    1.3 前列腺癌組織來源及臨床資料
    1.4 統(tǒng)計分析軟件
    1.5 電腦分析軟件
方法
    2.1 試劑配備
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)基配備
    2.3 細(xì)胞培養(yǎng)和傳代
    2.4 細(xì)胞RNA提取(TRIzol法)
    2.5 細(xì)胞DNA提取方法(過柱法)
    2.6 RNA的提純
    2.7 DNA提純(過柱法)
    2.8 Endpoint PCR
    2.9 SYBR Green I染料法實時定量熒光PCR
    2.10 基因甲基化檢測試驗
    2.11 estern Blot
    2.12 焦磷酸測序
    2.13 標(biāo)本選取方法
    2.14 組織芯片制作方法
    2.15 HE染色
    2.16 免疫組化染色
結(jié)果
    3.1 CD147在各種前列腺細(xì)胞株中的表達(dá)情況
    3.2 甲基化抑制劑5-Aza-2′-deoxycytidine處理P69和PC3細(xì)胞株后CD147表達(dá)情況變化
    3.3 基因甲基化特異性檢測(Methylation Detection)
    3.4 前列腺增生組織和前列腺癌石蠟標(biāo)本基因組DNA的CD147甲基化檢測結(jié)果
    3.5 焦磷酸測序
    3.6 HE染色圖(前列腺癌組織)
    3.7 免疫組化圖
    3.8 免疫組化分析結(jié)果
    3.9 CD147表達(dá)與前列腺癌各項相關(guān)臨床病理指標(biāo)的關(guān)系
    3.10 CD147表達(dá)與前列腺癌預(yù)后的關(guān)系(無PSA生化復(fù)發(fā)生存率,無腫瘤轉(zhuǎn)移生存率和總體生存率Kaplan-Meier生存曲線分析)
    3.11 CD147和各項相關(guān)臨床病理指標(biāo)對生存率影響的單因素和多因素分析
    3.12 CD147表達(dá)在不同前列腺癌病理分期的無PSA生化復(fù)發(fā)生存率和總體生存率分析
    3.15 CD147表達(dá)在不同Gleason評分下的無PSA生化復(fù)發(fā)生存率和總體生存率分析
討論
總結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝
統(tǒng)計學(xué)審稿證明



本文編號：3865340