目的探究醌型二氫生物喋呤還原酶(Quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)是否可以通過調(diào)控凋亡,進(jìn)而影響輸尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)誘導(dǎo)的腎間質(zhì)纖維化。方法采用12只3周齡大小的SPF級(jí)雄性SD大鼠,通過單側(cè)輸尿管結(jié)扎、輸尿管逆行注射高表達(dá)QDPR慢病毒的方式,采用隨機(jī)原則將以上大鼠進(jìn)行分組,按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),分成以下四組:假手術(shù)(Sham)組、UUO組、對(duì)照組(UUO+QDPR空載重組慢病毒)、QDPR高表達(dá)組(UUO+QDPR高表達(dá)重組慢病毒,QDPR+)。模型構(gòu)建后,將各組大鼠正常飼養(yǎng)14天,最后以安樂死方式,將各組大鼠進(jìn)行處死,通過免疫組化、Western檢測(cè)各組大鼠腎臟內(nèi)QDPR、Ⅳ型膠原、Vimentin、Bax、BCL2蛋白的表達(dá)、苦味酸-酸性復(fù)紅染色(Van Gieson,VG)檢測(cè)膠原纖維沉改變。結(jié)果1成功構(gòu)建本研究所用的UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化模型:通過對(duì)UUO及Sham組進(jìn)行VG染色,檢測(cè)各組膠原蛋白附著區(qū)域的大小,發(fā)現(xiàn)UUO組膠原蛋白的附著區(qū)域大小明顯增高(P<0.05...

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 材料與方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.4 試劑配制
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 動(dòng)物的飼養(yǎng)及其分組
        1.2.2 腎臟纖維化大鼠模型建立
        1.2.3 大鼠各組標(biāo)本的收集
        1.2.4 大鼠腎臟組織石蠟切片
        1.2.5 Van Gieson染色
        1.2.6 免疫組化
        1.2.7 蛋白提取及濃度測(cè)定
        1.2.8 蛋白免疫印跡
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)分析
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.3.1 UUO大鼠模型構(gòu)建成功
        1.3.2 在UUO模型中QDPR蛋白表達(dá)降低,凋亡增加
        1.3.3 QDPR過表達(dá)可緩解UUO誘導(dǎo)的大鼠腎間質(zhì)纖維化
        1.3.4 在UUO模型中,QDPR可抑制凋亡相關(guān)信號(hào)分子
    1.4 討論
    1.5 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
第2章 綜述 梗阻性腎病及UUO模型研究進(jìn)展
    2.1 梗阻性腎病
        2.1.1 梗阻性腎病的病理概要
        2.1.2 梗阻性腎損傷過程
        2.1.3 間質(zhì)炎癥
        2.1.4 腎小管細(xì)胞凋亡
        2.1.5 腎小管間質(zhì)纖維化
        2.1.6 梗阻性腎病的潛在生物標(biāo)志物
    2.2 UUO模型的研究進(jìn)展
        2.2.1 炎癥反應(yīng)
        2.2.2 TGF-β-BMP超家族參與
        2.2.3 UUO中的氧化應(yīng)激
        2.2.4 UUO中的凋亡
    2.3 結(jié)束語
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間研究成果



本文編號(hào)：3863552