目的:由于近些年表觀遺傳學(xué)的發(fā)展,基因啟動(dòng)子甲基化檢測(cè)在預(yù)測(cè)癌癥診斷預(yù)后方面擁有巨大的潛力。PITX2啟動(dòng)子的高CpG島增加其甲基化程度,其能夠成為新的膀胱癌預(yù)測(cè)因子。方法:QRT-PCR檢測(cè)永生化膀胱上皮細(xì)胞系(SV-HUC)和3種膀胱癌細(xì)胞系(EJ、5637、T24)以及癌組織和癌旁組織的差異性表達(dá)。通過(guò)DNA甲基化測(cè)定實(shí)驗(yàn)對(duì)33例全膀胱切除術(shù)切除癌組織進(jìn)行甲基化程度測(cè)定,分為大于50%甲基化,小于50%甲基化建立甲基化程度與腫瘤分期分級(jí)的聯(lián)系。結(jié)果:使用實(shí)時(shí)定量RT-PCR(Q-PCR)證明PITX2在膀胱癌細(xì)胞中高表達(dá)。癌組織中甲基化程度明顯高于癌旁組織。PITX2啟動(dòng)子甲基化與腫瘤大小(P=0.026 7)、高級(jí)別(P=0.027 7)和TNM分期(0.016 0)顯著相關(guān)。在預(yù)測(cè)腫瘤侵襲(T2-T4腫瘤)中,PITX2啟動(dòng)子甲基化的ROC曲線下面積(AUC)為0.867。Kaplan-Meier生存分析表明,與低PITX2甲基化表達(dá)的腫瘤相比,高PITX2啟動(dòng)子甲基化表達(dá)的腫瘤與較短的總體存活相關(guān)。結(jié)論:PITX2在膀胱癌組織中異常高表達(dá),并且PITX2啟動(dòng)子區(qū)域在癌組織中...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 人群選擇
    1.2 細(xì)胞系選擇
    1.3 RNA提取、逆轉(zhuǎn)錄和PITX2差異表達(dá)檢測(cè)
    1.4 免疫組化檢測(cè)PITX2蛋白差異表達(dá)
    1.5 甲基化DNA檢測(cè)
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 PITX2差異表達(dá)
    2.2 蛋白水平上檢測(cè)PITX2差異表達(dá)
    2.3 PITX2啟動(dòng)子甲基化差異檢測(cè)
    2.4 PITX2啟動(dòng)子甲基化與膀胱癌臨床病理因素的相關(guān)性
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